閆 峻，趙春芳，李伯平，劉志強(qiáng)，郭冬發(fā)，鄭 重

(1.核工業(yè)北京地質(zhì)研究院，北京 100029；2.吉林大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130021；3.中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所，吉林 長(zhǎng)春 130022)

板藍(lán)根化學(xué)成分及抗氧化活性的研究

閆 峻1，趙春芳2，李伯平1，劉志強(qiáng)3，郭冬發(fā)1，鄭 重3

(1.核工業(yè)北京地質(zhì)研究院，北京 100029；2.吉林大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130021；3.中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所，吉林 長(zhǎng)春 130022)

采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)和直接進(jìn)樣的電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法(ESI-MS/MS)分析板藍(lán)根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和95%乙醇提取物的化學(xué)成分。同時(shí)，采用鐵離子還原能力法(FRAP)評(píng)價(jià)板藍(lán)根的抗氧化活性，并通過自由基清除能力法(DPPH)對(duì)FRAP法的測(cè)試結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果表明：在板藍(lán)根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和95%乙醇提取物中共鑒別出吲哚類、喹唑酮類、有機(jī)酸類、核苷類、嘌呤類、氨基酸類、黃酮類以及糖類等28個(gè)化合物。研究發(fā)現(xiàn)，板藍(lán)根抗氧化活性部位主要集中在極性較低的化學(xué)組分中，吲哚類、喹唑酮類和有機(jī)酸類化合物是其主要的有效成分。該方法簡(jiǎn)便、快捷、靈敏，可為中藥化學(xué)成分分析和抗氧化活性評(píng)價(jià)提供方法參考。

板藍(lán)根；化學(xué)成分；高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)；電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(ESI-MS/MS)；抗氧化活性

板藍(lán)根(Radix Isatidis)是十字花科植物菘藍(lán)(IsatisindigoticaFort.)的干燥根，為臨床常用中藥，具有清熱解毒、涼血利咽之功效，常用于治療溫毒發(fā)斑、舌絳紫暗、痄腮、喉痹、爛喉丹痧、大頭瘟疫、丹毒、癰腫等癥狀[1]。已報(bào)道的板藍(lán)根化學(xué)成分主要包括吲哚類、喹唑酮類、芥子苷類、有機(jī)酸類和氨基酸類化合物等[2]。

現(xiàn)代研究表明，自由基會(huì)損傷機(jī)體，與許多疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。傳統(tǒng)的合成抗氧化劑雖然具有較強(qiáng)的抗氧化能力，但是長(zhǎng)期服用會(huì)產(chǎn)生一定的毒性，甚至?xí)禄椭掳Ｒ虼?，尋找能夠有效清除自由基的中藥或天然產(chǎn)物對(duì)于保護(hù)人類健康具有重要意義[3]。板藍(lán)根等清熱解毒藥物具有一定的抗氧化活性，但目前主要集中在對(duì)其中不飽和脂肪酸類和多糖類成分的研究[4]，而未見通過對(duì)板藍(lán)根抗氧化活性組分進(jìn)行篩選，繼而確定其有效成分的報(bào)道。

中藥化學(xué)成分研究的傳統(tǒng)方法是用溶劑分配和柱色譜法將其逐一分離為純的單一化合物，然后采用化學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，該方法操作繁瑣、分離效率和自動(dòng)化程度低，且對(duì)微量組分的分離困難。目前，通常采用高效液相色譜法分離中藥的有效化學(xué)成分，質(zhì)譜法測(cè)定分子結(jié)構(gòu)[5]。高效液相色譜-質(zhì)譜法可以同時(shí)完成成分分離和結(jié)構(gòu)鑒定，具有高效、快速、靈敏等優(yōu)點(diǎn)，是中藥及天然產(chǎn)物有效成分定性定量分析的有效方法。電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法具有樣品處理簡(jiǎn)單、分析速度快、靈敏度高、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，現(xiàn)已廣泛用于中藥及天然產(chǎn)物化學(xué)成分的分析[6]。

