戴 欣，陳 力， 李佳俊， 黃文祥， 黃愛龍， 鐘曉妮

·論著·

重慶地區(qū)男男性行為者人群EB病毒血清流行病學(xué)調(diào)查

戴 欣1,2，陳 力2， 李佳俊2， 黃文祥2， 黃愛龍3， 鐘曉妮4

目的調(diào)查重慶地區(qū)男男性行為者（men who have sex with men，MSM）EB病毒（Epstein-Barr virus）血清流行病學(xué)現(xiàn)狀，推測MSM人群EB病毒感染和再活化情況。方法采用非概率抽樣法，對1 082例MSM（來源為2012－2015年重慶地區(qū)進行臨床藥物試驗預(yù)防艾滋病感染的MSM人群）和1 059名健康成人血清， 采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）方法檢測EB-VCA-IgG、EB-NA-IgG和EB-VCA-IgM，使用χ2檢驗對結(jié)果進行分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1 082例MSM中HIV陽性130例，HIV陰性952例：①EB病毒既往感染率在MSM、HIV陽性、HIV陰性者中分別為1 002例（92.6 %）、115例（88.5 %）、887例（93.2 %），其中MSM組、HIV陰性MSM組與對照組952例（89.9 %）差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。②EB病毒未感染率在MSM、HIV陽性MSM、HIV陰性MSM組分別為5例（0.5 %）、1例（0.8 %）、4例（0.4 %），3組均顯著低于對照組53例（5.0 %），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。HIV陽性與HIV陰性間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。③EB病毒血清學(xué)再活化率在MSM、HIV陽性MSM、HIV陰性MSM組中分別為52例（4.8 %）、13例（10.0 %）、39例（4.1%），其中HIV陽性MSM同對照組40例（3.8 %）、HIV陰性MSM組39例（4.1%）差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.005）。結(jié)論①MSM人群EB病毒感染率高于普通人群，其發(fā)生EB病毒感染相關(guān)疾病的威脅更大。②非HIV感染的MSM人群EB病毒再活化率可能與正常人無差異。③HIV感染的MSM人群EB病毒血清學(xué)再活化率明顯增高， 可能同HIV感染后機體免疫力下降有關(guān)，發(fā)生EB病毒感染相關(guān)疾病的風(fēng)險更大。

男男性行為者人群； EB病毒； 感染； 病毒再活化

EB 病毒又稱非洲淋巴細胞瘤病毒，屬于γ亞科皰疹病毒，1964年由Epstein和Barr在非洲發(fā)現(xiàn)，人類是其唯一的宿主[1]。EB病毒主要感染人類口咽部上皮細胞和B淋巴細胞，是傳染性單核細胞增多癥的病原體，可引起發(fā)熱、咽痛、淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大等臨床表現(xiàn)，并與淋巴瘤、胃癌、鼻咽癌等多種腫瘤相關(guān)[1]。目前有關(guān)EB病毒流行病學(xué)調(diào)查均以正常性行為人群和兒童為主，尚未有針對男男性行為者（MSM）人群EB病毒血清學(xué)再活化的流行病學(xué)研究。MSM作為感染HIV的特殊高危人群，包括男性同性戀（gay）、雙性戀（bisexual）和少數(shù)男異性戀者。亞洲是世界上男男性行為人數(shù)最多的地區(qū)，由于安全性行為意識的缺乏，中國MSM感染HIV風(fēng)險逐年上升，加劇其AIDS的流行[2]。EB病毒作為HIV / AIDS重要的機會性感染病原體之一，HIV / AIDS患者，機體免疫功能紊亂，導(dǎo)致機體B淋巴細胞內(nèi)潛伏感染的EB病毒再次活化并大量增殖，進一步促使HIV / AIDS患者出現(xiàn)EB病毒相關(guān)疾病和惡性腫瘤的發(fā)生率增加。因此，了解MSM人群EB病毒感染現(xiàn)狀，觀察其再活化率，對預(yù)測及早期干預(yù)EB病毒激活對該群體具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象

