陳同煜 范貴瑞 彭 濤 王玉超 古金元 胡東方 劉思當

（1山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山東泰安 271000；2山東費縣梁邱獸醫(yī)站，山東費縣 273416）

某疫情不穩(wěn)定豬場主要病毒性疾病抗體檢測與分析

陳同煜1范貴瑞2彭 濤1王玉超1古金元1胡東方1劉思當*

（1山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山東泰安 271000；2山東費縣梁邱獸醫(yī)站，山東費縣 273416）

2016年夏秋季節(jié)某規(guī)模化豬場生產(chǎn)狀況較差，不同豬群均出現(xiàn)疫情不穩(wěn)定現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎及弱胎，哺乳及保育豬腹瀉并多發(fā)神經(jīng)癥狀，育肥豬咳嗽、氣喘，其中以哺乳仔豬和保育仔豬群的發(fā)病最為嚴重，豬場經(jīng)投服多種抗生素治療，效果均不理想。懷疑病毒性疾病流行，遂對各日齡階段豬群隨機采集85份血清，采用ELⅠSA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）方法檢測豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gE、豬圓環(huán)病毒2型血清抗體，結果顯示：各日齡豬群抗體水平均不理想，符合發(fā)病豬群的基本特征。通過分析抗體檢測數(shù)據(jù)，查找免疫漏洞及疫病流行狀態(tài)，及時調(diào)整免疫程序，疫情得到迅速控制，從而顯著改善了該場生產(chǎn)成績，使該場生產(chǎn)步入健康軌道。

規(guī)?；i場；病毒性疾??；抗體檢測

近年來，部分規(guī)?；i場由于疫苗免疫不到位或免疫程序不合理，頻繁遭受多種病毒性疾病的侵襲，豬群健康狀況差，抗生素藥物用量大，但治療效果不佳，使豬場蒙受巨大經(jīng)濟損失，并帶來嚴重的食品安全隱患。如何制定科學合理的免疫程序保證豬群健康成為當下養(yǎng)殖場最迫切的需求。自2006年高致病性豬繁殖與呼吸綜合征（藍耳?。┍┌l(fā)以來，其一直是影響豬群健康的重要疾??；2011年豬偽狂犬病病毒變異毒株流行后，豬群的野毒感染率越來越高且臨床病例的發(fā)生愈演愈烈；豬瘟作為傳統(tǒng)病毒性疾病則一直在豬場疾病中扮演重要角色，常以非典型性豬瘟或豬瘟病毒的亞臨床感染形式危害豬群健康；感染率極高的豬2型圓環(huán)病毒病在豬群中的發(fā)病越發(fā)普遍，各類豬群均難以幸免。上述疫病作為免疫抑制性疾病常與其他病毒病或細菌病混合感染，使豬場疾病復雜化，使原發(fā)性疾病的臨床診斷更加困難，難以把握最佳防治時機，加重了豬病帶來的危害。所以加強對上述四種常見病毒性疾病的監(jiān)測與防控，對穩(wěn)定豬群健康生產(chǎn)和提高豬場生產(chǎn)成績有著十分重要的現(xiàn)實意義。本文就某疫情不穩(wěn)定的規(guī)?；i場各日齡階段豬群四種病毒病的免疫狀態(tài)進行檢測分析，并結合臨床發(fā)病情況和免疫背景對免疫程序進行調(diào)整優(yōu)化，改善了豬場主要病毒性疾病的免疫狀態(tài)，顯著降低了該場病毒性疾病的發(fā)生風險，保證了豬場的健康生產(chǎn)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

經(jīng)現(xiàn)場考察發(fā)現(xiàn)該豬場生產(chǎn)狀況極不穩(wěn)定，母豬群生產(chǎn)性能整體欠佳，因夏季高熱引發(fā)2%的母豬死亡，有流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、弱胎問題的母豬高達10%，且部分母豬同窩產(chǎn)床仔豬個體差異較大，弱仔比例較高，被毛粗亂，有的成為僵豬；發(fā)病最嚴重的則集中于產(chǎn)房哺乳仔豬和保育豬群，主要表現(xiàn)為發(fā)熱、腹瀉、關節(jié)腫大、跛行、咳嗽、氣喘及神經(jīng)癥狀等，其中腹瀉發(fā)病率高達60%、死亡率達10%；神經(jīng)癥狀發(fā)生率為5%、死亡率為2%；呼吸道癥狀發(fā)生率為20%、死亡率為2%；另外，育肥豬群呼吸系統(tǒng)疾病防控壓力大，咳嗽、氣喘比例較高。

