谷岱霏 嚴(yán)善春 李志強(qiáng)

(1. 東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院 哈爾濱 150040； 2. 廣東省生物資源應(yīng)用研究所 廣東省野生動(dòng)物保護(hù)與利用公共實(shí)驗(yàn)室 廣東省動(dòng)物保護(hù)與資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣州 510260)

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氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻纖維素酶活性的抑制作用*

谷岱霏1嚴(yán)善春1李志強(qiáng)2

(1. 東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院 哈爾濱 150040； 2. 廣東省生物資源應(yīng)用研究所 廣東省野生動(dòng)物保護(hù)與利用公共實(shí)驗(yàn)室 廣東省動(dòng)物保護(hù)與資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣州 510260)

【目的】 研究植物源成分氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻纖維素酶活性的抑制作用，為探討氧化苦參堿在白蟻預(yù)防與控制方面的應(yīng)用提供依據(jù)。【方法】 在室內(nèi)條件下[溫度(26±1)℃，相對(duì)濕度65%±5%,黑暗無(wú)光照)，供試臺(tái)灣乳白蟻經(jīng)饑餓處理2 天后，用1%氧化苦參堿溶液處理濾紙后飼喂，分別于飼喂6 h、12 h、1 天、3 天、5 天、7天收集臺(tái)灣乳白蟻消化道，采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度，還原糖法測(cè)定比較白蟻消化道的濾紙酶活性(FPA)及內(nèi)切β-1,4-葡聚糖酶(EG)、β-葡萄糖苷酶(BG)和纖維二糖水解酶(CBH)的比活力，并于7 天后觀測(cè)記錄供試白蟻的質(zhì)量變化與死亡率?！窘Y(jié)果】 在測(cè)定分析的時(shí)間內(nèi)，除6 h處理組FPA和CBH活性與對(duì)照差異不顯著外，1%氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻FPA及EG、BG、CBH的活性均有顯著抑制作用。1%氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻纖維素酶活抑制率整體表現(xiàn)為FPA>FG≥BG>CBH，纖維素酶活性抑制率隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)，但是5 天EG抑制率、3 天 BG抑制率、12 h CBH抑制率有所降低。臺(tái)灣乳白蟻經(jīng)氧化苦參堿處理7 天后，活動(dòng)水平明顯減弱，工蟻質(zhì)量處理組顯著低于對(duì)照組，白蟻死亡率處理組顯著高于對(duì)照組。【結(jié)論】 本研究明確了1%氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻FPA及EG、BG、CBH的活性均具有明顯的抑制作用，表明纖維素酶活性的抑制作用是氧化苦參堿殺蟲(chóng)活性的機(jī)制之一。氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻具有慢性致死活性，利用氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻纖維素消化的抑制作用，研發(fā)臺(tái)灣乳白蟻消化抑制劑應(yīng)用于白蟻的防治是一種值得探索的方法。

臺(tái)灣乳白蟻； 氧化苦參堿； 纖維素酶； 抑制作用

白蟻(Isoptera)是利用纖維素類(lèi)物質(zhì)最為成功的昆蟲(chóng)，全世界白蟻種類(lèi)有近3 000種(Krishnaetal., 2013)，作為生態(tài)系統(tǒng)的高效分解者發(fā)揮著重要的生態(tài)作用(Bignelletal., 2000)。白蟻每年能夠消耗74%～99%的木材纖維素，強(qiáng)大的纖維素消化能力與其具有豐富的纖維素酶密切相關(guān)(Breznaketal.,1994； Watanabeetal., 2010)。白蟻體內(nèi)通常包括3種類(lèi)型的纖維素酶，即內(nèi)切葡聚糖酶(endo-β-1,4-glucanases，EG，EC 3.2.1.4)、β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase，BG，EC 3.2.1.21)、外切葡聚糖酶(exo-β-1,4-glucanases，C1，EC 3.2.1.91)。外切葡聚糖酶包括纖維二糖水解酶(cellobilohydrolase，1,4-β-D- glucancellobiohydrolase，CBH)和外葡萄糖水解酶(exoglucohydrolase，1,4-β-D-glucanexoglucohydrolase)(相輝等， 2009； Lietal., 2009)。

