閆海霞+蔣月喜+何荊洲

摘要：為研究蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響因子，優(yōu)化蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)基，從品種、叢植芽、接種量、頂端優(yōu)勢(shì)4個(gè)因子進(jìn)行研究分析。結(jié)果表明：4個(gè)品種對(duì)增殖培養(yǎng)的影響不具有選擇性；叢植芽（株/叢）數(shù)為2、3、4時(shí)，有利于蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)；在一定容積的容器中，不同品種的接種密度不同，V31適宜的接種密度為2叢，每叢2株或4株；火鳳凰適宜接種密度為2叢，每叢4株；鉅寶紅玫瑰和閃電的適宜接種密度為4叢，每叢為3株。以莖段為接種部位，較有利于蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)。

關(guān)鍵詞：蝴蝶蘭；群聚效應(yīng)；增殖；接種密度

中圖分類號(hào)： S682.2+90.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2016）11-0216-03

蝴蝶蘭（Phalaenopsis spp.）屬蘭科蝴蝶蘭屬，原產(chǎn)于菲律賓、印尼以及我國(guó)臺(tái)灣等地，有“蘭花皇后”的美譽(yù)[1]。近年來(lái)，蝴蝶蘭作為中高檔花卉在年宵花市場(chǎng)上占據(jù)了主導(dǎo)地位，市場(chǎng)需求大。蝴蝶蘭可采用分株繁殖，但繁殖系數(shù)低、速度慢，無(wú)法滿足商品化生產(chǎn)的要求，而利用組培快繁技術(shù)則可在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的優(yōu)質(zhì)種苗，也避免了變異植株的產(chǎn)生。組培快繁作為蝴蝶蘭工廠化生產(chǎn)的最有效手段，影響因子很多，其中培養(yǎng)物的接種量就與其器官分化和生長(zhǎng)有著密切的關(guān)系。接種量過(guò)多，會(huì)導(dǎo)致生物體無(wú)法充分吸收到所需的營(yíng)養(yǎng)成分；但接種量過(guò)少，浪費(fèi)資源和空間，不符合工廠化生產(chǎn)的要求[2]。因此，適宜的接種量是組培快繁中調(diào)節(jié)器官形成和生長(zhǎng)的重要因素之一，接種密度過(guò)大過(guò)小對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)都不利。相關(guān)研究在馬鈴薯[3]、卡特蘭[4]、三七[5]、人參[6]等植物中有過(guò)報(bào)道。蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的研究雖然很多，尤其是培養(yǎng)基的激素組合以及濃度選擇上[7-10]，但是關(guān)于接種密度對(duì)增殖培養(yǎng)的影響研究極少。僅有于亞軍等進(jìn)行了相關(guān)研究，其結(jié)果表明：適當(dāng)加大接種密度（20～25個(gè)原球莖/75 cm2培養(yǎng)基質(zhì)面積），有利于提高增殖效率[11]。實(shí)際上，在養(yǎng)花實(shí)踐中，蘭花具有喜群居惡獨(dú)居的特性，這種群居性的生物學(xué)特性，在同一個(gè)培養(yǎng)空間內(nèi)能夠促進(jìn)彼此的生長(zhǎng)發(fā)育，我們稱這種群居的特性為群聚效應(yīng)。關(guān)于蝴蝶蘭群聚效應(yīng)研究極少，本研究主要研究品種以及接種密度對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響，篩選出有利于提高蝴蝶蘭增殖系數(shù)的接種密度，為蝴蝶蘭工廠化生產(chǎn)提供技術(shù)支持和參考。

1 材料與方法

1.1 材料

供試蝴蝶蘭品種為閃電、鉅寶紅玫瑰、V31、火鳳凰，取其無(wú)菌苗為試驗(yàn)材料。

1.2 方法

1.2.1 品種對(duì)增殖培養(yǎng)的影響 以不同品種的蝴蝶蘭組培苗，在240 mL的組培瓶（高度×直徑×口徑=90 mm×68 mm×62 mm）中接種10個(gè)單株莖段，每個(gè)處理重復(fù)10次。培養(yǎng)45 d后，觀察并分析品種對(duì)增殖培養(yǎng)的影響。