納入標準：2012－2015年重慶地區(qū)進行臨床藥物試驗預(yù)防AIDS / HIV感染的MSM人群（為保護試驗者隱私，多數(shù)入選者匿名，年齡在18歲以上）；排除標準：合并嚴重疾病者（原發(fā)性免疫缺陷及繼發(fā)性免疫缺陷患者）。采用非概率抽樣法共采集了1 082份MSM者血清樣本，其中HIV陽性MSM者130例，HIV陰性MSM者952例。對照組為同期健康體檢的成年男性1 059例。本次研究的程序遵循人體試驗委員會所制定的倫理學(xué)標準，所有入選者均簽署知情同意書，保留血清樣本進行科學(xué)研究。

1.2 儀器與方法

EB病毒衣殼抗原IgG抗體（EB-VCA-IgG）、EB病毒核抗原IgG抗體（EB-NA-IgG）和EB病毒衣殼抗原IgM抗體（EB-VCA-IgM）診斷試劑盒由歐蒙醫(yī)學(xué)實驗診斷股份有限公司提供，醫(yī)療器械注冊證書編號：國食藥監(jiān)械（進）字2013第3403537號，全自動酶標儀為美國BioTek公司ELx800NB酶標儀。所有實驗均嚴格按照試劑說明書操作。

1.3 EB病毒血清學(xué)抗體意義

EB病毒血清學(xué)抗體檢測意義[3]，見表1。

表 1 EB病毒血清學(xué)抗體檢測意義Table 1 Clinical relevance of serum anti-Epstein-Barr virus antibody panel tests

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

用統(tǒng)計學(xué)分析軟件STATA 12.0進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MSM人群EB病毒血清學(xué)抗體檢測結(jié)果

從1 082例MSM人群及1 059例健康成年男性EB病毒感染檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MSM人群感染率高于普通人群，血清學(xué)再活化率兩組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。

表 2 MSM人群中EB病毒感染與健康成年男性的血清學(xué)檢測結(jié)果Table 2 Serum Epstein-Barr virus antibody panel tests for adult men who have sex with men and healthy individuals

2.2 HIV陽性人群EB病毒血清學(xué)抗體檢測結(jié)果

MSM人群中HIV感染130例，占MSM人群的12.0 %，其EB病毒血清學(xué)再活化率顯著增加，同對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，見表3。

表3 HIV陽性人群中EB病毒感染與健康成年男性的血清學(xué)檢測結(jié)果Table 3 Epstein-Barr virus antibody panel tests for HIV-positive adult men who have sex with men and healthy individuals

2.3 HIV陰性人群EB病毒血清學(xué)抗體檢測結(jié)果

MSM人群中HIV陰性共952例，占MSM人群的88.0 %，EB病毒感染率顯著高于普通人群。EB病毒血清學(xué)再活化率差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表4。

表4 HIV陰性人群與健康成年男性的EB病毒感染血清學(xué)檢測結(jié)果Table 4 Epstein-Barr virus antibody panel tests for HIV-negative adult men who have sex with men and healthy individuals

2.4 HIV陰性及HIV陽性MSM人群EB病毒血清學(xué)抗體比較

MSM人群共1 082例，其中HIV陽性130例（12.0 %），HIV陰性952例（88.0 %），HIV陽性組EB病毒血清學(xué)再活化率顯著高于HIV陰性組，見表5。

