徐 錚 馬曉莉 劉燕玲 劉清神 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 510642

簡(jiǎn)述輪狀病毒感染及其防治措施

徐 錚 馬曉莉 劉燕玲 劉清神 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 510642

輪狀病毒感染是一種嬰幼兒和多種幼齡動(dòng)物(包括豬、家禽、馬、牛、羊等)易感的急性腸道人畜共患傳染病，以腹瀉和脫水為特征。近年來，世界許多國(guó)家都有發(fā)生該病的報(bào)道，我國(guó)也從患腹瀉的人和多種動(dòng)物中分離到病毒。該病不僅感染率高，有時(shí)發(fā)病率也相當(dāng)高。因此輪狀病毒是兒童及幼年動(dòng)物腹瀉的主要病因，無論在畜牧生產(chǎn)和人類健康上都帶來極大的危害。本文就如何診斷和防治輪狀病毒感染進(jìn)行闡述，旨在對(duì)其防控提供參考。

輪狀病毒；人畜共患?。环揽?/p>

1 病原

輪狀病毒（Rotavirus）屬呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬，由11個(gè)雙股RNA片段組成，有雙層衣殼，因像車輪而得名[1]。輪狀病毒分為 A、B、C、D、E、F6 個(gè)群，A 群為常見的典型病毒，宿主包括人和各種動(dòng)物，其他幾個(gè)群則不常見。B群宿主為豬、牛、大鼠和人，C群和E群為豬，D群為火雞和雞，F(xiàn)群為禽。

輪狀病毒很難在細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，有的即使能夠增殖也不產(chǎn)生或僅輕微產(chǎn)生細(xì)胞病變。輪狀病毒對(duì)理化因素有較強(qiáng)的抵抗力，室溫下能保存7個(gè)月。對(duì)酸pH3～9穩(wěn)定，能耐超聲震蕩和脂溶劑。加熱60℃、30分鐘存活，但63℃、30分鐘則被滅活。

2 流行病學(xué)

患病的人、病畜和隱性患者、患畜是該病的主要傳染源。病毒主要存在于腸道內(nèi)，隨糞便排到外界環(huán)境造成污染，經(jīng)消化道途徑傳染易感家畜。痊愈動(dòng)物從糞中排毒的持續(xù)期至少3周。由于病畜痊愈獲得的主要是細(xì)胞免疫，對(duì)病毒持續(xù)存在影響的時(shí)間不長(zhǎng)，所以痊愈動(dòng)物可以再感染。更重要的是輪狀病毒可以從人或動(dòng)物傳給另一種動(dòng)物，如人輪狀病毒可以使仔豬和猴等感染發(fā)病。有調(diào)查顯示，豬場(chǎng)工作人員在養(yǎng)豬場(chǎng)工作的工齡與輪狀病毒感染有關(guān)，2～3年工齡的陽性率較高，其與1～2年工齡和3年以上工齡陽性率的差異有顯著性意義。所以只要病毒在人或一種動(dòng)物中持續(xù)存在，就有可能造成在自然界長(zhǎng)期傳播，也許這是該病普遍存在的重要因素。

該病一年四季均可發(fā)生，但多發(fā)生于晚秋、冬季和早春等寒冷季節(jié)。新疆石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院對(duì)1999年～2002年間不同時(shí)期的6歲以下急性腹瀉患兒糞便標(biāo)本進(jìn)行輪狀病毒檢測(cè)分析，顯示輪狀病毒多發(fā)于寒冷季節(jié)[2]。該病常呈地方流行性，豬的感染率最高可達(dá)90%～100%，發(fā)病豬多是8周齡以下的仔豬，日齡越小的仔豬發(fā)病率和死亡率越高，發(fā)病率一般為10%～80%，病死率為0～10%，5日齡內(nèi)發(fā)病豬死亡率可達(dá)100%。

3 發(fā)病機(jī)理

病毒經(jīng)口進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)，由于能抵抗蛋白分解酶和胃酸的作用，所以能夠順利通過胃到達(dá)小腸，經(jīng)胰蛋白酶激活而感染小腸絨毛頂部上皮，在其中增殖并使之發(fā)生變性、溶解脫落，絨毛逐漸縮短變寬，于是發(fā)生吸收不良，雙糖特別是乳糖消化障礙，電解質(zhì)隨細(xì)胞外液轉(zhuǎn)移到腸腔，從而導(dǎo)致腹瀉。