本研究擬采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)分析板藍(lán)根乙酸乙酯提取物和板藍(lán)根正丁醇提取物的化學(xué)成分，采用電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法(ESI-MS/MS)分析板藍(lán)根95%乙醇提取物的化學(xué)成分，并采用鐵離子還原能力法(FRAP)對(duì)板藍(lán)根抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià)，通過自由基清除法(DPPH)對(duì)FRAP法的評(píng)價(jià)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，以期為板藍(lán)根藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和譜效關(guān)系的研究、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與裝置

Waters 2695高效液相色譜儀：美國(guó)Waters公司產(chǎn)品；Finnigan LCQ離子阱質(zhì)譜儀：美國(guó)Finnigan公司產(chǎn)品；自動(dòng)酶標(biāo)儀：奧地利CliniBio公司產(chǎn)品。

1.2 主要藥材與試劑

板藍(lán)根藥材：購(gòu)于北京同仁堂長(zhǎng)春藥店，經(jīng)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)王淑敏教授鑒定為十字花科植物菘藍(lán)(IsatisindigoticaFort.)的干燥根；靛藍(lán)和靛玉紅對(duì)照品：由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；胞苷、腺嘌呤、尿苷、鳥苷、腺苷、苯丙氨酸、脯氨酸、精氨酸和蘋果酸對(duì)照品：美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼、2,4,6-三吡啶基三嗪、抗壞血酸：美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品；甲醇、乙酸：均為色譜純，美國(guó)Fisher公司產(chǎn)品；水為18.2 MΩ·cm超純水；其他試劑均為分析純。

1.3 樣品制備

稱取10 g板藍(lán)根藥材，加水煎煮2次，每次1 h，過濾，合并濾液，濃縮至適量；然后加入3倍量乙醇，攪勻，靜置24 h，過濾，減壓濃縮至稠膏狀，得板藍(lán)根總提取物。將板藍(lán)根總提取物加水溶解，用乙酸乙酯萃取，減壓濃縮并干燥，得板藍(lán)根乙酸乙酯提取物；用正丁醇萃取乙酸乙酯萃取后的部分，減壓濃縮并干燥，得板藍(lán)根正丁醇提取物；將正丁醇萃取后的部分干燥，加入95%乙醇溶解，減壓濃縮并干燥，得板藍(lán)根95%乙醇提取物。取板藍(lán)根乙酸乙酯、正丁醇和95%乙醇提取物各0.5 g，分別置于10 mL容量瓶中，加50%甲醇定容至刻度，搖勻，過0.45 μm濾膜，即得板藍(lán)根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和95%乙醇提取物的供試品溶液。

1.4 實(shí)驗(yàn)條件

1.4.1 板藍(lán)根乙酸乙酯提取物的液相色譜-質(zhì)譜分析條件 色譜條件：色譜柱為Kromasil C18分析柱(4.6 mm×250 mm×5 μm)；流動(dòng)相由0.15%乙酸-水溶液(A)和甲醇(B)組成；線性梯度洗脫，0～45 min、40%～100%B，45～60 min、100%B；流速0.8 mL/min；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量10 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm。

質(zhì)譜條件：大氣壓化學(xué)電離離子源(APCI)，正、負(fù)離子模式檢測(cè)，質(zhì)量掃描范圍m/z50～1 000，氣化溫度450 ℃，毛細(xì)管溫度150 ℃，噴霧電壓4.0 kV，鞘氣(N2)流速0.9 L/min，輔助氣(N2)流速1.5 L/min。

1.4.2 板藍(lán)根正丁醇提取物的液相色譜-質(zhì)譜分析條件 色譜條件：色譜柱為Kromasil C18分析柱(4.6 mm×250 mm×5 μm)；流動(dòng)相由0.15%乙酸-水溶液(A)和甲醇(B)組成；線性梯度洗脫，0～10 min、5%B，10～20 min、5%～20%B，20～30 min、20%～30%B，30～50 min、30%～35%B，50～65 min、35%～55%B；流速0.8 mL/min；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量10 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)265 nm。

質(zhì)譜條件：電噴霧電離離子源(ESI)，正、負(fù)離子模式檢測(cè)，質(zhì)量掃描范圍m/z50～1 000，毛細(xì)管溫度250 ℃，噴霧電壓4.5 kV，鞘氣(N2)流速0.9 L/min，輔助氣(N2)流速3.0 L/min。

