李 龍

（平邑縣畜牧獸醫(yī)局銅石畜牧獸醫(yī)站，山東平邑 273300）

豬附紅細胞體病并發(fā)豬圓環(huán)病毒病的診治研究

李 龍

（平邑縣畜牧獸醫(yī)局銅石畜牧獸醫(yī)站，山東平邑 273300）

豬附紅細胞體病，單細胞原蟲的一種，屬寄生蟲，也有人認為是立克次氏體目，乏漿體科，屬附紅細胞體屬。其形態(tài)呈環(huán)狀、啞鈴狀、S形、卵圓形、逗點形或桿狀。附紅細胞體病的出現(xiàn)在我國已經(jīng)有20余年的歷史。近年豬的附紅細胞體病有趨于嚴重的態(tài)勢，很多豬場因此損失慘重。附紅細胞體對宿主的選擇并不嚴格，人、牛、豬、羊等多種動物均可感染，且感染率比較高，但除了豬之外的其它動物發(fā)病率不高?；诖?，本文就豬附紅細胞體病并發(fā)豬圓環(huán)病毒病的診治進行研究，以供參考。

豬附紅細胞體病；豬圓環(huán)病毒?。辉\治

1 材料與方法

1.1 發(fā)病動物

60kg左右后備仔豬。

1.2 實驗材料

（1）血清樣品。從現(xiàn)場采集的血液樣品。

（2）實驗動物。臨床解剖送檢的活體病仔豬5頭。

1.3 實驗試劑

豬圓環(huán)病毒（PCV）核酸擴增檢測試劑盒和豬藍耳病病毒（PRRSV）核酸擴增（論文數(shù)字和英文字母全部使用TimesNewRoman狀態(tài)下）檢測試劑盒均購自北京索奧生物技術(shù)有限公司。

1.4 試驗程序和方法

（1）觀察方法。按常規(guī)的流行病學、臨床癥狀和病理變化進行綜合判斷。

（2）實驗室診斷。血液壓片：取抗凝血或鮮血1滴加入3～4倍生理鹽水稀釋蓋上蓋玻片，1000倍油鏡下觀察，可見大多數(shù)紅細胞邊緣呈鋸齒狀、星芒狀或不規(guī)則狀，并有微微顫動，即可診斷為附紅細胞體感染陽性。組織涂片：將無菌采取的肝、脾、腎及淋巴結(jié)涂片，革蘭氏染色鏡檢。PRRSV和PCV-2的PCR檢測：核酸提取。病料RNA和DNA的提取分別用Trizolreagents（RNA提取液）和核酸提取液B（DNA）提取。首先將血清稀釋，取100μl釋出血清加500μlTrizolreagents（RNA提取液）充分震蕩，混勻后室溫放置5min。加入100μl氯仿，用力振蕩15s，室溫靜置10min，4℃13000rpm離心5min。將上層水相轉(zhuǎn)移到干凈的離心管，加入等體積的異丙醇，充分混勻，13000rpm離心5min。棄上清液，加入75%DEPC乙醇，充分混勻，13000rpm離心5min，吸去大部分乙醇。將提取管口敞口在室溫空氣中干燥5min，待乙醇揮發(fā)干凈，用20μlDEPCH2O溶解沉淀。根據(jù)標本數(shù)取逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)管，取2μl上述獲得的RNA并加入7μlPRRSV-SMRTMIX引物進行逆轉(zhuǎn)錄。PRRSV逆轉(zhuǎn)錄的反應(yīng)體系為25μl，反應(yīng)條件為30℃5min、42℃45min后98℃5min滅活轉(zhuǎn)錄酶[1]。

