陳 玲， 謝 強(qiáng)

·論著·

安徽滁州市第一人民醫(yī)院2015年臨床分離菌的耐藥性監(jiān)測(cè)

陳 玲， 謝 強(qiáng)

目的了解2015年安徽滁州市第一人民醫(yī)院常見分離菌的臨床分布及耐藥情況。方法各類臨床分離菌采用MicroScan WalkAway 96 PLUS進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)，采用WHONET5.6軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果2015年共分離病原菌1 499株，其中革蘭陽(yáng)性菌370株，占24.7 %； 革蘭陰性菌1 129株，占75.3 %。葡萄球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率分別為37.0 %和86.3 %。葡萄球菌中未見萬(wàn)古霉素、達(dá)托霉素和利奈唑胺耐藥株。腸球菌中糞腸球菌對(duì)達(dá)托霉素、萬(wàn)古霉素和利奈唑胺均敏感，屎腸球菌中檢出1株耐萬(wàn)古霉素，檢出率為2.8 %。肺炎鏈球菌主要來源于兒科，對(duì)青霉素均敏感。大腸埃希菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）和奇異變形桿菌產(chǎn)ESBL的檢出率分別為52.9 %、30.8 %和25.0 %，產(chǎn)ESBL株對(duì)測(cè)試藥物的耐藥率均高于非產(chǎn)ESBL株。銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率均為29.4 %。不動(dòng)桿菌屬（鮑曼不動(dòng)桿菌占85.5 %）對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為63.0 %和64.5 %。結(jié)論2015年該院分離的革蘭陰性桿菌耐藥嚴(yán)重，尤其是碳青霉烯類耐藥的腸桿菌科細(xì)菌檢出率較高，應(yīng)引起重視。

細(xì)菌耐藥性； 超廣譜β內(nèi)酰胺酶； 碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌

隨著抗菌藥物在臨床上的大量使用和不合理使用，導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性日趨嚴(yán)重，多重耐藥和泛耐藥株日益增多，尤其是碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌（CRE）檢出率的增加，這些已成為全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。為此，對(duì)滁州市第一人民醫(yī)院2015年臨床分離菌的分布及耐藥性進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 收集本院2015年1月1日－12月31日臨床標(biāo)本分離株，剔除同一患者同一部位的重復(fù)菌株，共分離出病原菌1 499株。

1.1.2 藥敏紙片和培養(yǎng)基 補(bǔ)充藥敏紙片購(gòu)自英國(guó)OXOID公司，藥敏試驗(yàn)用的Mueller-Hinton（MH）瓊脂購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。

1.1.3 質(zhì)控菌株 質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、銅綠假單胞菌ATCC 27853、金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923和糞腸球菌ATCC 29212，均購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2 方法

1.2.1 菌株鑒定及藥敏試驗(yàn) 菌株鑒定和藥敏均使用德國(guó)西門子公司的MicroScan WalkAway 96 PLUS全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀（MSWA）及配套的PC33和NC50檢測(cè)卡進(jìn)行。補(bǔ)充藥敏試驗(yàn)（頭孢唑林、頭孢曲松和厄他培南）采用紙片擴(kuò)散法。藥敏試驗(yàn)結(jié)果根據(jù)CLSI 2014標(biāo)準(zhǔn)判斷[1]。

1.2.2 耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）和產(chǎn)ESBL株的檢測(cè) MSWA鑒定儀根據(jù)藥敏結(jié)果自動(dòng)判斷MRS和產(chǎn)ESBL菌株。

多重耐藥指對(duì)3類或3類以上的抗菌藥物耐藥，全耐藥指對(duì)所測(cè)的抗菌藥物均表現(xiàn)為耐藥[2]，CRE為對(duì)亞胺培南、美羅培南或厄他培南中任一種藥物耐藥者。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)分析 使用全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)推薦的WHONET5.6軟件對(duì)研究結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌來源及分布

