寧長秀， 邱錫榮， 胡利民

·論著·

2015年江西撫州市第一人民醫(yī)院臨床分離菌耐藥性分析

寧長秀， 邱錫榮， 胡利民

目的了解江西省撫州市第一人民醫(yī)院2015年臨床分離菌分布及耐藥狀況。方法采用ATB Reader半自動儀器比色法進(jìn)行菌種鑒定，紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，參照CLSI 2015年版標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果，WHONET5.5 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果該院2015年共收集非重復(fù)臨床分離菌1 215株，其中革蘭陰性菌858株，占70.6 %，革蘭陽性菌357株，占29.4 %。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（金葡菌，MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）分別占金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌的50.0 % 和84.1 %；MRSA對紅霉素高度耐藥、對四環(huán)素和諾氟沙星耐藥率均為80.3 %，未見耐萬古霉素和替考拉寧葡萄球菌。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBL株分別占52.5 % 和34.7 % ；檢出碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌10株。銅綠假單胞菌對阿米卡星、頭孢哌酮-舒巴坦、美羅培南和妥布霉素的耐藥率均低于10 %。鮑曼不動桿菌對黏菌素和頭孢哌酮-舒巴坦的耐藥率分別為2.4 %和51.8 %，對其他常用抗菌藥物的耐藥率均在75 %以上。結(jié)論該院臨床分離菌以革蘭陰性桿菌為主，細(xì)菌耐藥性仍是臨床重要問題，應(yīng)引起臨床高度重視。

抗菌藥物； 藥敏試驗(yàn)； 耐藥性分析

掌握臨床常見的菌種分布及其耐藥性特征，對于指導(dǎo)和幫助臨床醫(yī)師合理選擇抗菌藥物，控制細(xì)菌醫(yī)院內(nèi)傳播和暴發(fā)流行至關(guān)重要，然而其耐藥性常呈地域差異，與醫(yī)院的規(guī)模大小也有關(guān)，國內(nèi)報(bào)道大多為大型綜合性三甲醫(yī)院臨床分離菌的耐藥特點(diǎn)，地區(qū)級醫(yī)院臨床分離菌的耐藥特點(diǎn)報(bào)道較少，現(xiàn)將我院2015年細(xì)菌耐藥性監(jiān)測結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 收集2015年1－12 月本院所有臨床分離細(xì)菌1 215株，剔除同一患者相同部位重復(fù)分離株。

1.1.2 培養(yǎng)基 藥敏試驗(yàn)用Mueller-Hinton（MH）瓊脂培養(yǎng)基，肺炎鏈球菌和各組鏈球菌用含5 %脫纖維羊血MH瓊脂，流感嗜血桿菌用嗜血桿菌屬培養(yǎng)基（HTM）均為英國OXOID 公司產(chǎn)品。

1.1.3 抗菌藥物紙片及E試驗(yàn)條 所有測試抗菌藥物紙片均為英國OXOID 公司產(chǎn)品，青霉素、萬古霉素和替考拉寧E試驗(yàn)條為法國生物梅里埃公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗(yàn) 全部細(xì)菌鑒定均使用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的ATB鑒定條經(jīng)ATB Reader 半自動儀進(jìn)行比色閱讀，采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，參照CLSI 2015年版標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果（頭孢哌酮-舒巴坦參考頭孢哌酮折點(diǎn)）。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌（金葡菌） ATCC 25923、大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853、肺炎鏈球菌ATCC 49619和流感嗜血桿菌ATCC49247（均購自江西省臨檢中心）。

1.2.2 β內(nèi)酰胺酶檢測 采用頭孢硝噻吩紙片（英國OXOID 公司產(chǎn)品）檢測流感嗜血桿菌的β內(nèi)酰胺酶，按CLSI推薦的紙片法篩選和酶抑制劑增效試驗(yàn)確認(rèn)腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)ESBL株[1]。