3 討論

流行病學(xué)調(diào)查中，EB病毒感染非常普遍，流行病學(xué)調(diào)查顯示其累計感染率達95.0 %[4]，經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)感染率較經(jīng)濟落后地區(qū)低，中國城市感染率也較農(nóng)村地區(qū)低[5]。研究顯示中國EB病毒既往感染率大約90.0 %[5]。本研究對象為門診進行藥物預(yù)防AIDS的男同性戀人群，故未進一步隨訪實驗組的臨床表現(xiàn)，僅對其血清抗體進行檢測，了解其可能感染的現(xiàn)狀。研究發(fā)現(xiàn)，MSM人群EB病毒既往感染率92.6 %（1 002 / 1 082）與健康成年男性EB病毒既往感染率89.9 %（952 / 1 059），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；MSM人群未感染率0.5 %（5 / 1 082），其中HIV陽性組未感染率0.8 %（1 / 130），HIV陰性組未感染率0.4 %（4 / 952），均顯著低于健康成年男性5.0 %（53 / 1 059）（P ＜0.05），以上均提示MSM人群EB病毒感染率高于普通人群。原因推測其一，與傳播途徑有關(guān)，目前研究均表明可通過唾液和密切接觸傳播[6]，還可能通過血液、宮內(nèi)感染及性接觸傳播[7]；其二，由于MSM人群的特殊性，其性行為的多樣化、性伴侶多、安全套使用率低也增加感染風(fēng)險[8]。

表5 MSM人群中HIV陽性與HIV陰性者EB病毒血清學(xué)檢測結(jié)果Table 5 Epstein-Barr virus antibody panel tests for HIV-positive and HIV-negative adult men who have sex with men

本研究通過對本地區(qū)1 082例男男性行為者血清學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，HIV陽性組中EB病毒血清抗體提示再活化率10.0 %（13 / 130），同HIV陰性組4.1 % （39 / 952）以及健康成年男性3.8 %（40 / 1 059）比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.005）。人類對EB病毒普遍易感，感染后呈潛伏感染，一般不引起嚴重的臨床表現(xiàn)，但在機體免疫功能異常時可出現(xiàn)EB病毒感染后再活化，其機制可能是：①HIV / AIDS患者中因病毒侵犯CD4+T淋巴細胞、CD4單核細胞及B淋巴細胞導(dǎo)致機體免疫功能受損；②EB病毒感染后轉(zhuǎn)化的CR2（CD21）B淋巴細胞也可表達CD4，從而形成復(fù)合CR2-CD4細胞，這種細胞可增加HIV-1易感性。HIV-1轉(zhuǎn)移活化基因蛋白（HIV-1 tat protein）的表達改變了EB病毒感染的B淋巴細胞凋亡的易感性[9]；③EB病毒通過HIV-1長末端重復(fù)序列（LTR）的激活，干擾感染細胞NF-κB信號通路，從而引起皰疹類病毒蛋白大量復(fù)制[10]，而最后導(dǎo)致發(fā)生各種嚴重機會感染和惡性腫瘤的發(fā)生[11-15]。本研究中發(fā)現(xiàn)在非HIV感染的MSM人群，EB病毒血清學(xué)再活化率與正常對照組無顯著差異，同樣也可能說明HIV感染導(dǎo)致宿主免疫功能異常是促使EB病毒感染再活化的主要原因，而與性行為的特殊性關(guān)系不大。

目前，EB病毒 / HIV相關(guān)腫瘤疾病的研究發(fā)現(xiàn)，EB病毒轉(zhuǎn)化蛋白（EBV-transforming protein-1）、EB病毒編碼的潛伏膜蛋白-1（EBV-encode latent membrane protein-1，LMP）在HIV相關(guān)性霍奇金淋巴瘤中均有表達[16-18]。在EB病毒 / HIV人群中更易導(dǎo)致非霍奇金淋巴瘤發(fā)生率增加[19-20]，包括最常見的彌漫性大B細胞淋巴瘤，其中EB病毒感染相關(guān)的占30 %～60 %，而普通人群中只有10 %[21]。在2008年美國HIV感染人群腫瘤疾病研究中，共有6 231例新發(fā)腫瘤患者，2 512例存在病毒感染風(fēng)險，其中，EB病毒 / HIV相關(guān)的腫瘤發(fā)生率占30 %。EB病毒相關(guān)非霍奇金淋巴瘤共508例，男性患者422例；霍奇金淋巴瘤共256例，男性患者221例，均更多見于MSM人群，歸因危險度AF均大于90 %[22]。另外，瑞士研究發(fā)現(xiàn)，卡波濟肉瘤幾乎全部發(fā)生于MSM人群[23]。本研究中1 082例男同性戀者為除外嚴重疾病青年人，本次因進行臨床藥物試驗預(yù)防HIV感染進行篩查后最終確診HIV陽性130例，非AIDS階段，本研究證實在感染HIV后EB病毒活化率明顯增加，推測當進展為AIDS階段時，EB病毒相關(guān)惡性腫瘤的發(fā)生風(fēng)險將顯著提高。