輪狀病毒用來穿透寄主細(xì)胞膜的工具是免疫系統(tǒng)的一個(gè)主要目標(biāo)，但對(duì)這些非囊膜病毒穿透脂質(zhì)雙層的機(jī)制人們卻很不了解。一項(xiàng)新的研究將輪狀病毒Spike蛋白VP4的假想膜穿透區(qū)域的晶體結(jié)構(gòu)與輪狀病毒病毒體的一個(gè)電子低溫顯微圖象重建做了比較，結(jié)果顯示一個(gè)激烈的“回折”重排，具有在膜穿透中破壞細(xì)胞膜的可能性。該結(jié)構(gòu)確立了一個(gè)很有希望的、可包括在針對(duì)輪狀病毒潛在重組疫苗中的成分[3]。輪狀病毒感染的主要癥狀是腹瀉，可是病毒侵入腸道后導(dǎo)致腸液和電解質(zhì)流失到腸腔而導(dǎo)致腹瀉的機(jī)制人們?nèi)圆磺宄?。一?xiàng)新的研究建立了一個(gè)假說模型：輪狀病毒感染腸段后，會(huì)激活腸壁內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng) （the enteric nervous system，ENS），而這個(gè)系統(tǒng)會(huì)導(dǎo)致腸液及電解質(zhì)流失。目前有4種不同的抑制ENS活性的藥物在小白鼠身上實(shí)驗(yàn)，證明對(duì)腹瀉有顯著的緩解作用[4]。

4 臨床癥狀

豬的潛伏期12～24小時(shí)。病初精神沉郁，食欲不振，不愿走動(dòng)，有些仔豬吃奶后發(fā)生嘔吐，繼而腹瀉，糞便呈黃色、灰白色或黑色，為水樣或糊狀。腹瀉越久，脫水越明顯。嚴(yán)重的脫水常見于腹瀉開始后3～7天，體重可因此減輕30%。

人發(fā)生于嬰兒及兒童，潛伏期2～4天，有腹瀉、嘔吐、發(fā)熱和腹痛等癥狀，40%～60%的患者有脫水現(xiàn)象。有報(bào)道稱輪狀病毒亦可引起病毒性心肌炎[5]，廣州市兒童醫(yī)院對(duì)432例腹瀉患兒進(jìn)行輪狀病毒ELISA法及凝膠電泳法檢測(cè)，做心電圖和心肌酶5項(xiàng)檢測(cè)。結(jié)果432例輪狀病毒感染腹瀉病人并發(fā)病毒性心肌炎32例，結(jié)論是病毒性心肌炎也可由輪狀病毒引起[5]。還有發(fā)現(xiàn)可致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害及呼吸系統(tǒng)等的器官損害[6]。

5 病變

各種動(dòng)物輪狀病毒感染的病變基本相同。病變主要限于消化道，眼觀可見胃壁遲緩，內(nèi)充滿凝乳塊和乳汁。小腸腸壁菲薄，半透明，內(nèi)容物呈液狀、灰黃色或灰黑色。有時(shí)小腸廣泛出血，腸系膜淋巴結(jié)腫大。小腸絨毛用電鏡切片觀察和免疫熒光檢查，可看到絨毛萎縮變短，隱窩細(xì)胞增生，圓柱狀的絨毛上皮細(xì)胞被鱗狀或立方形的細(xì)胞所取代，而絨毛固有層有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。

6 診斷

根據(jù)病發(fā)在寒冷季節(jié)、多侵害幼齡動(dòng)物、突然發(fā)生水樣腹瀉、發(fā)病率高和病變集中在消化道等特點(diǎn)可做出初步診斷。實(shí)驗(yàn)室確診首推電鏡檢查，其次為免疫熒光抗體技術(shù)，ELISA雙抗體夾心法已被世界衛(wèi)生組織列為輪狀病毒的標(biāo)準(zhǔn)診斷方法。另外組織培養(yǎng)分離病毒、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、對(duì)流免疫電泳、凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)也可應(yīng)用。細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒較難，一般很少應(yīng)用。普通群體血清抗體陽性率及抗體滴度很高，所以血清檢查一般無診斷意義。

7 治療

（1）發(fā)現(xiàn)病畜后除采取一般的防疫措施外應(yīng)停止哺乳，用葡萄糖鹽水給病畜自由飲用。對(duì)病畜進(jìn)行對(duì)癥治療，如投用收斂止瀉劑，使用抗生素防止繼發(fā)細(xì)菌感染，靜脈注射葡萄糖鹽水和碳酸氫鈉溶液以防止脫水和酸中毒等。該病的治療暫無特效藥，預(yù)防主要依靠加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和注射疫苗，執(zhí)行一般的獸醫(yī)防疫措施。要做到讓新生仔畜及早吃到初乳，以接受母源抗體的保護(hù)。

（2）嬰兒感染輪狀病毒，除一般的對(duì)癥治療外，目前不斷有新的治療方案出臺(tái)。①魚腥草治療嬰幼兒輪狀病毒腸炎[7]。自2001年8月～2002年12月間，江蘇南通醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院對(duì)嬰幼兒輪狀病毒腸炎采用中藥制劑魚腥草配合口服補(bǔ)液鹽(0RS)治療，取得了滿意療效。結(jié)果為魚腥草組顯效率82.7%，有效率14.8%，無效率2.5%；病毒唑組顯效率38.0%，有效率54.4%，無效率7.6%。②電超導(dǎo)經(jīng)皮給藥治療小兒輪狀病毒腹瀉[8]。沈陽省人民醫(yī)院兒科在2001年5月至2003年10月間采用電超導(dǎo)經(jīng)皮給藥治療50例小兒輪狀病毒腹瀉,取得了良好的療效。2組治療效果比較,差異有顯著意義(P＜0.01),證明電超導(dǎo)經(jīng)皮給藥治療小兒輪狀病毒腹瀉有良好的療效。另外還有干擾素治療法、金銀花注射液治療法、雙黃連治療法和推拿治療法等新療法報(bào)道。