1.2.2 群聚效應(yīng)對(duì)增殖培養(yǎng)的影響

1.2.2.1 叢植芽對(duì)蝴蝶蘭增殖影響 將蝴蝶蘭芽分為1、2、3、4株/叢，在240 mL的組培瓶中接種1叢，每個(gè)處理重復(fù)10次。培養(yǎng)45 d后，觀察并分析叢植芽數(shù)量對(duì)增殖培養(yǎng)的影響。

1.2.2.2 接種量對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響 將蝴蝶蘭芽分為2、3、4株/叢，在240 mL的組培瓶中接種2、3、4叢，每個(gè)處理重復(fù)10次。培養(yǎng)45 d后，觀察并分析不同接種量對(duì)增殖培養(yǎng)的影響。

1.2.3 接種部位對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響 將閃電、鉅寶紅玫瑰、V31、火鳳凰的無(wú)菌苗，分別選取2種部位：莖段和莖尖，分別接種在240 mL的組培瓶中，每瓶接種3叢，叢植芽數(shù)為5株/叢，每個(gè)處理重復(fù)10次。培養(yǎng)45 d后，觀察并分析莖段和莖尖對(duì)增殖培養(yǎng)的影響。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行差異顯著性測(cè)驗(yàn)，并采用Duncans 多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 品種對(duì)增殖培養(yǎng)的影響

通過(guò)表1分析可知，就增殖率而言，4個(gè)品種中，V31、火鳳凰、閃電之間增殖率無(wú)顯著差異，僅鉅寶紅玫瑰增殖率有顯著差異，鉅寶紅玫瑰的增殖率最低，僅有40%。對(duì)于增殖系數(shù)來(lái)說(shuō)，4個(gè)品種間無(wú)顯著差異。這表明，不同品種的增殖率是有差異顯著，V31、火鳳凰、閃電3個(gè)品種無(wú)顯著差異，與鉅寶紅玫瑰有顯著差異，但是這種差異并不影響蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)，可見(jiàn)不同品種對(duì)蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)不具有選擇性。

2.2 群聚效應(yīng)對(duì)增殖培養(yǎng)的影響

2.2.1 叢植芽對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響 由表2可見(jiàn)，不同品種的叢植芽數(shù)量對(duì)蝴蝶蘭的增殖系數(shù)影響略有差異。當(dāng)叢植芽為1、2、3、4株/叢時(shí)，4個(gè)品種的增殖系數(shù)的之間無(wú)顯著差異。但方差分析表明，當(dāng)接種的叢植芽數(shù)量為1株/叢時(shí)，顯著低于叢植芽為2、3、4株/叢時(shí)4個(gè)品種的增殖系數(shù)，此時(shí)增殖系數(shù)極低，不利于增殖的目的；雖然當(dāng)接種的叢植芽數(shù)量為2、3、4株/叢時(shí)，3種處理之間無(wú)顯著差異，但增殖系數(shù)明顯提高，這是符合組培快繁目的的。綜上分析可知，當(dāng)叢植芽數(shù)量為2、3、4株/叢時(shí)，有利于4種蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)。

2.2.2 接種量對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響 不同的接種密度處理對(duì)V31增殖培養(yǎng)的影響結(jié)果（表3）表明：9個(gè)處理增殖率不存在顯著差異，但對(duì)增殖系數(shù)的影響略有差異。其中，處理1、2、3和處理7、9之間存在顯著差異，但處理7、9的增殖系數(shù)大于處理1、2、3的增殖系數(shù)，這表明處理7和9對(duì)V31的增殖培養(yǎng)更有利。由此可知，V31采用接種量為2叢，每叢叢植芽數(shù)為2、4株/叢對(duì)其增殖培養(yǎng)有較好的效果。

