陳方耿，莫志平

(東莞市東坑醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 東莞 523451)

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與免疫功能狀態(tài)的關(guān)系

陳方耿，莫志平

(東莞市東坑醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 東莞 523451)

目的 探討復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與免疫功能狀態(tài)的關(guān)系。方法 選擇復(fù)發(fā)性流產(chǎn)產(chǎn)婦152例作為流產(chǎn)組，依據(jù)流產(chǎn)類型分為復(fù)發(fā)組(復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，61例)和原發(fā)組(原發(fā)性流產(chǎn)，91例)；選取同期正常分娩的產(chǎn)婦50例作為正常組。采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行免疫功能(血清CD3、CD4、CD8水平)的檢測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清抗精子抗體(AsAb)，比較各組產(chǎn)婦血清免疫功能，分析血清AsAb與免疫功能狀態(tài)的關(guān)系。結(jié)果 在血清AsAb、CD3、CD4、CD4/CD8水平方面，流產(chǎn)組明顯高于正常組，復(fù)發(fā)組明顯高于原發(fā)組(均P<0.05)；血清AsAb與CD3、CD4、CD4/CD8呈正相關(guān)關(guān)系(r1=0.572，P<0.05；r2=0.513，P<0.05；r3=0.647，P<0.05)。結(jié)論 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與患者的免疫功能狀態(tài)有關(guān)，檢測(cè)患者免疫因子水平有利于評(píng)估患者的病情，提示醫(yī)師應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注免疫功能狀態(tài)紊亂的產(chǎn)婦。

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)； 免疫功能； 抗精子抗體

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是臨床上常見(jiàn)的產(chǎn)科疾病之一，是指連續(xù)發(fā)生3次或3次以上的自然流產(chǎn)，流產(chǎn)時(shí)可導(dǎo)致停經(jīng)后陰道出血、腹痛等癥狀，嚴(yán)重影響患者的身心健康[1]。目前，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因較為復(fù)雜，與母體生殖道異常、內(nèi)分泌異常、免疫功能異常、生殖道感染等有關(guān)，但多數(shù)患者于臨床上找不到明確病因，故尋找其病因?qū)χ笇?dǎo)患者的臨床治療具有重要的臨床意義[2]。有研究[3]表明，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)多與患者免疫功能狀態(tài)有關(guān)，機(jī)體免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)紊亂者具有更高的流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)。本研究通過(guò)回顧性分析患者及正常產(chǎn)婦的免疫功能狀態(tài)，探討復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與免疫功能的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2012年9月至2015年12月東莞市東坑醫(yī)院收治的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)產(chǎn)婦152例作為流產(chǎn)組，年齡23～41歲，平均(30.47±5.94)歲，流產(chǎn)次數(shù)1～6次，平均流產(chǎn)次數(shù)(3.62±0.71)次，依據(jù)流產(chǎn)類型分為復(fù)發(fā)組(復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，61例)和原發(fā)組(原發(fā)性流產(chǎn)，91例)。復(fù)發(fā)組：年齡23～40歲，平均年齡(30.02±5.72)歲，流產(chǎn)次數(shù)3～6次，平均流產(chǎn)次數(shù)(4.79±0.81)次；原發(fā)組：年齡24～41歲，平均年齡(30.481±5.99)歲，流產(chǎn)次數(shù)1～3次，平均流產(chǎn)次數(shù)(1.24±0.24)次。選取同期正常分娩的產(chǎn)婦50例作為正常組，年齡21～40歲，平均年齡(30.96±6.31)歲。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批且通過(guò)，3組患者年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1)復(fù)發(fā)組經(jīng)病史證實(shí)有連續(xù)發(fā)生3次或以上自然流產(chǎn)[4]；2)丈夫精液常規(guī)無(wú)異常、無(wú)不育等疾?。?)患者或其家屬簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)伴有心、肝、腎等重要器官嚴(yán)重性疾??；2)有血液系統(tǒng)嚴(yán)重性疾病；3)檢測(cè)前3個(gè)月內(nèi)有免疫類藥物治療史。

