萬隆，薩喆燕，潘曉華，黃倩茹，許金森（福建省中醫(yī)藥研究院，福建福州350003）

電針督脈穴對大鼠血管性認(rèn)知障礙的影響

萬隆，薩喆燕，潘曉華，黃倩茹，許金森
（福建省中醫(yī)藥研究院，福建福州350003）

目的探討電針督脈穴對腦卒中后認(rèn)知障礙的影響。方法21只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、電針組，每組7只。模型組、電針組用線栓法制備左側(cè)大腦中動脈閉塞模型，電針組電針神庭、百會穴7 d，用Longa評分觀察大鼠神經(jīng)功能缺損情況，用Morris水迷宮檢測大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果與模型組比較，電針組大鼠神經(jīng)功能缺損評分明顯減少，逃避潛伏期顯著縮短，穿越平臺次數(shù)增加。結(jié)論電針督脈穴能減輕大鼠神經(jīng)功能缺損程度，改善血管性認(rèn)知障礙大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

血管性認(rèn)知障礙；學(xué)習(xí)記憶；電針；大鼠

我國已逐漸步入老齡化社會，隨著老齡人口的日益增長，認(rèn)知障礙的發(fā)病率也逐年增加，由此帶來的家庭和社會問題也越來越嚴(yán)重。因此，早期認(rèn)知功能障礙的防治意義重大。血管性認(rèn)知障礙（vascular cognitive impairment，VCI）是指有腦血管病危險(xiǎn)因素、明顯或不明顯的腦血管病引起的從輕度認(rèn)知障礙到癡呆的一大類綜合征［1］，主要表現(xiàn)為記憶力保留而注意力和執(zhí)行功能障礙，可伴有行動和信息處理遲緩、抑郁、情緒不穩(wěn)、情感淡漠等。目前針對VCI治療，國內(nèi)外尚無確切有效的藥物。對于存在認(rèn)知障礙尚未癡呆的患者，可以通過控制各種危險(xiǎn)因素，采取有效的干預(yù)措施，來減輕和逆轉(zhuǎn)認(rèn)知功能缺損癥狀［2］，針灸在治療VCI中占有重要地位。我們采用左側(cè)大腦中動脈閉塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）大鼠模型作為認(rèn)知障礙大鼠模型，通過電針督脈的百會、神庭穴，觀察治療前后模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改變。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組成年雄性SD大鼠21只，清潔級，體質(zhì)量（250±20）g，購自福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，許可證號：SCXK（閩）2012-0001。實(shí)驗(yàn)前1周適應(yīng)性飼養(yǎng)于福建省中醫(yī)藥研究院實(shí)驗(yàn)動物中心，飼養(yǎng)條件：溫度（22±2）℃，濕度（55± 15）%，12 h明暗交替，自由進(jìn)食與飲水。大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、電針組，每組7只。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器Morris水迷宮視頻跟蹤與分析系統(tǒng)（成都盟泰科技有限公司）；SDZ-II型華佗牌電子針療儀（蘇州醫(yī)療用品廠有限公司）。

1.3 模型制備模型組和電針組參考Longa改良線栓法［3］制備左側(cè)大腦中動脈閉塞MCAO大鼠模型，具體方法：大鼠術(shù)前12 h禁食，不禁水。經(jīng)腹腔注射10%水合氯醛（400 mg／kg）麻醉后，大鼠仰臥位固定，常規(guī)備皮消毒。取頸前正中切口，鈍性分離左側(cè)頸總動脈、頸外動脈和頸內(nèi)動脈。結(jié)扎頸外動脈及頸總動脈近心端，于頸總動脈結(jié)扎處遠(yuǎn)端4 mm處剪一小口，插入栓線進(jìn)入頸內(nèi)動脈約18～22 mm，輕微遇阻即止。固定栓線并縫合傷口，待缺血2 h后緩慢退出栓線至頸總動脈分叉處，實(shí)現(xiàn)再灌注。動物于25℃蘇醒，正常飲食。假手術(shù)組只分離動脈，不結(jié)扎、不插線。

1.4 干預(yù)措施電針組參考《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［4］，選神庭、百會穴，0.5寸華佗牌無菌毫針，斜刺0.2～0.3 cm，連接SDZ-II電針儀，電壓5～10 V，以針體輕微抖動為度，疏密波，頻率2～10 Hz，每次20 min，每日1次。手術(shù)后24 h開始治療，連續(xù)7 d。模型組、假手術(shù)組于手術(shù)后回籠飼養(yǎng)，給予同等條件抓取，不做任何治療。

1.5 神經(jīng)行為學(xué)評分大鼠清醒后，根據(jù)Longa法進(jìn)行神經(jīng)功能評分。0分：無神經(jīng)功能缺失癥狀；1分：不能完全伸展患側(cè)前爪；2分：行走時(shí)向患側(cè)轉(zhuǎn)圈；3分：行走時(shí)向患側(cè)傾倒；4分：不能自發(fā)行走，意識喪失。造模24 h后評分1～3分的大鼠納入實(shí)驗(yàn)，剔除死亡和造模不成功的大鼠。