2015年共收集臨床非重復(fù)分離菌1 499株，其中革蘭陽(yáng)性菌370株，占24.7 %； 革蘭陰性菌1 129株，占75.3 %；住院患者分離株占96.2 %，門診患者分離株占3.8 %；菌株主要來源于痰液等呼吸道標(biāo)本、分泌物、尿液和血液，分別占51.6 %（773株）、17.1 %（256株）、16.8 %（252株）和8.4 %（126株）。痰液等呼吸道標(biāo)本分離菌主要為肺炎克雷伯菌172株（22.2 %）、銅綠假單胞菌139株（18.0 %）、鮑曼不動(dòng)桿菌98株（12.7 %）、大腸埃希菌84株（10.9 %）和肺炎鏈球菌52株（6.7 %）；分泌物標(biāo)本分離菌主要為大腸埃希菌64株（25.0 %）、金葡菌36株（14.1 %）、肺炎克雷伯菌19株（7.4 %）、銅綠假單胞菌15株（5.9 %）和鮑曼不動(dòng)桿菌13株（5.1 %）；尿液標(biāo)本分離菌主要為大腸埃希菌130株（51.6 %）、肺炎克雷伯菌24株（9.5 %）、屎腸球菌22株（8.7 %）、糞腸球菌17株（6.7 %）和奇異變形桿菌5株（2.0 %）；血液標(biāo)本分離菌主要為凝固酶陰性葡萄球菌62株（49.2 %）、大腸埃希菌19株（15.1 %）、金葡菌10株（7.9 %）、屎腸球菌7株（5.6 %）和糞腸球菌4株（3.2 %）。主要菌株分布見表1。

表1 2015年臨床分離菌株的分布Table 1 Distribution of clinical isolates in 2015

2.2 主要革蘭陽(yáng)性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

2.2.1 葡萄球菌屬 金葡菌中MRSA的檢出率為37.0 %，凝固酶陰性葡萄球菌中MRCNS的檢出率為86.3 %。葡萄球菌屬中未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥株。藥敏結(jié)果見表2。

表2 葡萄球菌屬細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus isolates to antimicrobial agents（ %）

2.2.2 腸球菌屬 75株腸球菌屬細(xì)菌中屎腸球菌36株，占48.0 %；糞腸球菌33株，占44.0 %；其他腸球菌6株，占8.0 %。除四環(huán)素外，屎腸球菌對(duì)各抗菌藥物的耐藥率均高于糞腸球菌。糞腸球菌對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺全敏感，檢出1株耐萬(wàn)古霉素屎腸球菌，檢出率為2.8 %。藥敏結(jié)果見表3。

2.2.3 肺炎鏈球菌 共分離到56株肺炎鏈球菌，對(duì)青霉素、左氧氟沙星、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素100 %敏感，對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥率達(dá)98.2 %。藥敏結(jié)果見表4。

2.3 主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

2.3.1 腸桿菌科細(xì)菌 大腸埃希菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）和奇異變性桿菌產(chǎn)ESBL的檢出率分別為52.9 %、30.8 %和25.0 %。產(chǎn)ESBL株對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、喹諾酮類、氨基糖苷類等的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBL株。大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬和變形桿菌屬細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類和阿米卡星的耐藥率最低，耐藥率＜20 %。沙雷菌屬對(duì)碳青霉烯類耐藥率較高，達(dá)到50 %，其中黏質(zhì)沙雷菌的檢出率為59.4 %，對(duì)阿米卡星和甲氧芐啶-磺胺甲唑的耐藥率最低，均不高于5 %。本次監(jiān)測(cè)中共檢出CRE 98株，檢出率為12.5 %。藥敏結(jié)果見表5。

表3 腸球菌屬細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility of Enterococcus species to antimicrobial agents（ %）

表4 肺炎鏈球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility of S. pneumoniae to antimicrobial agents（ %）

2.3.2 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌 160株銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南耐藥率均為29.4 %；對(duì)阿米卡星、妥布霉素和哌拉西林-他唑巴坦的耐藥率分別為30.0 %、33.8 %和36.3 %，對(duì)其余測(cè)試抗菌藥物的耐藥率也均＜50 %。138株不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌對(duì)氨基糖苷類的耐藥率均＜30 %，對(duì)其余監(jiān)測(cè)的抗菌藥物的耐藥率均＞60 %。嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)米諾環(huán)素100 %敏感。銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的多重耐藥檢出率分別為35.0 %和76.7 %。藥敏結(jié)果見表6。

3 討論

本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，2015年我院共分離出非重復(fù)菌株1 499株，與本院2014年[3]相比，臨床菌株總分離率下降了14.4 %。2015年細(xì)菌分離前5位的分別是大腸埃希菌、克雷伯菌屬、銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌屬和金葡菌，與2014年CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)的數(shù)據(jù)相近[4]。