在白蟻類(lèi)群中，約2.8%的物種對(duì)木材、建筑材料等構(gòu)成嚴(yán)重危害(Watanabeetal., 2001； Rustetal., 2012)，白蟻安全防治技術(shù)一直是白蟻防治研究的重要方向之一(Vermaetal., 2009)。隨著環(huán)境與人類(lèi)健康問(wèn)題的日益突出以及POPs公約的全面實(shí)施，對(duì)白蟻預(yù)防與防治替代性藥物與新措施的研究再次受到關(guān)注(Rustetal., 2012)。臺(tái)灣乳白蟻(Coptotermesformosanus)(等翅目 Isoptera: 鼻白蟻科Rhinotermitidae)是已知危害嚴(yán)重且易傳播蔓延的世界性有害白蟻種類(lèi)之一，在我國(guó)華南地區(qū)為害尤為嚴(yán)重(Evansetal., 2013)。目前利用病原微生物控制白蟻并沒(méi)有明顯的應(yīng)用價(jià)值，而利用植物源活性成分控制白蟻的研究日益受到重視(Vermaetal., 2009； Chouvencetal., 2011)。植物源活性成分的研究報(bào)道多關(guān)注于白蟻觸殺、驅(qū)避和拒食活性，用于保護(hù)木材與建筑結(jié)構(gòu)等(Maistrelloetal., 2003; Rainaetal., 2012)。

氧化苦參堿(oxymatrine)是從豆科植物苦參(Sophoraflavescens)中提取的一種生物堿?？鄥⒃谖覈?guó)分布廣泛，苦參生物堿具有廣譜的殺蟲(chóng)效果及抑菌活性，可用于防治多種農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)如桃蚜(Myzuspersicae)、褐飛虱(Nilaparvatalugers)等，對(duì)白蟻也有一定的防治效果(袁靜等， 2004； Maoetal., 2007)。Mao等(2007)研究發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻的毒性較低，高劑量具有顯著的拒食活性，但對(duì)白蟻取食消化過(guò)程中纖維素酶活性是否產(chǎn)生影響尚無(wú)報(bào)道。1%氧化苦參堿對(duì)白蟻具有一定的慢性胃毒作用，本文研究氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻濾紙酶活性(filter paper activity，F(xiàn)PA)及纖維素酶EG、BG、CBH活性的影響，為探討氧化苦參堿在白蟻預(yù)防與控制方面的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試白蟻 供試蟲(chóng)源采自廣州國(guó)際生物島，帶回實(shí)驗(yàn)室用10 L塑料箱(內(nèi)含松木板)飼養(yǎng)。飼養(yǎng)條件： 溫度(26±1)℃，相對(duì)濕度65%±5%，黑暗無(wú)光照。試驗(yàn)前挑取活力較好、大小一致的臺(tái)灣乳白蟻工蟻供試。

1.1.2 主要試劑 氧化苦參堿(oxymatrine，美倫生物)，0.9%氯化鈉溶液，SAB緩沖液(醋酸-醋酸鈉緩沖液)，羧甲基纖維素鈉(CMC-Na，AR，天津福晨)，D-水楊苷(D-Salicin，AR，上海阿拉丁)，葡萄糖(BR)，對(duì)硝基苯-β-D-纖維二糖苷 (p-NPC，Sigma)，對(duì)硝基苯酚(p-NP，Sigma)，碳酸鈉(Na2CO3，AR)，3，5 -二硝基水楊酸(DNS，AR，廣州光華)，酒石酸鉀鈉(AR，天津福晨)，結(jié)晶酚(AR，北京鼎國(guó))，無(wú)水硫酸鈉(AR)，考馬斯亮藍(lán) G-250(廣州化學(xué))，牛清血蛋白組分V(BSA，北京鼎國(guó))。

