巫莉莎 綜述，李明松，白雪峰，智發(fā)朝△ 審校

(1.南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院消化內科，廣州 510515；2.美國俄亥俄州立大學病理部，俄亥俄州哥倫布 43210)

·綜 述·

CD200/CD200受體與炎癥性腸病腸道免疫的研究進展

巫莉莎1綜述，李明松1，白雪峰2，智發(fā)朝1△審校

(1.南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院消化內科，廣州 510515；2.美國俄亥俄州立大學病理部，俄亥俄州哥倫布 43210)

CD200；CD200R；炎癥性腸病；腸道免疫

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)包括潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis,UC)和克羅恩病(Crohn′s disease,CD)，是西方國家常見的一種胃腸道慢性非特異性炎癥性疾病，近年來發(fā)病率在中國呈上升趨勢。IBD是由基因易感性、環(huán)境因素、腸道菌群失調、黏膜破壞及腸道免疫紊亂等多重因素造成的，其中，腸道免疫系統(tǒng)的失調在IBD的發(fā)生及發(fā)展中起重要作用[1]。CD200廣泛分布于腸道內皮組織，同時CD200受體(CD200 receptor,CD200R)也在腸道免疫細胞如巨噬細胞、T細胞等表面上表達，CD200與CD200R結合后將下調免疫細胞的功能，減少炎性反應。本文將概述CD200/CD200R對腸道免疫系統(tǒng)的影響，為臨床治療IBD提供參考作用。

1 腸道免疫與IBD

1.1 獲得性免疫與IBD 腸道免疫系統(tǒng)主要分為固有免疫系統(tǒng)和獲得性免疫系統(tǒng)，其中獲得性免疫紊亂在IBD發(fā)生與發(fā)展中起主導作用。IBD主要由T細胞介導的免疫反應類型所致，其免疫反應類型及相關的細胞因子在CD和UC中有所區(qū)別，CD主要為 Th1細胞介導的免疫反應，其相關細胞因子為干擾素(IFN)-γ、白細胞介素(IL)-12等[2]。此外，Th17也被證實與CD有密切的聯系，其相關細胞因子IL-17和IL-22在CD患者血清中顯著增高[3]。UC主要為類Th2的免疫反應，其相關細胞因子IL-5和IL-13在UC患者中增高[2]。另外，還有一群表達特異性轉錄因子FoxP3的調節(jié)性T細胞，能分泌IL-10和輕化生長因子(TGF)-β，抑制其他效應性T細胞的增殖和功能，它的減少或功能減弱也是引發(fā)IBD的重要原因[4]。

1.2 固有免疫與IBD 越來越多的研究證實了腸道固有免疫系統(tǒng)與IBD發(fā)病密切相關。腸道固有免疫細胞包括腸道常駐巨噬細胞、樹突細胞、中性粒細胞等，它們數量龐大，具有吞噬病原菌、修復腸道黏膜及維持免疫耐受的功能[2]。巨噬細胞與樹突細胞的異常反應參與了IBD的發(fā)病機制，IBD患者腸道的巨噬細胞表面病原模式受體TLR和CD14為高表達，與脂多糖(LPS)結合后能激活巨噬細胞的核因子(NF)-κB和絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路，使其產生一系列致炎因子IL-1β、腫瘤壞死因子(TNF)、IL-6和IL-8α[5]等。中性粒細胞則通過破壞黏膜屏障、釋放氧化物及蛋白溶解物及產生一系列炎癥因子等誘發(fā)IBD[6]。

1.3 γδT細胞與IBD 在腸上皮內淋巴細胞里有一群特殊的γδT細胞，兼?zhèn)涔逃忻庖吲c適應性免疫的特性，一方面它具有誘導炎癥的功能，如分泌Th1類型的細胞因子IFN-γ、TNF-α，募集巨噬細胞和溶解細胞；一方面它具有調節(jié)免疫系統(tǒng)的功能，如分泌Th2類型細胞因子IL-4、IL-10,修復上皮組織，調節(jié)中性粒細胞和單核細胞的募集[7]。在IBD患者腸黏膜中，γδT細胞的數量表現為顯著增加，尤其是IL-17+γδT細胞在IBD的發(fā)生中十分重要[8]。

