鄧月月 劉文華 戴鶯鶯

420例流產(chǎn)物染色體核型分析

鄧月月 劉文華 戴鶯鶯

目的 探究流產(chǎn)物染色體異常核型。方法 選擇420例首次流產(chǎn)（早期流產(chǎn)）患者的宮腔搔刮或負壓抽吸的流產(chǎn)物進行染色體核型分析。 結(jié)果 420例樣本染色體核型分析結(jié)果正常145例（34．5%），異常230例（54．8%），體外培養(yǎng)未見細胞生長45例（10．7%）。230例染色體異常樣本中以染色體數(shù)目異常最為常見，主要有16-三體42例（18．2%）、三倍體28例（12．2%）、X單體25例（10．8%）、四倍體12例（5．2%）、15-三體12例（5．2%），其他類型染色體異常包括染色體片段缺失、重復(fù)、插入、易位等。結(jié)論染色體異常是早期流產(chǎn)的重要原因，其中16-三體是最常見的染色體異常核型。

核型分析 流產(chǎn)物 染色體異常

流產(chǎn)是指妊娠不足28周、胎兒體重不足1 000g而終止的情況。有文獻報道臨床診斷妊娠者發(fā)生流產(chǎn)的概率約為15%，其中2次及上自然流產(chǎn)的發(fā)生率為2.2%～4.0%[1]。相關(guān)研究表明胚胎、胎兒染色體異常是早期流產(chǎn)的常見病因之一，占50%～60%[2]。染色體異常主要包括數(shù)目異常和結(jié)構(gòu)異常，常見的異常核型有三倍體、多倍體、X單體等。妊娠合并染色體異常的結(jié)局為流產(chǎn)的概率高達99%。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)者的流產(chǎn)物染色體異常發(fā)生率較高，目前可采用胚胎或胎兒流產(chǎn)組織體外培養(yǎng)法檢測染色體異常。有學(xué)者推薦對一次流產(chǎn)者的流產(chǎn)物進行細胞遺傳學(xué)分析，故筆者收集420例首次流產(chǎn)（早期流產(chǎn)）患者的宮腔搔刮或負壓抽吸的流產(chǎn)物進行染色體核型分析，以探究流產(chǎn)物染色體異常核型，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 收集2014年12月至2016年6月在本院計劃生育門診就診的528例首次流產(chǎn)（早期流產(chǎn)）患者的宮腔搔刮或負壓抽吸的流產(chǎn)物，并存于密封的容器。本研究獲得本院人體研究倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 由高年資的細胞遺傳學(xué)研究者分離流產(chǎn)物樣本，取胚胎或絨毛組織進行體外培養(yǎng)，供染色體核型分析；其中108例不含胚胎或絨毛組織的樣本均丟棄，共分析染色體核型樣本420例。將樣品置于5ml的培養(yǎng)基（pH7.0）中，在CO2、37℃環(huán)境中培養(yǎng)24～48h；然后置于2個Leighton管[一個含有半Chang D?，另一個含有Amniomax?（2.5ml，pH7.0）]中制備培養(yǎng)物，在CO2、37℃的環(huán)境中溫育；當(dāng)有足夠的組織生長時，每5ml培養(yǎng)物中加入60μl秋水仙堿，持續(xù)45min；最后除去生長培養(yǎng)基，在室溫下加入1%檸檬酸鈉10min。以上步驟重復(fù)2次，然后制板并用G帶染色。

1.3 觀察指標(biāo) 計算早期流產(chǎn)患者的流產(chǎn)物各種類型染色體異常所占的比例，即某類型染色體異常例數(shù)/染色體異?？倲?shù)。