1.2.3 青霉素不敏感肺炎鏈球菌的檢測 先經(jīng)苯唑西林紙片法測定抑菌圈直徑≤19 cm的肺炎鏈球菌菌株，再采用青霉素E試驗(yàn)條測定其MIC。腦膜炎和非腦膜炎株分別按CLSI 2015年標(biāo)準(zhǔn)判定為青霉素敏感、中介和耐藥株。

1.2.4 廣泛耐藥（XDR）及碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌（CRE） 參照多重耐藥（MDR）、XDR、全耐藥（PDR）菌暫行標(biāo)準(zhǔn)定義——國際專家建議[2]，XDR即為除黏菌素和替加環(huán)素外其他抗菌藥物全耐藥細(xì)菌；CRE為至少耐1種碳青霉烯類抗菌藥物（亞胺培南或美羅培南）的腸桿菌科細(xì)菌。

1.2.5 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用WHONET5.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分布

1 215株非重復(fù)臨床分離菌中，革蘭陰性菌858株（70.6 %），革蘭陽性菌357株（29.4 %）。臨床分離菌株的主要標(biāo)本來源為呼吸道分泌物、傷口分泌物、血液和尿液，分別占33.8 %、19.1 %、13.6 %和11.1 %。呼吸道標(biāo)本分離的細(xì)菌中列前4位的是肺炎克雷伯菌（23.1 %）、銅綠假單胞菌（18.7 %）、金葡菌（16.3 %）、鮑曼不動桿菌（12.2 %）。傷口分泌物中列前4位的細(xì)菌是大腸埃希菌（21.6 %）、金葡菌（16.8 %）、凝固酶陰性葡萄球菌（13.4 %）、肺炎克雷伯菌（8.6 %）。血液中列前4位的是凝固酶陰性葡萄球菌（48.5 %）、大腸埃希菌（30.3 %）、金葡菌（10.3 %）、鏈球菌屬（4.2 %）。尿液中列前4位的細(xì)菌是大腸埃希菌（56.3 %）、肺炎克雷伯菌（14.8 %）、腸球菌屬（5.9 %）、凝固酶陰性葡萄球菌（5.2 %）。主要菌種分布見表1。

表1 2015年臨床分離株的菌種分布Table 1 Species distribution of clinical isolates during 2015

2.2 主要革蘭陽性球菌對抗菌藥物的敏感性

2.2.1 葡萄球菌屬 MRSA和MRCNS分別占各自菌株的50.0 % 和84.1 %，甲氧西林耐藥株對其他抗菌藥物的耐藥率顯著高于苯唑西林敏感株，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素和替考拉寧耐藥的葡萄球菌，見表2。

表2 葡萄球菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus isolates to antimicrobial agents（ %）

2.2.2 其他革蘭陽性球菌對抗菌藥物的敏感性 鏈球菌屬中14株肺炎鏈球菌5株對青霉素耐藥，其他均為青霉素敏感肺炎鏈球菌（PSSP）；其他鏈球菌對紅霉素、克林霉素、四環(huán)素和阿奇霉素耐藥率均＞40 %。15株腸球菌屬細(xì)菌中糞腸球菌9株，其中2株對高濃度慶大霉素和高濃度鏈霉素耐藥，3株屎腸球菌對高濃度慶大霉素和高濃度鏈霉素均耐藥，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素和替考拉寧耐藥的腸球菌。

2.3 革蘭陰性桿菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 腸桿菌科細(xì)菌 臨床分離株檢出CRE 10株，腸桿菌科細(xì)菌對碳青霉烯類仍保持較高敏感性，對頭孢哌酮-舒巴坦和阿米卡星均較敏感。腸桿菌屬細(xì)菌對頭孢西丁耐藥率達(dá)75 %，見表3。

2.3.2 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌 這2種菌中產(chǎn)ESBL率分別為52.5 % 和34.7 %。 產(chǎn)ESBL菌株對多數(shù)抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBL株，見表4。