2 結(jié)果和分析

2.1 按常規(guī)流行病學檢查方法所得結(jié)果

（1）臨床表現(xiàn)。臨床檢查發(fā)病豬在腹部、臀部以及后軀兩側(cè)皮膚上出現(xiàn)圓形或不規(guī)則形狀的黑色斑塊狀丘疹，丘疹向中央凹陷，已形成痂皮。也有個別豬鼻端、四肢、下腹部和背部出現(xiàn)紫紅色瘀斑。病豬耳朵發(fā)紫，多數(shù)體溫升高在40℃左右；眼結(jié)膜蒼白，用手觸摸消瘦，豬頜下淋巴結(jié)和腹股溝淋巴結(jié)明顯腫大，尤其是腹股溝淋巴結(jié)。病豬前腔靜脈采血，可見血液稀薄似水[2]。

（2）病理剖檢。共剖檢病豬5頭，呈現(xiàn)多器官廣泛性病理損傷，病變程度差異較大。主要病變有皮下肌肉蒼白，全身淋巴結(jié)，特別是腹股溝、頜下和肺門淋巴結(jié)顯著腫大，達正常的2～3倍，切面嚴重出血呈大理石狀，腸系膜淋巴結(jié)呈索狀腫脹；心包積液，心冠脂肪出血，心外膜和心內(nèi)膜有大量出血點；肺臟高度水腫，間質(zhì)增寬，個別豬肺尖葉和心葉實變，胸腔內(nèi)有較多積水；肝臟輕微腫大，膽囊充盈，膽汁濃稠；脾臟嚴重萎縮，腎臟嚴重腫脹、蒼白，在被膜下有大量出血點和白色壞死點，腎盂出血；膀胱黏膜呈彌漫性出血。胃黏膜形成大片潰瘍且胃門淋巴結(jié)腫大，小腸呈彌漫性出血，腸黏膜大部分已脫落，腸壁菲薄。

2.2 實驗室診斷結(jié)果

血液壓片1000倍油鏡下觀察，可見大多數(shù)紅細胞邊緣呈鋸齒狀、星芒狀或不規(guī)則狀，診斷為附紅細胞體感染陽性，標記為：+++；組織涂片革蘭氏染色鏡檢，未見細菌；電泳檢測結(jié)果顯示豬圓環(huán)病毒（PCV-2）為陽性、藍耳病病毒（PRRSV）檢測為陰性。根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化及實驗室檢查，診斷為豬圓環(huán)病毒和附紅細胞體混和感染。

2.3 綜合防治

（1）加強飼養(yǎng)管理。要想保證防治的有效性，首先就要保證豬飼料的營養(yǎng)平衡，因此，在進行豬飼料配比的時候，要保證配比的合理性，從而保證飼料中的營養(yǎng)平衡。另外，還要給豬適當?shù)难a充維生素、氨基酸等元素，以此增加豬群的抵抗力。

（2）建立完善的生物安全體系。對發(fā)病輕微的豬進行隔離治療，用2～3%燒堿對豬舍消毒，切斷附紅細胞體病的傳播途徑。改進飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激是控制繼發(fā)感染的關(guān)鍵。特別是仔豬斷奶后的3～4周是預防該病最關(guān)鍵的時期，要降低飼養(yǎng)密度，減少豬群的應(yīng)激因素，做好豬瘟、豬偽狂犬病、豬細小病毒病和豬藍耳病疫苗的接種工作。

（3）藥物預防與對癥治療。目前對豬附紅細胞體病療效較好的藥物有長效土霉素、四環(huán)素和貝尼爾等，按說明劑量肌注，連用3～5天。另外，對陽性豬群的貧血豬，可應(yīng)用鐵制劑（右旋糖酐鐵）、土霉素、維生素B12和維生素C等對癥治療。

（4）對圓環(huán)病毒病目前尚無特效的治療藥物，應(yīng)早發(fā)現(xiàn)、早確診、早治療。對發(fā)病不嚴重的豬只，選用新型的抗病毒劑如干擾素、白細胞介導素、免疫球蛋白和轉(zhuǎn)移因子等進行治療；同時采用黃芪多糖注射液并配合維生素B1、維生素B12和維生素c肌肉注射，增強豬自身免疫力。

[1] 宋明.豬附紅細胞體并發(fā)豬圓環(huán)病毒病的診治[J].當代畜禽養(yǎng)殖業(yè)，2014，（1）：136-138.