2015年本院MRSA和MRCNS的檢出率分別為37.0 %和86.3 %，高于邵春紅等[5]的數(shù)據(jù)，MRSA的檢出率低于2014年CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)的數(shù)據(jù)[4]和本院2014的數(shù)據(jù)[3]，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，MRSA對(duì)測(cè)試藥物的耐藥率明顯高于MSSA，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺的耐藥株。腸球菌屬中，以屎腸球菌和糞腸球菌為主，其中屎腸球菌的分離率高于糞腸球菌，與2014年相比，糞腸球菌的分離率有所增加，屎腸球菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌，檢出1株耐萬(wàn)古霉素的屎腸球菌。本院2015年檢出的肺炎鏈球菌對(duì)青霉素均敏感。

表5 腸桿菌科細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents（ %）

表6 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 6 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（ %）

腸桿菌科細(xì)菌中，大腸埃希菌和奇異變形桿菌產(chǎn)ESBL的檢出率分別為52.9 %和25.0 %，與2014年相比有所下降[3]，克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）產(chǎn)ESBL的檢出率為30.8 %，與2014年相比有所上升[3]。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類敏感性較好，但CRE的檢出率為12.5 %（98 / 787），肺炎克雷伯菌中耐藥株為19.4 %（44 / 227），黏質(zhì)沙雷菌中耐藥株為59.4 %（19 / 32），大腸埃希菌中耐藥株為4.9 %（15 / 308）和腸桿菌科細(xì)菌中耐藥株為11.4 %（8 / 70），此分離菌以呼吸道標(biāo)本和ICU為主，提示可能存在耐藥克隆株的傳播，需進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)測(cè)。特別是沙雷菌屬對(duì)碳青霉烯類耐藥率較高，達(dá)到50.0 %（20/40） ，其中黏質(zhì)沙雷菌耐藥株的檢出率為59.4 %（19 / 32），且檢出菌株均來自ICU，提示可能存在耐藥克隆株的傳播。由于CRE菌株對(duì)抗菌藥物往往呈廣泛耐藥和全耐藥，給臨床治療帶來了極大困難。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，CRE對(duì)多數(shù)抗菌藥物高度耐藥，除對(duì)阿米卡星的耐藥率＜5 %，對(duì)其余抗菌藥物耐藥率均＞75 %。目前認(rèn)為，多黏菌素對(duì)CRE有較強(qiáng)的抗菌活性，但有報(bào)道，隨著治療的進(jìn)展可能出現(xiàn)對(duì)多黏菌素的繼發(fā)性耐藥[6]。通過手衛(wèi)生的管理、隔離預(yù)防措施的實(shí)施、環(huán)境和設(shè)備清潔消毒的落實(shí)能夠有效控制多重耐藥CRE在醫(yī)院的傳播和流行[7]。

本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌與本院2014年相比，對(duì)亞胺培南和美羅培南最敏感，敏感率均為70.6 %，其次對(duì)阿米卡星的敏感率為70 %，對(duì)妥布霉素和哌拉西林-他唑巴坦的敏感率均＞60 %，臨床治療該菌感染時(shí)要密切注意，因?yàn)殡S著抗菌藥物的使用，該菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性會(huì)很快發(fā)生變化。不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率較高，對(duì)氨基糖苷類抗生素的耐藥率＜30 %，對(duì)其余抗菌藥物的耐藥率均＞60 %。銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌主要來自于呼吸道標(biāo)本；科室以ICU檢出率最高，其多重耐藥檢出率較高，2015年檢出率分別為35.0 %和76.7 %，但均低于2014年的數(shù)據(jù)。鮑曼不動(dòng)桿菌的多重耐藥檢出率也低于本院2013年數(shù)據(jù)[8]，出現(xiàn)這種情況，可能與臨床對(duì)多重耐藥菌的隔離預(yù)防措施落實(shí)到位以及抗菌藥物的合理使用有關(guān)。嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)米諾環(huán)素全敏感，對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲唑和左氧氟沙星的敏感率均＞75 %，對(duì)頭孢他啶的敏感率僅為23.1 %。

本次監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，本院分離菌以革蘭陰性桿菌為主，呼吸科和ICU的多重耐藥和廣泛耐藥菌檢出率較高。為有效控制多重耐藥和廣泛耐藥菌產(chǎn)生和流行，臨床應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果，合理使用抗菌藥物，同時(shí)應(yīng)將預(yù)防隔離措施落實(shí)到位。

[1] Clinical and LaboratoryStandards Institute （CLSI） . Performance standards for antimicrobial susceptibility testing [S]. 2014，M100-S24.