8 預(yù)防

對(duì)該病應(yīng)本著“防重于治”的原則，免疫接種的預(yù)防作用尤顯重要。目前普遍使用的是滅活苗和弱毒苗。

（1）輪狀病毒疫苗的發(fā)展歷史[9]。Rotashield是世界上最早的輪狀病毒疫苗，1998年在美國(guó)許可生產(chǎn)與應(yīng)用[10]。但是Rotashield的制造商于1999年收回了市場(chǎng)上的疫苗并停止生產(chǎn)。原因是此疫苗被發(fā)現(xiàn)可能導(dǎo)致腸套疊和腸梗阻發(fā)生的危險(xiǎn)。之后我國(guó)已成為世界上第二個(gè)擁有輪狀病毒活疫苗的國(guó)家。2002年由甘肅省蘭州生物制品研究所研制的口服輪狀病毒活疫苗，已被世界衛(wèi)生組織列入“全球疫苗腹瀉病控制和免疫計(jì)劃”中，同時(shí)向各國(guó)建議將此疫苗列入本國(guó)的兒童免疫計(jì)劃。

（2）我國(guó)新型疫苗的研究。目前我國(guó)研制輪狀病毒重組疫苗、轉(zhuǎn)基因植物口服疫苗和轉(zhuǎn)基因疫苗的研究工作也正在進(jìn)行中。VP4由輪狀病毒第四基因編碼，位于病毒外殼，是輪狀病毒的主要中和抗原，與病毒的毒力及在組織培養(yǎng)中限制病毒增殖有關(guān)。近年來對(duì)VP4的研究日趨深入，認(rèn)為其與病毒復(fù)制有關(guān)，在免疫應(yīng)答中作用顯著，產(chǎn)生中和抗體的能力大于VP7。2003年南京師范大學(xué)做了在馬鈴薯細(xì)胞中表達(dá)A組輪狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白的研究,為研制輪狀病毒重組疫苗和轉(zhuǎn)基因疫苗做了前期準(zhǔn)備[11]。

[1]蔡寶祥主編，家畜傳染病學(xué)，第四版，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版，2001，2：173～176.

[2]陳志剛，楊軍，周婷，付錦艷，6120例嬰幼兒急性腹瀉輪狀病毒感染情況調(diào)查，新疆醫(yī)學(xué)，2004年第34卷.

[3]Philip R.Dormitzer,Emma B.Nason,B.V.Venkataram Prasadamp;Stephen C.Harrison,Structural rearrangements in the membrane penetration protein ofa non-enveloped virus,nature,Received 3 June;accepted 13 July 2004;doi:10.1038/nature02856.

[4]Ove Lundgren,1?Attila Timar Peregrin,1 Kjell Persson,1 Shirin Kordasti,1 Ingrid Uhnoo,2 Lennart Svensson 3,Role ofthe Enteric NervousSystem in the Fluid and Electrolyte Secretion of Rotavirus Diarrhea,Science,Vol 287,Issue 5452,491-495,21 January 2000, [DOI:10.1126/science.287.5452.491].

[5]李小芹，輪狀病毒腸炎致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害38例，實(shí)用兒科臨床雜志，2004，03：第 19卷，第三期.

[6]姚宜新，伍曼玲，32例嬰幼兒輪狀病毒性腸炎為首發(fā)癥狀的病毒性心肌炎，井岡山醫(yī)專學(xué)報(bào)，2004，01：第11卷，第一期.

[7]于冬才，陳儉，魚腥草治療嬰幼兒輪狀病毒腸炎的療效觀察，河北醫(yī)學(xué)，2004，02：第十卷，第二期.

[8]胡國(guó)斌，李玉梅，焦鐵健，電超導(dǎo)經(jīng)皮給藥治療小兒輪狀病毒腹瀉療效觀察，中國(guó)基層醫(yī)藥，2004，04：第11卷，第四期.

[9]State of the Art of New Vaccines Research and Development,Initiative for Vaccine Research,World Health Organization,Geneva,April 2003.

[10]Cunliffe,NA,Bresee,JS,Hart,CA.Rotavirus vaccines:development,current issues and future prospects.Journal of Infection.45:1-9.The British Infection Society.2002.

[11]王明忠，朱進(jìn)，A組輪狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白基因在馬鈴薯細(xì)胞中的初步表達(dá)，免疫學(xué)雜志，2004年5月，第20卷，第三期.

項(xiàng)目來源：廣東省省級(jí)科技計(jì)劃項(xiàng)目（2016A020212021）.

徐錚（1979－），男，助理研究員，碩士，研究方向：動(dòng)物傳染病學(xué)。