該豬場后備母豬自165日齡開始間隔一周依次進行豬瘟、偽狂犬病、藍耳病、圓環(huán)病毒病疫苗的免疫，一月后各自加強免疫一次；懷孕母豬僅在懷孕80天時免疫豬瘟疫苗；哺乳及保育仔豬2日齡時偽狂犬病疫苗滴鼻免疫，間隔一周免疫藍耳病疫苗，27日齡時進行豬瘟首免，間隔一周藍耳病疫苗二免，60日齡豬瘟疫苗二免，70日齡偽狂犬病弱毒苗注射，98日齡再次免疫偽狂犬病疫苗。

通過前腔靜脈采血方法，對該豬場各日齡階段的豬群隨機采集血清85份，依次編號，及時分離血清，-20℃冷凍備檢。見表1。

表1 樣品采集類別及數(shù)目

1.2 試劑及設備

四種病毒抗體檢測所用試劑盒均由韓國金諾公司生產(chǎn)。高速離心機、震蕩儀，購自Eppendorf公司的各種規(guī)格移液器，96孔酶標儀等。

1.3 檢測方法

四種病毒檢測均按照說明書步驟嚴格規(guī)范操作。

1.4 判定標準

豬瘟病毒（CSFV）：阻斷率≥40%為陽性；阻斷率＜40%為陰性。

豬藍耳病病毒（PRRSV）：S/P值≥0.40為陽性；S/P值＜0.40為陰性。

豬偽狂犬病病毒gE（PRV gE）：S/N值≤0.6為陽性；S/N值＞0.6為陰性。

豬2型圓環(huán)病毒（PCV 2）：S/P值≥0.4為陽性；S/P值＜0.3為陰性，之間為可疑。

2 結果與分析

不同日齡階段豬群四種病毒抗體檢測結果見表2。由表2可知，后備母豬（待配）四種病毒抗體陽性率均達到100%，其中豬瘟抗體平均值達到88.07%，離散度達18.38%，說明豬瘟免疫效果較理想，僅兩頭豬抗體水平較低，需要加強免疫。藍耳病病毒抗體平均值為2.24，雖然離散度尚可，為20.92%，但據(jù)臨床母豬發(fā)病情況，可推測后備母豬群可能有藍耳病野毒感染，100%的抗體陽性率并非完全疫苗免疫產(chǎn)生。偽狂犬病gE抗體100%陽性率值得高度關注，表明后備母豬幾乎全群感染偽狂犬病野毒，這可能是造成母豬返情、流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等問題的主要原因。在疫苗免疫的情況下，2型圓環(huán)病毒抗體水平較好。

妊娠母豬豬瘟、2型圓環(huán)病毒病抗體陽性率均達100%，且離散度較低，除個別豬只豬瘟抗體水平低外，免疫效果較為理想。藍耳病抗體水平平均值較低，離散度過高，提示藍耳病病毒在妊娠母豬群中較為活躍，導致妊娠母豬群藍耳病感染壓力較大，出現(xiàn)妊娠母豬尤其是妊娠后期母豬流產(chǎn)及產(chǎn)木乃伊胎、死胎、弱胎比例增高，需注意妊娠母豬藍耳病的免疫與防控。盡管偽狂犬病疫苗免疫強度較大，但妊娠母豬群只有少部分豬只gE抗體呈陰性，80%呈gE抗體陽性，這是造成妊娠母豬群健康問題的重要因素，加強偽狂犬病疫苗的產(chǎn)前免疫甚為重要。2型圓環(huán)病毒病的抗體水平沿襲了后備母豬100%的陽性率，說明疫苗免疫效果較好。