1.4.3 板藍(lán)根95%乙醇提取物的串聯(lián)質(zhì)譜分析條件 電噴霧電離離子源；正、負(fù)離子模式檢測(cè)；質(zhì)量掃描范圍m/z50～1 000；毛細(xì)管溫度200 ℃；噴霧電壓4.5 kV；鞘氣(N2)流速0.75 L/min；將板藍(lán)根95%乙醇提取物加甲醇稀釋后采用流動(dòng)注射泵進(jìn)樣，進(jìn)樣流速5 μL/min。

1.5 板藍(lán)根抗氧化活性研究

1.5.1 鐵離子還原能力法(FRAP) 將板藍(lán)根乙酸乙酯、正丁醇和95%乙醇提取物分別用甲醇稀釋，配制成0.1 g/L溶液，作為待測(cè)樣品溶液。向抗壞血酸(Vc)對(duì)照品中加入甲醇，配制成500 μmol/L對(duì)照品溶液。將0.3 mol/L醋酸鈉緩沖溶液(pH 3.6)、0.01 mol/L 2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)溶液(溶解在0.04 mol/L HCl中)和0.02 mol/L三氯化鐵溶液以10∶1∶1(V∶V∶V)比例混合，配制成FRAP試劑。取10 μL Vc對(duì)照品溶液或待測(cè)樣品溶液加入到96孔板中，然后迅速加入300 μL FRAP試劑，在37 ℃用自動(dòng)酶標(biāo)儀分別測(cè)定0 min和4 min的吸光度值，平行測(cè)定3次。FRAP法的測(cè)量結(jié)果以相當(dāng)于500 μmol/L Vc抗氧化能力來計(jì)算，示于式(1)：

FRAP(μmol/L)=

1.5.2 自由基清除能力法(DPPH) 將板藍(lán)根乙酸乙酯、正丁醇和95%乙醇提取物分別用甲醇稀釋，在0.001～10 g/L范圍內(nèi)配制成10個(gè)不同濃度的待測(cè)樣品溶液。向1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)中加入甲醇配制成濃度為65 μmol/L的溶液。將20 μL甲醇和100 μL DPPH溶液混合作為A0；20 μL不同濃度的待測(cè)樣品溶液和100 μL DPPH溶液混合作為Ai；20 μL不同濃度的待測(cè)樣品溶液和100 μL甲醇混合作為Aj。以上3種混合溶液避光放置30 min，用自動(dòng)酶標(biāo)儀在515 nm波長(zhǎng)下分別測(cè)定其吸光度值，每個(gè)樣品平行測(cè)定3次，計(jì)算不同濃度樣品對(duì)DPPH自由基的清除率(SA)，其公式示于式(2)：

(2)

以清除率對(duì)各樣品濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程SA=aC+b，可計(jì)算出SA=50%時(shí)的樣品濃度C，即為該樣品的IC50值。

2 結(jié)果與討論

2.1 板藍(lán)根乙酸乙酯提取物化學(xué)成分的分析

板藍(lán)根乙酸乙酯提取物的色譜圖和總離子流圖示于圖1。

板藍(lán)根乙酸乙酯提取物化學(xué)成分的LC-MS/MS數(shù)據(jù)，以及對(duì)應(yīng)的化合物列于表1。

圖1 板藍(lán)根乙酸乙酯提取物的液相色譜圖(a)，以及正離子(b)和負(fù)離子(c)模式下的總離子流圖Fig.1 LC/MS chromatograms (a), positive (b) and negative (c) TIC of acetate extract from Radix Isatidis

表1 板藍(lán)根乙酸乙酯提取物的LC-MS/MS數(shù)據(jù)
Table 1 LC-MS/MS data of acetate extract from Radix Isatidis