1.6 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)Morris水迷宮為一高50 cm、直徑120 cm的圓形水池，水深30 cm，水溫（26 ±2）℃，加入二氧化鈦使水顯乳白色。水池等分為4個(gè)象限，池壁外標(biāo)4個(gè)入水點(diǎn)，任選1個(gè)象限在其中央放置平臺，平臺高28 cm，直徑6 cm，沒于水下2 cm，水池周圍參照物保持不變。實(shí)驗(yàn)時(shí)，于水迷宮水池中央的上方2 m處設(shè)置1個(gè)攝像頭，自動采集動物游泳圖像，收集信號輸入計(jì)算機(jī)，由水迷宮跟蹤分析系統(tǒng)自動采集和分析處理。

Morris水迷宮包括定位航行實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)2個(gè)部分，定位航行試驗(yàn)：造模前先進(jìn)行2天適應(yīng)性訓(xùn)練，手術(shù)后第3天開始實(shí)驗(yàn)。將受試大鼠依順時(shí)針方向從水池4個(gè)象限面向池壁放入水中，若大鼠90 s內(nèi)爬上平臺并停留3 s以上，則認(rèn)為大鼠找到平臺，此為逃避潛伏期。如果90 s內(nèi)大鼠未找到平臺，則將其引導(dǎo)上平臺，停留10 s，潛伏期記為90 s。歷時(shí)4 d?？臻g探索試驗(yàn)：術(shù)后第7天撤去平臺，取原平臺對側(cè)象限為入水點(diǎn)將受試大鼠放入水中，測定大鼠在90 s內(nèi)穿過原平臺區(qū)域的次數(shù)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)用x±s表示，用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，組內(nèi)數(shù)據(jù)比較用配對t檢驗(yàn)，組間數(shù)據(jù)比較用方差分析、LSD檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1、表2、表3。

表1 3組大鼠神經(jīng)功能缺損評分比較min

表1 3組大鼠神經(jīng)功能缺損評分比較min

注：與假手術(shù)組比較，1）P＜0.01；與模型組比較，2）P＜0.01；與術(shù)后1 d比較，3）P＜0.01。

組別電針組模型組假手術(shù)組術(shù)后7 d 0.71±0.101）2）3）1.07±0.071）0.00±0.00大鼠／只7 7 7術(shù)后1 d 1.00±0.001）1.14±0.141）0.00±0.00

表2 3組大鼠逃避潛伏期

表2 3組大鼠逃避潛伏期

注：與假手術(shù)組比較，1）P＜0.01；與模型組比較，2）P＜0.05。

組別電針組模型組假手術(shù)組術(shù)后4 d 48.33±7.811）2）75.34±8.521）17.23±2.67大鼠／只7 7 7術(shù)后3 d 52.68±9.911）66.25±4.211）28.65±7.11術(shù)后5 d 33.85±7.191）3）67.90±9.361）15.38±3.10術(shù)后6 d 26.96±4.091）3）70.31±10.701）13.82±1.65

表3 3組大鼠穿過平臺位置的次數(shù)次

表3 3組大鼠穿過平臺位置的次數(shù)次

注：與模型組比較，1）P＜0.05。

組別電針組模型組假手術(shù)組大鼠／只7 7 7術(shù)后7 d 3.14±0.961）0.57±0.57 2.71±0.47

3 討論

3.1 中醫(yī)治療認(rèn)知障礙時(shí)多選擇督脈穴位，朱永磊等［5］選擇水溝、印堂、神庭、上星、百會等穴位，采用從督論治針刺法治療腦卒中后認(rèn)知障礙患者，發(fā)現(xiàn)其對于簡易智能狀態(tài)檢查量表評分及日常生活活動量表評分有明顯改善，優(yōu)于對照組常規(guī)針刺法。黃凡等［6］發(fā)現(xiàn)針刺百會、水溝、神門等穴位，對腦梗死后血管性認(rèn)知障礙的臨床療效優(yōu)于電針療法。林志誠等［7］觀察電針百會穴對腦梗死后認(rèn)知障礙患者聽覺事件相關(guān)電位P300的影響，結(jié)果表明電針后認(rèn)知障礙患者P300潛伏期縮短、波幅升高，優(yōu)于單純認(rèn)知訓(xùn)練對照組。

3.2 本研究選擇督脈的神庭、百會穴作為電針穴位，因其能調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)，與腦密切相關(guān)［8］。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示通過線栓法制作左側(cè)大腦中動脈閉塞大鼠模型，造模24 h后大鼠的神經(jīng)行為評分明顯高于假手術(shù)組（P＜0.01），說明模型制備成功。模型制備3 d后模型組和電針組大鼠逃避潛伏期明顯高于假手術(shù)組（P＜0.01），可見大腦中動脈缺血再灌注造成了大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶功能障礙。連續(xù)電針神庭、百會穴7 d后，電針組大鼠的逃避潛伏期較模型組大鼠明顯縮短（P＜0.01），穿過平臺的次數(shù)也高于模型組大鼠（P＜0.05），說明電針督脈穴可以有效改善大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，減輕認(rèn)知障礙的癥狀。

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R245.3

A

1000-338X（2017）01-0033-02

2016-10-28

福建省屬公益類科研院所基本科研專項(xiàng)資助課題（2015R 1035-14，2016R1033-10，），福建省衛(wèi)計(jì)委衛(wèi)生系統(tǒng)中青年骨干人才培養(yǎng)項(xiàng)目資助課題（2015-ZQN-JC-35）

萬?。?972—），男，實(shí)驗(yàn)師，主要從事中醫(yī)經(jīng)絡(luò)現(xiàn)代研究。

許金森（1963—），男，研究員。E-mail：xujinsenjls@163.com