1.2 方法

1.2.1 臺(tái)灣乳白蟻喂食處理 挑取活力較好且大小一致的臺(tái)灣乳白蟻工蟻若干，饑餓處理2 天后，分為對(duì)照組和處理組，用直徑7 cm的濾紙喂食，2組均重復(fù)6次，其中3次重復(fù)用于酶活測(cè)定，3次重復(fù)用于活力與存活情況觀察。處理組濾紙用500 μL 1%氧化苦參堿溶液潤(rùn)濕，對(duì)照組濾紙用500 μL滅菌蒸餾水潤(rùn)濕，稍晾干后放入直徑9 cm的培養(yǎng)皿中。對(duì)用于酶活測(cè)定的重復(fù)，每培養(yǎng)皿放入白蟻約150頭，置于 26 ℃恒溫培養(yǎng)箱，每天分別添加1次適量滅菌蒸餾水保持濕潤(rùn)狀態(tài)。在處理后6 h、12 h、1 天、3 天、5 天、7天，分別在每個(gè)重復(fù)中選取活力較好的白蟻各15頭，提取粗酶，用于纖維素酶活性測(cè)定。用于生長(zhǎng)發(fā)育觀察的重復(fù)，每培養(yǎng)皿各放入白蟻100頭，測(cè)定質(zhì)量后，進(jìn)行同上的濾紙喂食試驗(yàn)，于第7天測(cè)定白蟻質(zhì)量，記錄累計(jì)死亡率。

1.2.2 粗酶制備 將選取的15頭白蟻用預(yù)冷的0.9%氯化鈉溶液漂洗，用濾紙吸干白蟻表面水分，分別放入裝有500 μL預(yù)冷 SAB 緩沖液(0.1 mol·L-1，pH 5.6)的離心管中，用電動(dòng)組織研磨器(TIANGEN，OSE-Y10)冰浴研磨。4 ℃、12 000 r·min-1離心(Scilogex，D3024R)勻漿液10 min，取上清液；4 ℃、12 000 r·min-1再次離心5 min，取上清液即粗酶液于-20 ℃保存，待酶活測(cè)定。

1.2.3 蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定 蛋白質(zhì)濃度采用考馬斯亮藍(lán)法(Bradford， 1976)測(cè)定。根據(jù)制備的粗酶液濃度按一定比例進(jìn)行稀釋?zhuān)?0 μL稀釋后的粗酶液加入350 μL考馬斯亮藍(lán)G-250顯色劑，混勻后靜置3 min，顯色后采用多功能酶標(biāo)儀(PerkinElmer，1420- 012 victor3)測(cè)定595 nm波長(zhǎng)處的吸光值。根據(jù)同時(shí)測(cè)定的牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算粗酶液的蛋白質(zhì)濃度。每個(gè)反應(yīng)體系重復(fù)3次。

1.2.4 濾紙酶活性(FPA)的測(cè)定 參照Miller(1959)方法，采用還原糖法測(cè)定。每個(gè)離心管中放入1張濾紙小圓片(每張濾紙小圓片約3.5 mg，高溫滅菌)，再加入120 μL SAB緩沖液(0.1 mol·L-1，pH 5.6)浸潤(rùn)濾紙。加入12 μL粗酶液，混勻后于37 ℃恒溫水浴60 min，對(duì)照管用SAB緩沖液(0.1 mol·L-1，pH 5.6)代替粗酶液。反應(yīng)完畢后加入120 μL DNS 溶液，沸水浴5 min顯色后迅速冰浴冷卻，用SAB 緩沖液定容到500 μL，用酶標(biāo)儀測(cè)定540 nm 波長(zhǎng)處各樣品的吸光值，同時(shí)測(cè)定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的吸光值，根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算FPA。每個(gè)反應(yīng)體系重復(fù)3次。酶活力單位(U)定義為在37 ℃、pH 5.6反應(yīng)條件下，每分鐘水解底物產(chǎn)生1 μg還原糖的酶量； 比活力(IU)定義為每毫克酶蛋白的酶活力單位數(shù)(U·mg-1)。