序號(hào)tR/minm/z(+)m/z(-)MS2化合物110.59166[M+H]+166∶148[M+H-H2O]+,120[M+H-HCOOH]+N-醛基氨基苯甲酸N-Formylanthranilicacid[7]211.50267[M+H]+267∶249[M+H-H2O]+,239[M+H-CO]+,146[M+H-C6H5COOH]+3-羧基苯基喹唑酮3-(2'-Carboxyphenyl)-4(3H)-quinazolinone[7]312.81137[M-H]-137∶93[M-H-CO2]-水楊酸Salicylicacid[8]423.76249[M+H]+249∶221[M+H-CO]+色胺酮Tryptanthrin[7]528.87263[M+H]+263∶235[M+H-CO]+,219[M-H-CO2]+靛藍(lán)Indigo*634.35263[M+H]+263∶235[M+H-CO]+,219[M-H-CO2]+靛玉紅Indirubin*737.40279[M+H]+279∶223[M+H-2CO]+,205[M+H-2CO-H2O]+羥基靛玉紅Hydroxylindirubin[8]846.37277[M-H]-277∶259[M-H-H2O]-,233[M-H-CO2],217[M-H-CH3COOH]-亞麻酸Linolenicacid[7]

注：*表示化合物5和6分別與相應(yīng)的對(duì)照品具有相同的保留時(shí)間、質(zhì)荷比和MS2譜

2.2 板藍(lán)根正丁醇提取物化學(xué)成分的分析

板藍(lán)根正丁醇提取物的色譜圖和總離子流圖示于圖2。

板藍(lán)根正丁醇提取物化學(xué)成分的LC-MS/MS數(shù)據(jù)，以及對(duì)應(yīng)的化合物列于表2。

圖2 板藍(lán)根正丁醇提取物的液相色譜圖(a)，以及正離子(b)和負(fù)離子(c)模式下的總離子流圖Fig.2 LC/MS chromatograms (a), positive (b) and negative (c) TIC of n-BuOH extract from Radix Isatidis

表2 板藍(lán)根正丁醇提取物的LC-MS/MS數(shù)據(jù)
Table 2 LC-MS/MS data ofn-BuOH extract from Radix Isatidis

序號(hào)tR/minm/z(+)m/z(-)MS2化合物94.51244[M+H]+244∶112[M+H-rib]+胞苷Cytidine*105.19136[M+H]+—腺嘌呤Adenine*115.44152[M+H]+—鳥嘌呤Guanine*128.28245[M+H]+245∶113[M+H-rib]+尿苷Uridine*1316.80284[M+H]+284∶152[M+H-rib]+鳥苷Guanosine*1417.77164[M-H]-164∶147[M-H-NH3]-,苯丙氨酸Phenylalanine*118[M-H-HCOOH]-1518.99268[M+H]+268∶136[M+H-rib]+腺苷Adenosine*1635.55593[M-H]-593∶473[M-H-CH2OH(CHOH)2CHO]-,皂草苷Saponarin[9-10]431[M-H-glc]-,341[M-H-glc-CH2OHCHOHCHO]-,311[M-H-glc-CH2OH(CHOH)2CHO]-1737.61623[M-H]-623∶503[M-H-CH2OH(CHOH)2CHO]-,異金雀花素-7-O-吡喃葡萄糖苷461[M-H-glc]-,Isoscoparin-7-O-glucopyranoside[10]371[M-H-glc-CH2OHCHOHCHO]-,341[M-H-glc-CH2OH(CHOH)2CHO]-1844.13593[M-H]-593∶341[M-H-glc-CH2OHCHOHCHO]-,異牡荊素-6″-O-吡喃葡萄糖苷311[M-H-glc-CH2OH(CHOH)2CHO]-Isovitexin-6″-O-glucopyranoside[9]1946.46623[M-H]-623∶371[M-H-glc-CH2OHCHOHCHO]-,異金雀花素-6″-O-吡喃葡萄糖苷341[M-H-glc-CH2OH(CHOH)2CHO]-Isoscoparin-6″-O-glucopyranoside[11]2059.27431431∶341[M-H-CH2OHCHOHCHO]-,異牡荊素Isovitexin[9-10]311[M-H-CH2OH(CHOH)2CHO]-2160.43461461∶371[M-H-CH2OHCHOHCHO]-,異金雀花素Isoscoparin[9-10]341[M-H-CH2OH(CHOH)2CHO]-

