黎先偉 譯 By D.M.Madson et al

豬圓環(huán)病毒2型疫苗對母豬繁殖性能及其胎兒感染的影響

黎先偉 譯 By D.M.Madson et al

一、研究背景

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）為圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬成員，由Tischer于1974年首先在PK-15細胞中發(fā)現(xiàn)。該病毒粒子含有單股負鏈環(huán)狀DNA，相對分子量5.8×102，無囊膜，不具有血凝活性，基因組全長大約為1.7kb。PCV2有3個公認的基因型，分別是PCV2a、PCV2b和PCV2c。豬圓環(huán)病毒感染的臨床表現(xiàn)多種多樣，包括肺炎、腹瀉、消瘦和母豬繁殖障礙。豬圓環(huán)病毒相關疾病（PCVAD）主要用來描述與PCV2感染有關的多系統(tǒng)的臨床疾病。

加拿大首次報道在健康狀況良好的豬群中檢測到PCV2，隨后發(fā)現(xiàn)它與成年動物的繁殖疾病有關。PCV2相關的繁殖障礙第一次在加拿大報道。臨床上，這種疾病的主要特征是流產(chǎn)、仔豬存活率下降、死胎及木乃伊胎增多。PCV2引起胎兒感染的大體病變包括擴張性心肌炎、肺水腫、肝腫大和腹水。大多數(shù)胎兒感染PCV2的顯微病變主要由心肌衰弱、壞死、纖維素性、壞死性心肌炎。這些病變是由于PCV2對胎兒的心室肌細胞有趨向性。但這種趨向性在懷孕末期有所下降，反而淋巴組織PCV2的分子檢測量有所增加。另外，研究發(fā)現(xiàn)PCV2具有透過胎盤的能力，引起胎兒感染PCV2。有研究證明，分娩前3周感染PCV2病原會引起母豬嗜睡、流產(chǎn)以及出現(xiàn)死胎（早在感染后7天的時候）。

2004至2005年期間，PCVD在北美洲的育肥豬中迅速蔓延，導致以高發(fā)病率、高死亡率以及生長率減慢為特征的疾病大流行。在此次大流行中，PCV2病毒株的分子特性被鑒定為PCV2b基因型，這種基因型以前在北美洲并沒有報道過。從那以后，許多圓環(huán)病毒疫苗開始用于疾病的預防。本文研究的主要目的是母豬接種圓環(huán)病毒2型（PCV2）疫苗對預防胎兒PCV2感染以及繁殖率下降的效果。

二、試驗方法和結(jié)果

12頭SPF（不含PCV2）懷孕母豬隨機的分成4組。第1組為陰性空白對照組；第2組對懷孕28天的母豬接種PCV2疫苗（市面上可買到）；第3組對懷孕28天的母豬接種PCV2疫苗，并在懷孕56天時口鼻滴入PCV2b亞型病毒；第4組對懷孕56天的母豬口鼻滴入PCV2b亞型病毒，不接種PCV2疫苗。在母豬懷孕期間，每周收集一次全部母豬的血清樣品，讓母豬自然分娩。分娩時，收集母豬初乳樣品、喂乳前血清樣品以及初生小豬身上的組織樣品，進行血清學、PCR、組織顯微鏡檢查以及免疫組化等分析。

在本次研究條件下，沒有發(fā)現(xiàn)母豬出現(xiàn)繁殖障礙。第2和3組母豬血清中可以檢測到PCV2特異免疫球蛋白G和血清中和抗體，這可有效預防強毒攻擊所引起母豬病毒血癥。在第3組母豬的初乳樣品、胎兒以及初生小豬中，可以檢測到PCV2的DNA分子，但沒有發(fā)現(xiàn)組織病變和PCV2特異性抗原。