1.3 免疫功能檢測(cè)

研究對(duì)象于早晨空腹抽取左上臂靜脈血4 mL置入無(wú)菌且裝有0.2 mL(109mmol·L-1)枸櫞酸鈉(湖南爾康制藥股份有限公司)的抗凝試管中充分混勻，分別加入20 μL CD3-PC5、CD4-FITC、CD8-PE單抗，以小鼠抗人FITC為對(duì)照，混勻后室溫避光孵育30 min，加入2 mL紅細(xì)胞裂解液混勻后室溫避光孵育10 min，1200 r·min-1離心5 min，棄上清，加入2 mL磷酸鹽緩沖液(PBS)混勻后再離心洗劑1次，加入500 μL PBS重懸后，通過(guò)美國(guó)Beckman Coulte公司提供的Coulter Epics-XL型流式細(xì)胞儀進(jìn)行CD3、CD4、CD8水平的檢測(cè)，并計(jì)算CD4/CD8。以上單抗和紅細(xì)胞裂解液均為美國(guó)Beckman Coulte公司產(chǎn)品，購(gòu)自北京友華志科公司，所有操作均嚴(yán)格依據(jù)說(shuō)明書(shū)相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。

1.4 血清抗精子抗體(AsAb)檢測(cè)

研究對(duì)象血液樣本采集同免疫功能檢測(cè)，完畢后3000 r·min-1離心10 min，取適量上清液置入無(wú)菌試管中，滴入AsAb試劑[試劑盒由南京基蛋生物科技有限公司提供，蘇食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2013第2400088號(hào)，50人份·盒-1]，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清AsAb，用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)計(jì)算上述因子的表達(dá)水平，所有操作均嚴(yán)格依據(jù)說(shuō)明書(shū)相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。AsAb的正常值范圍為0～70 mU。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，血清AsAb與免疫功能狀態(tài)的關(guān)系采用Pearson分析法分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 流產(chǎn)組與正常組血清AsAb、CD3、CD4、CD4/CD8水平比較

流產(chǎn)組患者血清AsAb、CD3、CD4、CD4/CD8水平明顯高于正常組(均P<0.05)，2組患者血清CD8水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

組別nCD3/%CD4/%CD8/%CD4/CD8AsAb/mU流產(chǎn)組15274.23±8.2438.94±4.7128.49±3.671.47±0.33184.23±54.21正常組5062.43±5.2131.29±4.0429.01±3.751.04±0.2420.57±6.76t9.51110.3020.8648.49821.258P<0.05<0.05>0.05<0.05<0.05

2.2 復(fù)發(fā)組與原發(fā)組血清AsAb、CD3、CD4、CD4/CD8水平比較

復(fù)發(fā)組患者血清AsAb、CD3、CD4、CD4/CD8水平明顯高于原發(fā)組(均P<0.05)，2組患者血清CD8水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

組別nCD3/%CD4/%CD8/%CD4/CD8AsAb/mU復(fù)發(fā)組6176.46±10.2842.13±6.7228.43±3.591.62±0.54224.59±56.79原發(fā)組9167.25±5.8934.27±5.7929.02±3.421.12±0.4646.57±10.76t6.0127.4121.0206.37822.001P<0.05<0.05>0.05<0.05<0.05

2.3 血清AsAb與CD3、CD4、CD4/CD8的相關(guān)性分析

血清AsAb與CD3、CD4、CD4/CD8呈正相關(guān)關(guān)系(r1=0.572，P<0.05；r2=0.513，P<0.05；r3=0.647，P<0.05)，見(jiàn)圖1—3。

3 討論

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)又稱習(xí)慣性流產(chǎn)，針對(duì)其不同病因，選擇不同治療方法，方可有效緩解患者的臨床癥狀及確保患者的臨床療效[5]。近年來(lái)，隨著人們生活、飲食等及環(huán)境的改變，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)病呈逐年上升的趨勢(shì)，其治療也逐漸受到人們的關(guān)注，但僅有少數(shù)患者可明確其病因并予以針對(duì)性的治療，故如何明確其病因?qū)χ委熢摷膊【哂兄匾呐R床價(jià)值[6-7]。