2 CD200與CD200R表達與分子機制

2.1 CD200 CD200是一種細胞表面糖蛋白，屬于免疫球蛋白超級家族的一員。它包括兩個胞外免疫球蛋白結構和一個由19個氨基酸組成的胞內結構信號域。CD200廣泛表達于各種正常組織中，包括胸腺、皮膚、神經系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、內皮細胞、B細胞和T細胞[9]。

2.2 CD200R CD200R是CD200的同源配體，也是一種免疫球蛋白超級家族蛋白。CD200R在小鼠細胞和人類細胞上的表達模式相似，具有4個亞型CD200R1-4或CD200RLa-d[10]，主要表達于巨噬細胞、樹突細胞、中性粒細胞、肥大細胞及激活的T細胞[9]。

2.3 CD200R下游信號通路 CD200R1由67個氨基酸組成，其胞內尾部結構含有3個酪氨酸殘基，第3個酪氨酸殘基位于NPXY 模體上，該酪氨酸在CD200R1與CD200結合后被磷酸化。上述過程將募集及磷酸化?？康鞍?Dok)1和Dok2，結合Ras三磷酸鳥苷活化蛋白(RasGAP)和SHZ結構含磷酸肌醇(SHIP),在巨噬細胞和肥大細胞中，該級聯反應被證實具有抑制細胞外調解蛋白激酶(ERK)、P38和C-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化的作用[11]。與CD200R1相比，其他CD200R樣受體可能具有激活性受體的功能，CD200R樣受體的膜內鏈區(qū)較短，在跨膜區(qū)有1個賴氨酸殘基，與信號蛋白DNAX活化蛋白(DAP)12、DAP10、FcRγ、或CD3s等分子結合后，對肥大細胞和堿性粒細胞的功能產生增強的作用[12-13]。綜上所述，盡管其他CD200R樣受體可具有激活免疫細胞的功能，但CD200R作為抑制性受體與CD200結合后下調免疫細胞的功能已被多數報道證實。

3 CD200及CD200受體與腸道免疫系統(tǒng)

3.1 CD200/CD200R在腸道的分布 在小鼠腸道中，CD200在血管及淋巴內皮細胞，黏膜B細胞及部分CD4+T細胞上高度表達，CD200R主要在腸道常駐巨噬細胞上表達[14]。筆者也發(fā)現，CD200R在腸系膜淋巴結激活的T細胞及調節(jié)性T細胞上也有表達。這說明了CD200/CD200R與腸道免疫細胞功能的調節(jié)密切相關。

3.2 CD200/CD200R對腸道髓系細胞的作用 CD200R能促進巨噬細胞由M1型向M2型轉化[15]，并抑制其炎癥因子如TNF、IFN 及IL-17的產生[16]。此外，研究發(fā)現IBD患者腸黏膜內皮能高表達血管內皮黏附分子(VCAM)1、極遲抗原(VLA)4及細胞間黏附分子(ICAM)1,從而促進巨噬細胞和中性粒細胞在腸道的聚集[3]。而CD200與CD200R相互作用，對抑制免疫細胞在血管內皮的附著及遷移具有重要作用[17]。

3.3 CD200/CD200R對腸道T細胞的作用 克羅恩腸病主要為Th1介導的免疫反應，CD200R信號能誘導類漿樹突細胞的吲哚胺2,3-雙氧酶表達，從而激活色氨酸免疫抑制通路，使T細胞因子譜由Th1向Th2轉換[9]。CD200作用于CD200R能抑制效應性T細胞的活動，如CD200Fc能抑制CD4+T細胞增生，促進CD4+T細胞凋亡以及CD4+T細胞向Th17細胞分化[18]，誘導T細胞耐受需要CD200信號等[19]。調節(jié)性T細胞的缺失也和IBD的發(fā)生具有緊密聯系，CD200與CD200R1相互作用能促進TGF-β因子的表達。TGF-β對于誘導和維持調節(jié)性T細胞的抑制性功能具有重要作用[9]。刺激CD200R2/3信號能誘導樹突細胞增生，進而促進調節(jié)性T細胞的產生[20]。因此，以上發(fā)現均提示CD200/CD200R相互作用與抑制腸道效應性T免疫細胞功能、促進調節(jié)性T細胞生長密切相關。