1.2.5 內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖酶(EG)和β-葡糖苷酶(BG)活性的測(cè)定 EG和BG的活性均采用還原糖法測(cè)定，分別以1% CMC-Na溶液和1% Salicin溶液為底物。取120 μL底物溶液和12 μL粗酶液，37 ℃恒溫水浴60 min，對(duì)照管用SAB緩沖液代替粗酶液。反應(yīng)完畢后加入120 μL DNS 溶液終止反應(yīng)，沸水浴5 min顯色后迅速冰浴冷卻，用SAB 緩沖液定容到500 μL，用酶標(biāo)儀測(cè)定540 nm 波長(zhǎng)處各樣品的吸光值，同時(shí)測(cè)定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的吸光值，根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算EG和BG活性。每個(gè)反應(yīng)體系重復(fù)3次。酶活力單位(U)與比活力(IU)定義同 1.2.4。

1.2.6 纖維二糖水解酶(CBH)的活性測(cè)定 CBH的活性測(cè)定以0.1 mol·L-1p-NPC為底物，取120 μL底物溶液和12 μL粗酶液，37 ℃恒溫水浴60 min，對(duì)照管用SAB 緩沖液代替粗酶液。反應(yīng)完畢后加入120 μL 1 mol·L-1Na2CO3溶液終止反應(yīng)，用SAB 緩沖液定容到500 μL，用酶標(biāo)儀測(cè)定405 nm 波長(zhǎng)處各樣品的吸光值，根據(jù)同時(shí)測(cè)定的p-NP標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算CBH活性。每個(gè)反應(yīng)體系重復(fù)3次。酶活力單位(U)定義為在37 ℃、pH 5.6反應(yīng)條件下，每分鐘水解底物產(chǎn)生1 μgp-NP的酶量；比活力(IU)定義同 1.2.4。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用Excel 2010軟件進(jìn)行酶活力和比活力計(jì)算，SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)及酶活性抑制作用的Duncan多重比較，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean ± SE)表示。

纖維素酶活性抑制率(%)=(對(duì)照纖維素酶活性-氧化苦參堿處理后纖維素酶活性)/對(duì)照纖維素酶活性×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻FPA的影響

由表1可見(jiàn)，處理組FPA均低于對(duì)照，除處理后6 h的測(cè)定結(jié)果無(wú)顯著差異(F5=5.898,P=0.072)外，處理后12 h(F5=28.003,P=0.006)、1 天(F5=155.078,P<0.001)、3 天(F5=45.506,P=0.003)、5 天(F5=63.965，P=0.001)、7 天(F5=24.779,P=0.008)的測(cè)定結(jié)果均與對(duì)照差異極顯著。

2.2 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻EG活性的影響

由表2可見(jiàn)，處理組EG活性均低于對(duì)照。處理后6 h(F5=13.013,P=0.023)、1天(F5=19.475,P=0.012)，處理組測(cè)定結(jié)果與對(duì)照差異顯著；處理后12 h(F5=62.058,P=0.001)、3天(F5=33.333,P=0.004)、5天(F5=77.212,P=0.001)、7天(F5=122.283,P<0.001)，處理組測(cè)定結(jié)果與對(duì)照差異極顯著。

2.3 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻BG活性的影響

由表3可見(jiàn)，處理組BG活性均低于對(duì)照。處理后6 h(F5=9.282,P=0.038)、1天(F5=11.558,P=0.027)、3天(F5=18.868,P=0.012)，處理組測(cè)定結(jié)果與對(duì)照差異顯著； 處理后12 h(F5=66.627,P=0.001)、5天(F5=54.559,P=0.002)、7天(F5=342.264,P<0.001)，處理組測(cè)定結(jié)果與對(duì)照差異極顯著。

2.4 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻CBH活性的影響

由表4可見(jiàn)，處理組CBH活性均低于對(duì)照。除處理后6 h的測(cè)定結(jié)果無(wú)顯著差異(F5=2.148,P=0.217)外，處理后12 h(F5=10.915,P=0.030)、1 天(F5=8.522,P=0.043)、3 天(F5=10.196,P=0.033)、5 天(F5=12.972,P=0.023)、7 天(F5=16.830,P=0.015)的測(cè)定結(jié)果均與對(duì)照差異顯著。

表1 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻FPA的影響Tab.1 Effect of oxymatrine on FPA of C. formosanus

①*表示0.05水平下與對(duì)照差異顯著，**表示0.01水平下與對(duì)照差異顯著，下同。* indicated the significant difference with control at 0.05 level. **indicated the significant difference with control at 0.01 level.The same below.

