陳 紅 方 英 徐春志 袁翠霞 景書灝

（貴陽市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550000）

豬瘟診斷技術(shù)研究進展

陳 紅 方 英 徐春志 袁翠霞 景書灝

（貴陽市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550000）

豬瘟是傳染病流行的豬瘟病毒感染引起的一種急性、熱性、接觸豬，也被稱為“爛腸瘟”。目前尚無有效的豬瘟藥物，因此早期診斷豬瘟是減少該病造成的損失的有效措施。本文綜述了豬瘟診斷技術(shù)的研究進展，為豬瘟的及時診斷提供參考。

豬瘟；診斷技術(shù)；進展

1 前言

豬瘟是由豬瘟病毒引起的具有高度傳染性和致命性的病毒性疾病。世界動物衛(wèi)生組織將被列為甲型傳染病。中國的養(yǎng)豬業(yè)和巨大的危害，近年來，疫情已經(jīng)發(fā)生了很大的變化和臨床癥狀，通過大規(guī)模流行的波浪型散發(fā)性傳染病，臨床癥狀不典型、非典型豬瘟持續(xù)時間變長（或慢性腦豬瘟）已成為該病的主要形式，廣泛的亞臨床感染、持續(xù)性感染和豬瘟的預(yù)防免疫耐受的診斷帶來了一定的困難。

2 豬瘟診斷技術(shù)研究進展

2.1 實驗室診斷技術(shù)

豬瘟的實驗室診斷可以及時準(zhǔn)確地識別和診斷動物傳染病。是控制豬瘟暴發(fā)流行的有效手段。豬瘟的病理變化和臨床癥狀是豬瘟病毒數(shù)量密切相關(guān)，該菌株的毒力和免疫、感染動物的年齡和種類。除了豬瘟以外，其他類型的豬瘟也難以通過臨床癥狀進行診斷。因此，有必要對疑似豬瘟病例進行實驗室診斷。21世紀以來，免疫學(xué)和分子遺傳學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，豐富了實驗室診斷技術(shù)，提高了實驗室診斷技術(shù)水平。有豬瘟的實驗室診斷方法很多，如直接免疫熒光法和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和用于冰凍組織切片的抗原直接免疫熒光法快速檢測ELISA技術(shù)檢測結(jié)果，最快可在2h內(nèi)獲得，但這種方法的應(yīng)用也有一定局限性，只有豬出血熱病毒單克隆抗體的使用，可以得到準(zhǔn)確的測試結(jié)果，否則無法鑒別豬瘟病毒和瘟病毒病毒。除了檢測豬瘟病毒的表面抗原，RT PCR方法可用于檢測豬瘟病毒的快速診斷和完整的遺傳物質(zhì)。RT-PCR技術(shù)可以識別相對相似的病毒種類。

2.2 分子生物學(xué)檢測技術(shù)

首先是反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)在豬瘟病毒核酸診斷有針對性，根據(jù)豬瘟病毒特異性基因序列，合成一對引物，在引物逆轉(zhuǎn)錄酶和RNA介導(dǎo)的催化轉(zhuǎn)化，成RNA的互補鏈c DNA，加熱后c DNA與RNA鏈解離，并由DNA聚合酶催化引物延伸產(chǎn)生的雙鏈DNA的目標(biāo)，最后目標(biāo)DNA擴增，擴增產(chǎn)物進行電泳，溴化乙錠染色后，在紫外光下（254nm）可以看到特異擴增帶。該方法適用于各種有毒物質(zhì)的檢測，可用于臨床診斷。本發(fā)明操作簡單，特異性強，靈敏度高，重復(fù)性好，可快速檢測。此外，逆轉(zhuǎn)錄巢式聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）也是一種常見的診斷技術(shù)，使用2對聚合酶鏈反應(yīng)引物擴增完整片段。豬瘟病毒擴增的組織材料的含量低，細胞液，該方法可以在中國不同基因亞群病毒強毒株和疫苗病毒可以完全分離的流行，而不是與其他豬流感病毒、牛病毒性腹瀉病毒有非特異性反應(yīng)?？梢钥焖贉?zhǔn)確地診斷豬瘟，并從接種過的豬身上迅速篩選出致命的病毒，并減少未感染的免疫豬被殺死的可能性。

2.3 DNA芯片診斷技術(shù)

DNA芯片診斷技術(shù)是近年來分子生物學(xué)與微電子學(xué)等多學(xué)科交叉融合而成的一項高新技術(shù)，其原型是20世紀80年代中期提出的?；蛐酒臏y序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，在一塊基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探針。當(dāng)溶液中帶有熒光標(biāo)記的核酸序列TATGCAATCTAG，與基因芯片上對應(yīng)位置的核酸探針產(chǎn)生互補匹配時，通過確定熒光強度最強的探針位置，獲得一組序列完全互補的探針序列。據(jù)此可重組出靶核酸的序列。該技術(shù)為基因芯片技術(shù)為豬瘟診斷技術(shù)提供了新的技術(shù)理念，目前已經(jīng)正進行這方面的研究，其研究成果將對我國豬瘟的防控具有深遠意義。

3 豬瘟防控方式

豬瘟發(fā)生后，有必要采取相應(yīng)的防控措施，有效控制豬瘟疫情的蔓延，徹底清除疫情。在防治豬瘟的防控措施，多種選擇，包括受感染的豬和豬殺，豬接觸限制交通，急救免疫預(yù)防設(shè)置隔離區(qū)，不同層次建立監(jiān)測和疫情期間跟蹤系統(tǒng)。多種防治措施和方案在防治效果上各有優(yōu)勢，但在各項防治措施的實施中都存在一些問題。這次捕殺是最有效和最有效的預(yù)防和控制豬瘟、豬瘟的方法，通過殺死受感染的豬和可能接觸過的豬，可以實現(xiàn)對疫情的有效控制。隨著動物福利意識的提高，實施狩獵政策具有成本巨大、靈活性差的特點，因此對這一有效的防控措施的實施也存在一定的爭議。盡管在豬瘟大范圍爆發(fā)的時間是非常有效的，但與動物保護和動物保護的人士，在實施捕殺工作的過程中，也存在一些爭議的防治措施，疫情發(fā)生，造成運行平穩(wěn)，速度補償起著非常重要的作用。如果不能及時給予補償，農(nóng)民將不會全力配合捕殺，也不能完全消除傳染源，從而導(dǎo)致疫情的蔓延。

4 結(jié)語

豬瘟對全球養(yǎng)豬業(yè)的威脅越來越受到人們的重視，如何有效地防治豬瘟已成為研究的熱點。國內(nèi)外學(xué)者對此進行了多方面的研究，試圖從多個層面提高豬瘟的綜合防治水平。在疫苗領(lǐng)域，一種有效的豬瘟亞單位疫苗被設(shè)計用來區(qū)分免疫和自然感染產(chǎn)生的抗體，同時確保亞單位疫苗刺激免疫應(yīng)答。

[1]葉芬，蔡家利.豬瘟診斷方法的研究進展[J].四川畜牧獸醫(yī)，2010，37（9）：28-30.

[2]董毅.豬瘟實驗室診斷技術(shù)研究進展[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2010，（9）：68-69.

[3]胡峰，崔玉東，崔尚金.豬瘟病毒研究進展與防控中的幾項實用技術(shù)[J].豬業(yè)科學(xué)，2010，27（10）：78-83.

[4]陳軼，王君瑋，曹金山，等.非洲豬瘟病原學(xué)及單克隆抗體制備技術(shù)研究進展[J].畜牧與飼料科學(xué)，2012，33（4）：93-95，124.