3.4 CD200/CD200R對腸道T細胞作用 γδT細胞在腸道免疫系統(tǒng)分布廣泛，其功能及數量失調對IBD的發(fā)生起重要作用。有研究發(fā)現CD200/CD200R信號能抑制γδT細胞的增生及細胞因子的分泌[10]。γδT細胞能高表達IL-17，故也稱為IL-17+γδT細胞，IL-17+γδT細胞表面表達IL-23受體，在一些感染及炎癥模型中，IL-23對促進IL-17+γδT反應具有重要作用[21]。而CD200R信號能誘導巨噬細胞由M1型向M2型轉換，因此提示CD200R可能通過抑制巨噬細胞產生IL-23從而抑制IL-17+γδT細胞的功能。

4 CD200/CD200R與IBD發(fā)病機制的研究

目前，CD200R信號在IBD模型中作用的研究仍不充足。Bain等[14]發(fā)現CD200R1缺陷小鼠在自然狀態(tài)下不會出現IBD癥狀，并且在由硫酸葡聚糖誘導的腸炎中，CD200R1缺陷小鼠與野生型小鼠的臨床癥狀及巨噬細胞功能無顯著性差異，因此他們認為CD200R1對腸黏膜巨噬細胞無影響。然而，Chen等[22]發(fā)現CD200缺陷小鼠、CD200R1缺陷小鼠與野生型小鼠相比，更易感于硫酸葡聚糖誘導的急性腸炎，表現為更多巨噬細胞，中性粒細胞和T細胞的浸潤及炎性細胞因子的增加，在慢性腸炎中，高表達CD200分子的小鼠與野生型小鼠相比，IBD癥狀減輕，調節(jié)性T細胞在腸道中的數量顯著增加，因此認為CD200/CD200R對腸炎的發(fā)生和發(fā)展起抑制作用。

5 結 語

近十年來研究人員對CD200與CD200R的探索，認識了他們在自身免疫疾病的發(fā)生、發(fā)展和調節(jié)免疫細胞功能中的重要作用。免疫療法作為治療IBD的重要手段，已在臨床上被廣泛使用。盡管CD200/CD200R在IBD發(fā)病機制及治療中的研究仍欠缺，但在其他自身免疫病中的報道已證實其具有抑制自身免疫反應的作用。CD200在腸道的廣泛分布，CD200R在巨噬細胞、 T細胞及激活的T細胞上的高表達，以及CD200與CD200R結合后對免疫細胞的功能調節(jié)，均提示了以CD200R作為靶點展開IBD免疫療法的研究，具有巨大的潛在價值。

[1]Ananthakrishnan AN.Epidemiology and risk factors for IBD[J].Nat Rev Gastroenterol Hepatol,2015,12(4):205-217.

[2]Geremia A,Biancheri P,Allan P,et al.Innate and adaptive immunity in inflammatory bowel disease[J].Autoimmun Rev,2014,13(Suppl 1):3-10.

[3]De Souza HS.Fiocchi C.immunopathogenesis of IBD:current state of the art[J].Nat Rev Gastroenterol Hepatol,2016,13(1):13-27.

[4]Chamouard P,Monneaux F,Richert Z,et al.Diminution of circulating CD4+CD25 high T cells in na?ve crohn′s disease[J].Dig Dis Sci,2009,54(10):2084-2093.

[5]Frolova L,Drastich P,Rossmann P,et al.Expression of toll-like receptor 2(TLR2),TLR4,and CD14 in biopsy samples of patients with inflammatory bowel diseases:upregulated expression of TLR2 in terminal ileum of patients with ulcerative colitis[J].J Histochem Cytochem,2008,56(3):267-274.