有研究還表明可能由于MSM人群的特殊性，存在有不同程度的社會及經(jīng)濟地位、教育資源、就業(yè)機會、醫(yī)療資源等影響，使這一特殊人群長期存在生態(tài)學(xué)壓力，而長期的這種負面情緒會提高應(yīng)激激素的大量分泌，如糖皮質(zhì)類激素，這將導(dǎo)致病毒復(fù)制增加[24-25]。

總之， 本研究首次發(fā)現(xiàn)MSM人群的EB病毒血清感染率明顯高于普通人群。MSM人群在感染HIV后EB病毒血清再活化率較普通人群高，提示HIV感染可能促進EB病毒再活化，這可導(dǎo)致EB病毒相關(guān)腫瘤疾病發(fā)生風(fēng)險的增加。因此，對于MSM人群的EB病毒預(yù)防及治療，以及加強安全的性教育非常重要。

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Seroepidemiology of Epstein Barr virus in men who have sex with men in Chongqing area

DAI Xin, CHEN Li, LI Jiajun, HUANG Wenxiang, HUANG Ailong, ZHONG Xiaoni. （Department of Gastroenterology Diseases, the First Division of the First Affiliated Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing 400015, China）

ObjectiveTo investigate the seroepidemiology of Epstein-Barr virus (EBV) and human immunodeficiency virus (HIV) in adult men who have sex with men (MSM) in Chongqing area.MethodsNonprobability sampling method was used to test EB-CA-IgG, EB-NA-IgG and EB-VCA-IgM in the sera of 1 082 MSMs from the clinical trials of HIV/AIDS treatments in Chongqing area from 2012 to 2015, and 1 059 healthy individuals by means of enzyme-linked immunosorbent assay. The results were analyzed by Chi-square test. The difference was considered statistically significant when P＜0.05.ResultsThe 1 082 MSM included 130 HIV positive and 952 HIV negative subjects. The prevalence of prior EBV infection was 92.6% in total MSM population, 88.5% in HIV-positive MSM, and 93.2% in HIV-negative MSM. The prevalence in total MSM and HIV negative MSM was significantly higher than that in control group (89.9%). Prior EBV infection wasnot found in 0.5% of the total MSM, 0.8% of HIV positive MSM and 0.4% of HIV negative MSM, all signifcantly lower than that of control group (5.0%) (P＜0.05). Finally, the rate of EBV reactivation in HIV positive MSM (10.0%) was signifcantly higher than that in control group (3.8%) and in HIV negative MSM group(4.1%) (P＜0.005).ConclusionsEBV infection is highly prevalent in MSM, higher than that in the general population. The rate of EBV reactivation in HIV negative MSM is similar to that in general population. The rate of seroepidemiology-based EBV reactivation is significantly higher in HIV positive MSM, which may be associated with the immunocompromised status post HIV infection.

men who have sex with men; Epstein Barr virus; infection; viral reactivation

R373

A

1009-7708 ( 2017 ) 02-0148-05

10.16718/j.1009-7708.2017.02.006

2016-05-14

2016-09-05

國家科技重大專項（2012ZX10001007）。

1. 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院第一分院消化科，重慶 400015；

2. 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院感染科，重慶市傳染病寄生蟲病學(xué)重點實驗室；

3. 重慶醫(yī)科大學(xué)感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點實驗室；

4. 重慶醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)教研室。

戴欣（1989—），女，碩士研究生，住院醫(yī)師，主要從事感染性疾病、消化系統(tǒng)疾病等研究。

黃文祥，E-mail：wenxiang_huang@163.com。