[2] FALAGAS ME， KARAGEORGOPOULOS DE. Pandrug resistance （PDR）， extensive drug resistance （XDR）， and multidrug resistance （MDR） among Gram-negative bacilli：need for international harmonization in terminology[J]. Clin Infect Dis，2008，46（7）：1121-1122.

[3] 謝強(qiáng)，曹明杰，陳玲，等. 安徽省滁州市第一人民醫(yī)院2014年臨床分離菌的耐藥性監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)感染與化療雜志，2016，16（2）：208-213.

[4] 胡付品，朱德妹， 汪復(fù)，等. 2014年CHINET中國(guó)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)感染與化療雜志，2015，15（5）：401-410.

[5] 邵春紅，金炎， 劉義剛，等. 2013年山東省立醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 中國(guó)感染與化療雜志，2015，15（2）：126-133.

[6] LüBBERT C， FAUCHEUX S， BECKER-RUX D， et al. Rapid emergence of secondary resistance to gentamicin and colistin following selective digestive decontamination in patients with KPC-2-producing Klebsiella pneumoniae： a single-centre experience[J]. Int J Antimicrob Agents，2013 ，42（6）：565-570.

[7] 黃勛，鄧子德， 倪語(yǔ)星，等. 多重耐藥菌醫(yī)院感染預(yù)防與控制中國(guó)專家共識(shí)[J]. 中國(guó)感染控制雜志，2015，14（1）：1-9.

[8] 謝強(qiáng)，曹明杰，王金麗，等. 安徽省滁州市第一人民醫(yī)院2013年臨床分離的革蘭陰性桿菌耐藥性分析[J].中國(guó)感染與化療雜志，2015，15（1）：67-69.

Surveillance of antimicrobial resistance in the clinical isolates from Chuzhou First Hospital, Anhui Province in 2015

CHEN Ling, XIE Qiang. （Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First Hospital, Chuzhou Anhui 239000, China）

ObjectiveTo investigate the distribution and antibiotic resistance profle of clinical isolates in 2015 for improving antimicrobial treatment in Chuzhou First Hospital.MethodsBacterial identification and antimicrobial susceptibility testing were performed with MicroScan WalkAway 96 PLUS bacterial identifcation system. All the data were analyzed by WHONET5.6 software.ResultsA total of 1 499 clinical isolates were collected during 2015, of which gram positive organisms and gram negative organisms accounted for 24.7 % and 75.3 %, respectively. Prevalence of MRSA among S. aureus was 37.0 % and MRCNS among CNS 86.3 %. All (100 %) Staphylococcus and E. faecalis isolates were susceptible to vancomycin, daptomycin and linezolid. About 2.8 % of the E. faecium isolates were resistant to vancomycin. All the Streptococcus pneumoniae isolates were penicillin-susceptible, mainly isolated from children. The prevalence of extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) positive strains was 52.9 % in E. coli, 30.8 % in Klebsiella spp. (K. pneumoniae and K. oxytoca) and 25.0 % in P. mirabilis. The ESBLs-positive strains showed higher resistance rate than ESBLs-negative strains to most antibiotics. The percentage of the P. aeruginosa isolates resistant to meropenem and imipenem was all 29.4 %. The percentage of the Acinetobacter spp. (A. baumannii accounted for 85.5 %) strains resistant to imipenem and meropenem was 63.0 % and 64.5 %, respectively.ConclusionsAntibiotic resistance is still serious in Chuzhou First Hospital in 2015, especially the emerging carbapenemresistant Enterobacteriaceae, which is of great concern.

antimicrobial resistance; extended-spectrum beta-lactamase; carbapenem-resistant Enterobacteriaceae

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 02-0153-06

10.16718 / j.1009-7708.2017.02.007

2016-04-12

2016-07-27

安徽省滁州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽滁州 239000。

陳玲（1967—），女，本科，副主任檢驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)診斷方面的研究。

陳玲，E-mail：342263920@qq.com。