有研究[8-9]顯示，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者多出現(xiàn)免疫功能異常，由機(jī)體功能或組織損傷所致，提示復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生與免疫功能狀態(tài)紊亂有關(guān)。龍馭云等[10-11]研究表明，AsAb是一個(gè)復(fù)雜的病理產(chǎn)物，可直接干擾生殖過(guò)程，在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者中呈現(xiàn)出高表達(dá)狀態(tài)，提示其高表達(dá)可能是造成流產(chǎn)的重要原因之一。本研究發(fā)現(xiàn)，在血清AsAb、CD3、CD4、CD4/CD8水平方面，流產(chǎn)組>正常組，復(fù)發(fā)組>原發(fā)組，Pearson分析法結(jié)果顯示血清AsAb與CD3、CD4、CD4/CD8呈正相關(guān)關(guān)系，表明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與患者的免疫功能狀態(tài)有關(guān)，檢測(cè)患者免疫因子水平有利于評(píng)估患者的病情。在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生過(guò)程中可能由于病原體感染(如沙眼衣原體、霉菌、滴蟲(chóng)等)生殖道，引起機(jī)體免疫系統(tǒng)一系列的免疫反應(yīng)，激活體內(nèi)多種免疫細(xì)胞(如CD3、CD4等)，而此類免疫細(xì)胞具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用，可合成和分泌大量的免疫因子(如白介素2、白介素4、白介素5等)，這些免疫因子可促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)，同時(shí)還可刺激母體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生循環(huán)或生殖道局部的AsAb；AsAb作為一種抗生殖免疫抗體，其在機(jī)體中的高表達(dá)狀態(tài)則可降低精子活力及精子穿透宮頸黏液和透明帶的能力，影響胚胎的正常發(fā)育，引起復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生[12-13]。同時(shí)妊娠是一個(gè)極其復(fù)雜的生理過(guò)程，胚胎所攜帶的基因有一半來(lái)自父方，其表達(dá)的抗原對(duì)于母體來(lái)說(shuō)是外來(lái)抗原，正常情況下由于母體免疫系統(tǒng)對(duì)胚胎父系抗原識(shí)別所產(chǎn)生的反應(yīng)是免疫營(yíng)養(yǎng)和免疫防護(hù)，使其于母體中可獲得“免疫逃逸”，但上述免疫系統(tǒng)的改變可能使母體免疫系統(tǒng)對(duì)胚胎父系抗原識(shí)別產(chǎn)生變化，使其喪失“免疫逃逸”，打破孕期母體內(nèi)存在的復(fù)雜免疫調(diào)節(jié)狀態(tài)(即免疫耐受或抑制增強(qiáng)，而免疫排斥反應(yīng)減弱)，轉(zhuǎn)變?yōu)槊庖吖簦瑢?dǎo)致機(jī)體免疫功能失衡，進(jìn)而導(dǎo)致母體免疫系統(tǒng)對(duì)胎盤(pán)乃至胚胎產(chǎn)生免疫排斥，從而干擾母體的正常生殖過(guò)程，最終影響胚胎的正常發(fā)育，導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生，是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的重要病因之一，醫(yī)師應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注免疫功能狀態(tài)紊亂的產(chǎn)婦，及時(shí)作出相應(yīng)的干預(yù)治療，以避免不良妊娠結(jié)局的發(fā)生[14-15]。

綜上所述，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與患者的免疫功能狀態(tài)有關(guān)，檢測(cè)患者免疫因子水平有利于評(píng)估患者的病情，提示醫(yī)師應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注免疫功能狀態(tài)紊亂的產(chǎn)婦。

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(責(zé)任編輯：鐘榮梅)

2016-08-14

R714.21

A

1009-8194(2017)01-0045-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2017.01.018