注：*表示化合物9～15分別與相應(yīng)的對(duì)照品具有相同的保留時(shí)間、質(zhì)荷比和MS2譜

2.3 板藍(lán)根95%乙醇提取物化學(xué)成分的分析

板藍(lán)根95%乙醇提取物的一級(jí)全掃描電噴霧質(zhì)譜圖示于圖3?？芍?，在正離子模式下，板藍(lán)根95%乙醇提取物主要有m/z104、116、130、175、180、365和381離子；在負(fù)離子模式下，主要有m/z133、341離子。

板藍(lán)根95%乙醇提取物化學(xué)成分的ESI-MSn數(shù)據(jù)，以及對(duì)應(yīng)的化合物列于表3。

注：a.正離子模式；b.負(fù)離子模式圖3 板藍(lán)根95%乙醇提取物的一級(jí)全掃描質(zhì)譜圖Fig.3 Full scan electrospray ionization mass spectrometry of 95% ethanol extract from Radix Isatidis

表3 板藍(lán)根95%乙醇提取物的ESI-MSn數(shù)據(jù)
Table 3 ESI-MSndata of 95% ethanol extract from Radix Isatidis

序號(hào)m/z(+)m/z(-)MS2化合物22104[M+H]+104∶86[M+H-H2O]+,γ-氨基丁酸γ-Aminobutyricacid[12]60[M+H-CO2]+23116[M+H]+116∶70[M+H-HCOOH]+脯氨酸Proline*24130[M+H]+130∶113[M+H-NH3]+,表告依春Epigoitrin[12]84[M+H-SCH2]+,70[M+H-SC2H4]+25175[M+H]+175∶157[M+H-H2O]+,精氨酸Arginine*140[M+H-H2O-NH3]+,112[M+H-HCOOC-NH3]+26180[M+H]+180∶162[M+H-H2O]+,氨基葡萄糖Glucosamine[12-13]144[M+H-2H2O]+,84[M+H-2H2O-C2H4O2]+,72[M+H-H2O-C3H6O3]+27365[M+Na]+365∶203[M+Na-glc]+,蔗糖Sucrose[14-15]185[M+Na-glc-H2O]+,381[M+K]+381∶219[M+K-glc]+,201[M+K-glc-H2O]+,341[M-H]-341∶281[M-H-C2H4O2]-,179[M-H-glc]-,161[M-H-H2O]-28133[M-H]-133∶115[M-H-H2O]-蘋果酸Malicacid[16]

注：*表示化合物23和25分別與相應(yīng)的對(duì)照品具有相同的質(zhì)譜斷裂規(guī)律

2.4 板藍(lán)根抗氧化活性的研究

FRAP值的大小可以反映樣品對(duì)鐵離子還原能力的強(qiáng)弱。FRAP值越大，說明該樣品對(duì)鐵離子的還原能力越強(qiáng)，即抗氧化活性越強(qiáng)；反之越弱。樣品IC50值可以反映該樣品對(duì)DPPH自由基清除能力的強(qiáng)弱。IC50值越小，表明該樣品對(duì)DPPH自由基的清除能力越強(qiáng)，即抗氧化能力越強(qiáng)；反之越弱[17]。板藍(lán)根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取、95%乙醇提取物和總提取物的抗氧化活性結(jié)果列于表4。可知，板藍(lán)根不同化學(xué)組分抗氧化活力強(qiáng)弱為乙酸乙酯提取物>總提取物>正丁醇提取物>95%乙醇提取物。板藍(lán)根乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最強(qiáng)，說明其有效成分主要集中在極性較低的化學(xué)組分中。

表4 板藍(lán)根提取物的抗氧化活性Table 4 Antioxidant activity of extract from Radix Isatidis

2.5 討論

本研究采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析板藍(lán)根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物的化學(xué)成分，采用電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法分析板藍(lán)根95%乙醇提取物的化學(xué)成分。在板藍(lán)根乙酸乙酯、正丁醇和95%乙醇提取物中共鑒別出28個(gè)化合物，其中，化合物1、3、8和28為有機(jī)酸類化合物，化合物2和4為喹唑酮類化合物，化合物5、6和7為吲哚類化合物，化合物9、12、13和15為核苷類化合物，化合物10和11為嘌呤類化合物，化合物14、22、23和25為氨基酸類化合物，化合物16、17、18、19、20和21為黃酮類化合物，化合物24為含硫類化合物。