保育豬群免疫狀況整體欠佳，豬瘟抗體陽性率僅為48%，且豬只抗體水平不整齊。分析其原因，一方面與母源抗體影響有關；另一方面，該階段豬群藍耳病及偽狂犬病gE抗體水平均不理想，可能與其他病毒感染或豬只體況差導致免疫失敗有關。另外，與疫苗有效抗原含量、疫苗保存及回溫是否得當、免疫部位是否準確等也不無關系。藍耳病抗體陽性率為84%，離散度較大，說明保育豬群藍耳病不穩(wěn)定。偽狂犬病gE抗體陽性率為72%，結合母豬及保育豬群發(fā)病情況，在排除母源抗體因素干擾下，說明保育豬群偽狂犬病野毒感染仍較普遍，是引發(fā)本階段豬只腹瀉和神經(jīng)癥狀的重要原因，由于母豬普遍存在偽狂犬病野毒感染，因而所產(chǎn)仔豬也難以幸免，對出生仔豬盡快完成滴鼻免疫并保障后續(xù)疫苗免疫的次數(shù)和質(zhì)量至關重要。2型圓環(huán)病毒病陽性率92%，免疫效果尚可，但仍有部分豬只在疫苗免疫后未產(chǎn)生相應的抗體，可能與該階段豬群感染其他病毒病導致豬只抵抗力下降，繼而造成小部分豬只健康狀況不穩(wěn)定。

從育肥豬病毒抗體檢測結果看，豬瘟經(jīng)過二次免疫，抗體水平較保育階段有大幅提升，但豬瘟抗體水平整齊度欠佳，需及時檢測和補免。藍耳病的陽性率與保育豬群幾乎持平，且離散度大為下降，說明疫苗免疫對生長豬群的防控起到了一定作用，但2.08的抗體平均值和34.73%的離散度也顯示出育肥豬群該病的不穩(wěn)定性。由于免疫強度的加大，育肥豬群偽狂犬病野毒的感染率下降到50%，雖然因野毒感染導致的死亡率有所下降，但半數(shù)育肥豬群的偽狂犬病野毒感染成為導致呼吸道問題的主要因素，偽狂犬病的免疫不能松懈。2型圓環(huán)病毒病的陽性率及抗體水平與保育豬群類似，說明圓環(huán)病毒的感染在育肥豬群已趨于穩(wěn)定，較其他病毒性疾病對豬群產(chǎn)生的危害處于次要地位，疫苗免疫功不可沒。

表2 不同日齡階段豬群血清抗體檢測結果

3 討論

抗體檢測結果證實該豬場各豬群均存在不同程度的偽狂犬病野毒和藍耳病病毒的感染現(xiàn)象，兩病是造成該豬場疫情不穩(wěn)定的主要原因，需重視對兩種病毒性疾病的免疫與防控。據(jù)檢測和疫病發(fā)生情況對免疫程序進行了如下優(yōu)化調(diào)整。

⑴出生仔豬進行偽狂犬病疫苗滴鼻，盡量出生當天完成，需保證使用水性稀釋液和專用霧化噴頭。懷孕母豬產(chǎn)前一月加強免疫一次偽狂犬病滅活疫苗。

⑵根據(jù)抗體檢測結果，將豬瘟和偽狂犬病疫苗二免時間在原有基礎上向前推移5天；豬瘟首免日齡不變，弱仔較多的圈舍進行豬瘟超免。

⑶后備母豬配種前45天，間隔一月完成兩次藍耳病疫苗免疫，出生仔豬藍耳病首免時間提至豬瘟首免前一周。

⑷仔豬階段免疫一次副豬嗜血桿菌病疫苗。

此外還加強了該場生物安全體系建設，逐步淘汰無生產(chǎn)價值的陽性種豬，通過實施以上防治措施，該場豬群逐步恢復穩(wěn)定生產(chǎn)。

S858.28

：A

：1673-4645(2017)02-0072-03

2016-12-09

陳同煜（1990-），男，碩士研究生，研究方向為動物臨床病理學，E-mail：chentongyu123@126.com

*通訊作者：劉思當（1961-），教授，博士生導師，主要研究方向為動物臨床病理學及獸藥毒理學，E-mail：liusid@sdau.edu.cn