表2 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻EG活性的影響Tab.2 Effect of oxymatrine on EG activity of C. formosanus

表3 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻BG活性的影響Tab.3 Effect of oxymatrine on BG activity of C. formosanus

表4 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻CBH活性的影響Tab.4 Effect of oxymatrine on CBH activity of C. formosanus

2.5 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻纖維素酶活性抑制率的影響

氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻FPA、EB、BG、CBH酶活性的抑制率見(jiàn)表5，整體表現(xiàn)為FPA>EG≥BG>CBH。除3 天及5 天的EG抑制率、3 天 BG抑制率、12 h CBH抑制率外，整體抑制效果均隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。

本研究表明，氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻的纖維素酶活性具有抑制作用，對(duì)FPA和EG、BG、CBH活性均有一定的抑制效果，其中最大抑制率為 5 天 的FPA 抑制率53.76%±4.86%，分別高于7天 的EG、BG 和 5天 的 CBH 活性最大抑制率33.62%±1.39%、34.37%±0.70%、22.59%±4.01%，說(shuō)明氧化苦參堿對(duì)于纖維素酶系統(tǒng)整體抑制效果更明顯。

表5 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻纖維素酶活性抑制率的影響①Tab.5 Effect of oxymatrine on cellulase inhibition rate of C. formosanus

①同一列不同字母表示0.05水平差異顯著。Different letters in same column mean significant difference at 0.05 level.

2.6 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻質(zhì)量和死亡率的影響

表6可見(jiàn)，對(duì)照組和處理組白蟻的初始質(zhì)量無(wú)顯著差異(F5=0.165,P=0.705)，處理7 天后，處理組的質(zhì)量顯著低于對(duì)照組(F5=1 075.109,P<0.001)，其死亡率顯著高于對(duì)照組(F5=78.400,P=0.001)。處理組白蟻的活動(dòng)水平弱于對(duì)照組。

表6 氧化苦參堿對(duì)臺(tái)灣乳白蟻質(zhì)量和死亡率的影響Tab.6 Effect of oxymatrine on the mass and mortality of C. formosanus

3 討論

白蟻已進(jìn)化出獨(dú)特而高效的消化系統(tǒng)，能夠依靠自身和共生微生物分泌的纖維素酶降解食物中的纖維素類(lèi)成分(Nakashimaetal., 2002； 楊天賜等， 2006)，低等白蟻可借以維持全部的生長(zhǎng)發(fā)育需求(Watanabeetal., 2010)。目前，化學(xué)防治仍然是白蟻?zhàn)钇毡?、最主要的防治方法，但?duì)白蟻安全防治技術(shù)的探索從未停止，其中包括植物源白蟻藥劑的研究(Chouvencetal., 2011)。纖維素酶具有廣譜或?qū)Ｐ缘囊种苿瑥V泛存在于自然界中(Mandelsetal.,1965)，因此，尋找天然纖維素酶抑制劑，通過(guò)抑制纖維素酶活性干擾白蟻新陳代謝，達(dá)到防治目的，是一種值得探索的防治理念。

氧化苦參堿和苦參堿作為從豆科植物苦參中提取的喹嗪啶類(lèi)生物堿，具有顯著的生物活性，在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)上已得到了廣泛應(yīng)用。在植物體內(nèi)氧化苦參堿為較穩(wěn)定的天然存在形式，其與苦參堿在提取后也存在著相互轉(zhuǎn)化(Luetal.,1996； 羅萬(wàn)春等， 1997)。氧化苦參堿和苦參堿對(duì)于昆蟲(chóng)的乙酰膽堿酯酶活性有明顯的抑制作用和拒食活性(羅萬(wàn)春， 1995)，Du等(2004)研究表明苦參堿對(duì)棉鈴蟲(chóng)(Helicoverpaarmigera)鈉通道具有濃度依賴(lài)性阻滯作用，但目前并無(wú)闡明氧化苦參堿對(duì)于纖維素酶消化的抑制作用機(jī)制是使蛋白變性或抑制分泌，因此苦參提取物的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