化合物5與6(m/z263)，化合物16與18(m/z593)，化合物17與19(m/z623)互為同分異構(gòu)體?；衔?與6均為靛苷水解產(chǎn)物，在一級(jí)全掃描質(zhì)譜中具有相同的質(zhì)荷比，在二級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜中也具有相同的質(zhì)譜斷裂規(guī)律，需要參照對(duì)照品的保留時(shí)間進(jìn)行鑒別；化合物16與18，化合物17與19分別為異牡荊素和異金雀花素結(jié)合一分子葡萄糖氧苷所形成的化合物，在一級(jí)全掃描質(zhì)譜中具有相同的質(zhì)荷比，但在二級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜中的質(zhì)譜斷裂規(guī)律有一定差異，可參考文獻(xiàn)[9-11]進(jìn)行鑒別。

抗氧化活性評(píng)價(jià)結(jié)果表明，板藍(lán)根抗氧化活性成分主要集中在極性較低的化學(xué)組分中。結(jié)合化學(xué)成分研究數(shù)據(jù)可知，板藍(lán)根抗氧化活性的主要有效成分為吲哚類、喹唑酮類和有機(jī)酸類化合物，糖類和氨基酸類化合物的抗氧化活性較弱。

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Chemical Constituents and Antioxidant Activity of Radix Isatidis

YAN Jun1, ZHAO Chun-fang2, LI Bo-ping1, LIU Zhi-qiang3, GUO Dong-fa1, ZHENG Zhong3

(1.BeijingResearchInstituteofUraniumGeology,Beijing100029,China;2.JilinUniversity,Changchun130021,China;3.ChangchunInstituteofAppliedChemistry,ChineseAcademyofSciences,Changchun130022,China)

High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) and electrospray ionization tandem mass spectrometry (ESI-MS/MS) were applied to analyze the chemical constituents from acetate,n-BuOH and 95% ethanol extracts of Radix Isatidis. The separation was performed on a Kromasil C18 column (4.6 mm×250 mm×5 μm) with gradient of 0.15% acetic acid/water and methanol as mobile phase with a flow rate of 0.8 mL/min at 25 ℃. The UV spectra of peaks were obtained by a diode array detector (DAD) under the detection wavelength at 254 nm and 265 nm. In order to get exact data of MS and MS2spectra, the atmosphere pressure chemical ionization ion source (APCI) and electrospray ionization ion source (ESI) in positive and negative scan mode were utilized. Up to date, twenty-eight compounds are identified from the crude extracts, including indoles, quinazolinones, organic acids, nucleosides, purines, amino acids, flavones and carbohydrates. Meanwhile, the antioxidant activity of the extracts from Radix Isatidis were estimated by the ferric reducing antioxidant power (FRAP) and radical scavenging (DPPH) methods. The results of the antioxidant activities indicated that the compositions of antioxidant activity are mainly existed in the small polarity part. Indoles, quinazolinones, organic acids and porphyrins are the main antioxidative constituents of Radix Isatidis. This method is rapid and sensitive, which can be used for analyzing the chemical compositions and antioxidant activities of traditional Chinese medicine in the future.

Radix Isatidis; chemical constituents; high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS); electrospray ionization tandem mass spectrometry (ESI-MS/MS); antioxidant activity

2016-03-24;

2016-05-18

吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20130102074JC)資助

閆 峻(1982—)，男(漢族)，吉林通化人，高級(jí)工程師，從事中藥及天然產(chǎn)物化學(xué)成分和質(zhì)量控制研究。E-mail: cnncyanjun@163.com

時(shí)間：2016-09-01；

http:∥www.cnki.net/kcms/detail/11.2979.TH.20160901.1527.010.html

O657.6

A

1004-2997(2017)02-0248-08

10.7538/zpxb.youxian.2016.0042