2.3.3 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌 鮑曼不動桿菌耐藥性嚴(yán)重，除對黏菌素耐藥率＜10 %外，對其他常用抗菌藥物的耐藥率均＞50 % ，對碳青霉烯類耐藥率為79.5 % ，XDR鮑曼不動桿菌的檢出率為48.8 %。銅綠假單胞菌對阿米卡星的耐藥率最低，為6.9 %，除慶大霉素外對其他所測試抗菌藥物耐藥率均＜30 %，見表5。

2.3.4 流感嗜血桿菌 20株流感嗜血桿菌中老年病科分離株占40 %，其中4株細(xì)菌產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶，β內(nèi)酰胺酶檢出率為20 %。見表6。

2.3.5 氣單胞菌屬 24株氣單胞菌屬中以嗜水氣單胞菌為主，共18株（75 %），其余為豚鼠氣單胞和溫和氣單胞菌，且均來自腸道外分離株。氣單胞菌屬除對阿莫西林、阿莫西林-克拉維酸、哌拉西林和替卡西林耐藥率＞50 %外，其他均＜50 %。見表7。

表3 腸桿菌科細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents（ %）

表4 產(chǎn)和非產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility of ESBLs-producing and non-ESBLs-producing strains of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae to antimicrobial agents（ %）

表4 （續(xù)）Table 4 （continued）（ %）

表5 銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii to antimicrobial agents（ %）

3 討論

2015年我院1 215株非重復(fù)臨床分離菌中，革蘭陰性菌占70.6 %，革蘭陽性菌占29.4 %，與2014年CHINET細(xì)菌耐藥監(jiān)測數(shù)據(jù)[3]相近。居前5位分離菌分別為大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌和金葡菌，與2014年不同的是肺炎克雷伯菌取代金葡菌升至第3位。

表6 流感嗜血桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 6 Susceptibility of Haemophilus infuenzae to antimicrobial agents（ %）

本次耐藥監(jiān)測結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬中ESBL檢出率分別為52.5 % 和34.7 %，與2014年中國耐藥監(jiān)測數(shù)據(jù)[2-3]（55.8 %和29.9 %）比較，后者偏高，但與2014年本院監(jiān)測數(shù)據(jù)[4]（36.3 %和19.3 %）相比均有大幅提高，這與我院臨床可能調(diào)整了β內(nèi)酰胺類-β內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物的使用頻度有關(guān)。腸桿菌科細(xì)菌對亞胺培南、美羅培南、阿米卡星和頭孢哌酮-舒巴坦保持較高的敏感性，因此臨床治療此類細(xì)菌可以作為經(jīng)驗(yàn)用藥。2015年碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌檢出率（7 / 167）與2014年（5 / 109）相當(dāng)，CRE感染的預(yù)防、治療和控制應(yīng)引起我們高度的重視，應(yīng)遵循專家共識[5]。

表7 氣單胞菌屬細(xì)菌對常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 7 Susceptibility of Aeromonas isolates to antimicrobial agents（ %）

不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌中銅綠假單胞菌檢出數(shù)較2014年大有增加，鮑曼不動桿菌檢出數(shù)與2014年相同。這2種細(xì)菌耐藥性嚴(yán)重，除對多黏菌素E耐藥率＜10 %外，對其他常用抗菌藥物的耐藥率均在50 %以上 ，對碳青霉烯類的耐藥率均為79.5 %。XDR鮑曼不動桿菌的檢出率為48.8 %，與張小江等[6]報(bào)道（43.5 %）相近。多重耐藥鮑曼不動桿菌多分離自ICU。藥敏結(jié)果顯示銅綠假單胞菌對多黏菌素E均敏感，對碳青霉烯類的耐藥率均≤15.0 % ，除頭孢吡肟和慶大霉素外對其他所測試的抗菌藥物耐藥率均≤30 %。20株流感嗜血桿菌中老年病內(nèi)科分離株占40 %，這可能與患者基礎(chǔ)體質(zhì)較差有關(guān)；其中β內(nèi)酰胺酶檢出率為20 %，然而對氨芐西林的耐藥率達(dá)50 %；近幾年β內(nèi)酰胺酶陰性的耐氨芐西林流感嗜血桿菌報(bào)道不斷增加[7-8]，充分表明了抗生素選擇壓力下復(fù)雜的耐藥機(jī)制。氣單胞菌屬以嗜水氣單胞菌為主，共18株（75 %），其余為豚鼠氣單胞和溫和氣單胞菌，且均來自腸道外分離株；氣單胞菌屬對阿莫西林、阿莫西林-克拉維酸、哌拉西林和替卡西林耐藥率＞50 %，其他均＜50 %，與方海英等[9]報(bào)道相似。