本研究的結(jié)果顯示PCV2的垂直傳播同樣存在于免疫后的母豬。

三、討論

母豬PCV2相關病毒血癥最有可能是胎兒感染的緣由，盡管有研究顯示精液傳播也是一種可能的途徑。已有研究表明母豬懷孕末期鼻內(nèi)接種PCV2后，病毒可以通過胎盤屏障。在本研究中，第4組母豬（未接種疫苗）鼻內(nèi)接種PCV2引起母豬出現(xiàn)病毒血癥，初乳樣品中檢測到PCV2的DNA分子以及抗PCV2抗體。母豬PCV2病毒血癥導致子宮內(nèi)的胎兒經(jīng)胎盤受感染，使PCV2存在垂直傳播的可能。與其他試驗和實地觀察相比，在本試驗條件下，并沒有觀測到PCV2相關繁殖障礙、流產(chǎn)、母豬疾病以弱仔數(shù)增加等癥狀。這可能由于不同的實驗接種的PCV2毒株的劑量有所不同。不過，我們的調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)實際養(yǎng)殖場中，PCV2垂直傳播的發(fā)生率要比報道的數(shù)據(jù)高。

近年來，許多PCV2疫苗在對抗PCVAD方面有確實的效果。當前，3種疫苗批準使用在3至4周齡的仔豬上，另一種疫苗則標明可以在分娩前母豬上使用。一個關于PCV疫苗的研究中，結(jié)果顯示72頭接種疫苗的育肥豬，可有效預防PCV2病毒血癥，減少排泄物和口腔分泌物的病毒DNA的含量。在另一項研究中發(fā)現(xiàn)，疫苗可誘發(fā)中和抗體的產(chǎn)生，降低病毒血癥的發(fā)病率，排泄物中病毒的含量以及PCV2相關的顯微病變。在現(xiàn)場試驗期間，接種PCV2疫苗與未接種疫苗的豬都能觀察到相似的結(jié)果。

迄今為止，只有一種PCV2的疫苗在繁殖動物進行過實驗研究。已有數(shù)據(jù)顯示母豬疫苗接種后能減少母豬分娩時死胎的數(shù)量，降低斷奶仔豬的死亡率及母豬的死亡率，提高母豬的產(chǎn)仔率。實際生產(chǎn)中，接種疫苗已證實可以很好的減輕PCV2相關繁殖障礙和改善母豬的性能。然而，據(jù)作者所了解，母豬接種PCV2疫苗后對于子宮內(nèi)胎兒PCV2復制的影響目前還沒有相關的研究。

對于檢測懷孕母豬接種PCV2疫苗后免疫應答差異以及懷孕期間子宮內(nèi)免疫調(diào)節(jié)差異的研究已有所報道。在本次研究中，對懷孕28天的母豬接種PCV2疫苗后并沒有觀察到相關的副作用。然而，對懷孕56天的母豬攻入PCV2病毒后，疫苗并不能防止初乳中含有PCV2的DNA分子；胎兒出現(xiàn)PCV2病毒血癥，或者小豬體內(nèi)含有抗PCV2 IgG抗體?？紤]血清收集的時間（每周一次）和PCR鑒定的靈敏性，可能是第3組豬PCV2病毒血癥檢出率有限的原因。有趣的是，其中第3組所產(chǎn)的小豬出生時帶有病毒血癥或能檢測到PCV2抗體，但在組織中（心肌、肺、扁桃體或耳廓）并沒有檢測到PCV2抗原。這意味著要么在懷孕期胎兒感染比第4組的時間出現(xiàn)的更晚，要么母豬接種疫苗后減少胎兒PCV2的復制。

雖然在本研究中PCV2疫苗并不能預防胎兒感染病毒，但有第3組所產(chǎn)的小豬在胎兒期就產(chǎn)生特異性抗體，并沒有出現(xiàn)喂乳前病毒血癥、相關顯微病變以及檢測不到PCV2抗原。這意味著在分娩前，具有免疫活性的胎兒（懷孕期超過70天）能夠清除PCV2的感染，使得沒有檢測到相關顯微病變或PCV2抗原。這個結(jié)果在之前并沒有報道，與豬細小病毒感染胎兒的病例十分相似。

總之，懷孕母豬單純感染PCV2病原并不一定出現(xiàn)繁殖障礙，但與胎兒的感染有一定的聯(lián)系。PCV2疫苗可以使懷孕母豬產(chǎn)生中和抗體和抗PCV2抗體，但是不能阻止垂直傳播。同時，母豬接種疫苗也不能防止其初乳中的PCV2，這也是垂直傳播的另一種途徑。此外，在分娩前子宮內(nèi)具有免疫活性的胎兒能夠清除PCV2的感染。