[6]Brazil C,Louis A,Parkos A.The role of polymorphonuclear leukocyte trafficking in the perpetuation of inflammation during inflammatory bowel disease[J].Inflamm Bowel Dis,2013,19(7):1556-1565.

[7]Wu YL,Ding YP,Tanaka Y,et al.Gamma delta T cells and their potential for immunotherapy[J].Int J Biol Sci,2014,10(2):119-148.

[8]Do S,Visperas A,Dong C,et al.Cutting edge:Generation of colitogenic Th17 CD4 T cells is enhanced by IL-17+ γδ T cells[J].J Immunol,2011,186(8):4546-4550.

[9] Holmannova D,Kolackova M,Kondelkova K,et al.CD200/CD200R paired potent inhibitory molecules regulating immune and inflammatory responses; Part I: CD200/CD200R structure,activation,and function[J].Acta Medica (Hradec Kralove),2012,55(1):12-17.

[10]Talebian F,Liu Q,Liu ZZ,et al.Melanoma cell expression of CD200 inhibits tumor formation and lung metastasis via inhibition of myeloid cell functions[J].PLoS One,2012,7(2):e31442.

[11]Liu Q,Talebian F,Wu LS,et al.A critical role for CD200R signaling in limiting the growth and metastasis of CD200+melanoma[J].J Immunol,2016,197(4):1489-1497.

[12]Voehringer D,Rosen DB,Lanier LL,et al.CD200 receptor family members represent novel DAP12-associated activating receptors on basophils and mast cells[J].J Biol Chem,2004,279(52): 54117-54123.

[13]Kojima T,Obata K,Mukai K,et al.Mast cells and basophils are selectively activated in vitro and in vivo through CD200R3 in an IgE-independent manner[J].J Immunol,2007,179(10): 7093-7100.

[14]Bain C,Mowat M.CD200 receptor and macrophage function in the intestine[J].Immunobiology,2012,217(6):643-651.

[15]Jaguin M,Houlbert N,Fardel O,et al.Polarization profiles of human M-CSF-generated macrophages and comparison of M1-markers in classically activated macrophages from GM-CSF and M-CSF origin[J].Cell Immunol,2013,281(1):51-61.

[16]Jenmalm C,Cherwinski H,Bowman P,et al.Regulation of myeloid cell function through the CD200 receptor[J].J Immunol,2006,176(1):191-199.

[17]Ko YC,Chien HF,Jiang-Shieh YF,et al.Endothelial CD200 is heterogeneously distributed,regulated and involved in immune cell-endothelium interactions[J].J Anat,2009,214(1): 183-195.

[18]Snelgrove J,Goulding J,Didierlaurent M,et al.A critical function for CD200 in lung immune homeostasis and the severity of influenza infection[J].Nat Immunol,2008,9(9):1074-1083.

[19]Rygiel P,Karnam G,Goverse G,et al.CD200-CD200R signaling suppresses anti-tumor responses independently of CD200 expression on the tumor[J].Oncogene,2012,31(24):2979-2988.

[20]Gorczynski M.Thymocyte/splenocyte-derived CD4+CD25+Treg stimulated by anti-CD200R2 derived dendritic cells suppress mixed leukocyte cultures and skin graft rejection[J].Transplantation,2006,81(7):1027-1034.

[21]Bekiaris V,Sedy JR,Ware CF.Mixing signals:molecular turn ons and turn offs for innate gammadelta T-cells[J].Front Immunol,2014(5):654.

[22]Chen ZQ,Yu K,Zhu F,et al.Over-Expression of CD200 protects mice from dextran Sodium sulfate induced colitis[J].PLoS One,2016,11(2):e0146681.

巫莉莎(1990-)，在讀博士，主要從事炎癥性腸病免疫的研究。△

，E-mail:zhifc41532@163.com。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.24.040

R574.6

A

1671-8348(2017)24-3433-03

2017-03-02

2017-04-16)