監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示我院MRSA和MRCNS檢出率分別為50.0 %和84.1 %，與2014年CHINET耐藥監(jiān)測數(shù)據(jù)44.6 %和80.3 %相比，兩者均稍高[3]，與2014年本院監(jiān)測63.0 % 和71.4 %相比[4]，MRSA比率有所下降而MRCNS比率卻稍有升高。萬古霉素仍是治療MRSA最有效的藥物。

連續(xù)監(jiān)測可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)耐藥菌的耐藥趨勢，為臨床醫(yī)師合理選擇抗生素提供指導(dǎo)，因此需要進(jìn)一步加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測，及時(shí)掌握細(xì)菌耐藥趨勢變化，減緩和控制耐藥菌在醫(yī)院內(nèi)的發(fā)生和播散。

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Antimicrobial resistance profle of the clinical isolates in Fuzhou First People's Hospital, Jiangxi during 2015

NING Changxiu, QIU Xirong, HU Limin. （Department of Laboratory Medicine, Fuzhou First People's Hospital, Fuzhou Jiangxi 344000, China）

ObjectiveTo investigate the antimicrobial resistance profile of clinical isolates in Fuzhou First People's Hospital during 2015.MethodsThe bacterial isolates were identifed using ATB Reader semi-automatic equipment via colorimetric method. The antimicrobial susceptibility was tested by disk diffusion method. The results were interpreted according to the CLSI breakpoints issued in 2015. All data were analyzed by WHONET 5.5 software.ResultsA total of 1 215 non-duplicate clinical isolates were collected during 2015, including gram negative bacteria (70.6 %) and gram positive bacteria (29.4 %). The prevalence of MRSA was 50.0 % in S. aureus and the prevalence of MRCNS was 84.1 % in coagulase-negative Staphylococcus. Most MRSA strains (80.3 %) were resistant to erythromycin, tetracycline and norfoxacin. No staphylococcal isolate was found resistant to vancomycin or teicoplanin. The prevalence of ESBLs was 52.5 % in E. coli and 34.7 % in K. pneumoniae. Ten strains of Enterobacteriaceae were resistant to carbapenems. Less than10 % of the P. aeruginosa isolates were resistant to amikacin, cefoperazone-sulbactam, meropenem and tobramycin. About 2.4 % and 51.8 % of the Acinetobacter isolates were resistant to polymyxin E and cefoperazone-sulbactam, respectively, while more than 75 % of these strains were resistant to other commonly used antimicrobial agents.ConclusionsMost of the clinical isolates are gram-negative bacilli in our hospital during 2015. Antimicrobial resistance remains an important clinical concern, which should be addressed seriously.

antimicrobial agent; antimicrobial susceptibility testing; antimicrobial resistance profle

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 02-0171-06

10.16718 / j.1009-7708.2017.02.010

2016-05-20

2016-08-10

江西省衛(wèi)生計(jì)生委科技計(jì)劃項(xiàng)目（20164071）。

撫州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西撫州 344000。

寧長秀（1974—），女，碩士研究生，副主任技師，主要從事臨床微生物學(xué)及細(xì)菌耐藥機(jī)制研究。

邱錫榮，E-mail：13707949525@163.com。