氧化苦參堿對(duì)白蟻具有一定的胃毒作用，本研究結(jié)果說(shuō)明氧化苦參堿對(duì)纖維素酶活性的抑制是其作用機(jī)制之一。研究表明白蟻取食量隨著氧化苦參堿濃度的提高而減少，高濃度氧化苦參堿將引起白蟻取食量顯著降低(Maoetal., 2007)，氧化苦參堿濃度太低在實(shí)際應(yīng)用中將影響防治效果，0.1%～1%的氧化苦參堿可能是適宜的應(yīng)用濃度。因此，將苦參植物提取物與誘食餌料結(jié)合，可研制白蟻抑食劑及消化干擾劑，作為誘殺餌劑應(yīng)用于白蟻的防治。

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(責(zé)任編輯 朱乾坤)

Inhibitory Effect of Oxymatrine on Cellulase Activity ofCoptotermesformosanus(Isoptera: Rhinotermitidae)

Gu Daifei1Yan Shanchun1Li Zhiqiang2

(1.CollegeofForestry,NortheastForestryUniversityHarbin150040; 2.GuangdongPublicLaboratoryofWildAnimalConservationandUtilizationGuangdongKeyLaboratoryofAnimalConservationandResourceUtilizationGuangdongInstituteofAppliedBiologicalResourcesGuangzhou510260)

【Objective】The formosan subterranean termite,Coptotermesformosanus(Isoptera: Rhinotermitidae), is one of important wood-feeding pest in China. To protect the ecological environment and reduce the use of the chemical pesticide in Taiwan termite prevention, it is urgently needed to search for alternative ingredients in place of the persistent organic pollutants (POPs) of the pesticide. This study investigated oxymatrine, from plants, with insecticidal activity that has inhibitory effect on cellulase activity of Taiwan termite workers, in order to provide the basis for the application of oxymatrine in the termite prevention and control.【Method】In this study, the workers ofC.formosanusstarved for 2 d were fed by 1% oxymatrine treated filter paper were investigated under laboratory conditions [temperature, (26±1) ℃, relative humidity, 65%±5%, in the dark]. In 6 h,12 h,1 d,3 d,5 d,7 d after treatment, digestive tracts of Taiwan termite ants were collected and the protein content was determined using the Coomassie Brilliant Blue G-250, and the filter paper activity (FPA), endo-β-1,4-glucanases (EG), β-glucosidase (BG), and cellobilohydrolase (CBH) activities were assayed using the dinitrosalicylic acid method. 【Result】 The results showed that 1% oxymatrine had significant inhibitory effect on filter paper activity(FPA)and the activities of endo-1,4-β-glucanase (EG)，β-1,4-D-glucosidase (BG) and cellobilohydrolase (CBH) except for the activity of FPA and CBH in 6 h. The average cellulase inhibition rate was FPA>EG≥BG>CBH. Cellulase inhibition rate increased with the extension of treatment time, except for the EG inhibition rate in 5 d, BG inhibition rate in 3 d, and CBH inhibition rate in 12 h. Activity ofC.formosanusworkers exposed to 1% oxymatrine for 7 days was weakened significantly. The weight of the treated termite workers was significantly decreased compared with the control group, and the termite mortality was significantly increased.【Conclusion】 This study determined that 1% oxymatrine had significant inhibitory effect on cellulas activity ofC.formosanus, indicating that the inhibition of cellulase activity is one of the mechanisms of oxymatrine on insecticidal activity. Oxymatrine has chronic lethal activity onC.formosanus. The use of oxymatrine in suppressing cellulose digestibility ofC.formosanusis a worth exploring methods of prevention ofC.formosanus.

Coptotermesformosanus； oxymatrine； cellulase； inhibition

10.11707/j.1001-7488.20170210

2016-04-12；

2016-09-06。

廣東省自然科學(xué)基金(2015A030310429)； 廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(201510010036)； 廣東省科學(xué)院重大科技產(chǎn)出規(guī)劃專(zhuān)項(xiàng)(zdccyd201307)。

S718.7

A

1001-7488(2017)02-0083-06

*嚴(yán)善春為通訊作者。