2 結(jié)果

2.1 染色體核型分析結(jié)果 420例樣本染色體核型分析結(jié)果正常145例（34.5%），異常230例（54.8%），體外培養(yǎng)未見細胞生長45例（10.7%）。230例染色體異常樣本中以染色體數(shù)目異常最為常見，主要有16-三體42例（18.2%）、三倍體28例（12.2%）、X單體25例（10.8%）、四倍體12例（5.2%）、15-三體12例（5.2%），其他類型染色體異常包括染色體片段缺失、重復(fù)、插入、易位等，異常類型包括[+13，+15]、[+7，+16]、[+13，+21]、[+9，+13]、[+ 18，+21]、[+9，+14]、[+15，+21]、[+15，+16]、[Der（14；14）]、[Der（13；14）]、[Der（13；14）]、[Der（16；18）]、[Dup（7）（q21q34）]、[Der（10）t（10；16）（q25；q13）]、[R（14）（p11.2q32）]、[Der（6）t（6；X）（q11；q13）]、[48，XXY，+16]、[Add（17）（p11.2）]、[91，XXYY，+6，-21，-21]、[T（3；4）（q13；q35）]、[70，XXX，+ 22]、[68，XXX，-21]、[68，XXY，-17]、[Add（3）（p25，p26）]、[Dup（9）（q21q34）]、[Der（11；22）]、[-22，t（9；22）]、[Inv（Y）]、[T（3；13）（q27；q14）]、[Der（7）t（7；X）（q11；q12）]，見表1。

表1 染色體數(shù)目異常核型分析結(jié)果（n=230）

3 討論

目前診斷不良孕產(chǎn)病因的主要方法是對流產(chǎn)物進行細胞遺傳學(xué)分析，以便于指導(dǎo)治療方案的制定，降低病因診斷成本[1]。早期流產(chǎn)的主要病因是染色體異常，相關(guān)研究表明55.4%的流產(chǎn)病因是染色體異常[3]。本研究結(jié)果表明最常見的染色體異常類型是16-三體，與以往研究結(jié)果一致[4-5]。三體多與流產(chǎn)者年齡相關(guān)，年齡越大則染色體異常發(fā)生率越高；對于年齡＜35歲且不伴有染色體異常的流產(chǎn)者，流產(chǎn)病因主要包括內(nèi)分泌因素、免疫因素、解剖因素等。多倍體、X單體亦是流產(chǎn)的常見病因，但相關(guān)研究表明與年齡未見相關(guān)性[5]。本研究結(jié)果表明54.8%的流產(chǎn)病因是染色體異常，與以往研究結(jié)果基本一致[5-6]。一項115例早期流產(chǎn)者流產(chǎn)物核型分析結(jié)果表明，61%的流產(chǎn)病因是染色體異常，其中染色體數(shù)目異常占90%，染色體結(jié)構(gòu)異常占10%[3]。一項相似的研究顯示420例早期流產(chǎn)者流產(chǎn)物染色體核型分析結(jié)果異常率為46%。因此，流產(chǎn)物核型分析可用于早期病因診斷及指導(dǎo)治療方案制定，降低病因診斷成本[1]。筆者建議對流產(chǎn)物核型分析結(jié)果正常的二次早期流產(chǎn)者，需查找其他病因。

綜上所述，染色體異常尤其是非整倍體，是流產(chǎn)的重要病因。其中16-三體是最常見的染色體異常類型，其次為三倍體、X單體、四倍體、15-三體等。細胞遺傳學(xué)分析對流產(chǎn)（尤其是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)）具有重要的診斷價值。

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Cytogenetic analysis of miscarriage samples

Objective To examine the chromosome abnormalities in miscarriage samples．MethodsTissue samples were collected from uterine curettage or vocuum suction in 420 miscarriage patients,and the karyotype analysis was performed．Results There were 145 cases of normal results(34．5%),230 cases of abnormal results(54．8%),and in 45 samples there was no cell growth(10．7%)．In 230 abnormal samples numerical abnormalities were the most frequent,including 16-trisomy(42 cases), triploidy(28 cases),monosomy X(25 cases),tetraploidy(12 cases)and 15-trisomy (12 cases);the other abnormalities were chromosome deletion,duplication,insertion and translocation． Conclusion Cytogenetic alterations are important cause of miscarriages and 16-trisomy is the most frequent one．

Karyotype analysis Miscarriage Chromosomal alterations

2016-12-16）

（本文編輯：陳丹）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.5.2016-2119

310008 杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院婦產(chǎn)科

鄧月月，E-mail：173049592@qq.com