不同接種密度處理對(duì)火鳳凰增殖培養(yǎng)的影響結(jié)果（表4）表明：9個(gè)處理增殖率不存在顯著差異，但對(duì)增殖系數(shù)的影響略有差異。其中，處理1和處理9之間存在顯著差異，但處理9的增殖系數(shù)大于處理1的增殖系數(shù)，這表明處理9對(duì)火鳳凰的增殖培養(yǎng)更有利。由此可知火鳳凰采用接種量為2叢，每叢叢植芽數(shù)為4株對(duì)其增殖培養(yǎng)有較好的效果。

不同的接種密度處理對(duì)鉅寶紅玫瑰增殖培養(yǎng)的影響結(jié)果（表5）表明：9個(gè)處理增殖率不存在顯著差異，但對(duì)增殖系數(shù)的影響略有差異。其中，處理2和處理4、5、7、8之間存在顯著差異，但處理2的增殖系數(shù)大于其余4個(gè)處理的增殖系數(shù)，這表明處理2對(duì)鉅寶紅玫瑰的增殖培養(yǎng)更有利。由此可知鉅寶紅玫瑰采用接種量為4叢，每叢叢植芽數(shù)為3株對(duì)其增殖培養(yǎng)有較好的效果。

不同的接種密度處理對(duì)閃電增殖培養(yǎng)的影響結(jié)果（表6）表明：9個(gè)處理增殖率不存在顯著差異，但對(duì)增殖系數(shù)的影響略有差異。其中，處理2和處理1、4、7、8之間存在差異顯著，但處理2的增殖系數(shù)大于其余4個(gè)處理的增殖系數(shù)，這表明處理2對(duì)閃電的增殖培養(yǎng)更有利。由此可知閃電采用接種量為4叢，每叢叢植芽數(shù)為3株對(duì)其增殖培養(yǎng)有較好的效果。

2.3 接種部位對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響

由表7可知，莖段和莖尖對(duì)發(fā)生增殖數(shù)、增殖率、增殖數(shù)、增殖系數(shù)的影響差異顯著，而品種對(duì)發(fā)生增殖數(shù)、增殖率、增殖數(shù)、增殖系數(shù)的影響無(wú)顯著差異。這表明，蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)不因品種不同而產(chǎn)生差異，但是不同的接種部位對(duì)蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)有不同的影響，當(dāng)以接種莖段為主時(shí)，發(fā)生增殖數(shù)、增殖率、增殖數(shù)、增殖系數(shù)都處于一個(gè)較高的數(shù)值水平，其中增殖率最高為100%，最高增殖系數(shù)是4.53；而當(dāng)以接種莖尖為主時(shí)，發(fā)生增殖數(shù)、增殖率、增殖數(shù)、增殖系數(shù)都處于一個(gè)較低的數(shù)值水平，其中增殖率最高為60%，最高增殖系數(shù)是1.47。由此可見(jiàn)，以莖段為接種部位，較有利于蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)。

3 討論與結(jié)論

3.1 群聚效應(yīng)對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響

在蘭花的栽培上，通常是將3株以上的蘭花種植在一起，這樣有利于蘭花的生長(zhǎng)，這是蘭花的群居性。蝴蝶蘭的商品化栽培雖然采用單株栽培的方式，但蝴蝶蘭也是具有群居性的，尤其是蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)中，這種群聚的作用較明顯。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)：當(dāng)叢植芽數(shù)量為1株/叢時(shí)，其增殖系數(shù)顯著低于叢植芽數(shù)量為2、3、4株/叢時(shí)。可見(jiàn)，接種的叢植芽數(shù)量對(duì)增殖有顯著影響，單株為1叢接種時(shí)，增殖系數(shù)低，叢植芽為2、3、4株為1叢時(shí)，能顯著提高其增殖系數(shù)，有利于增殖培養(yǎng)。這和崔秋華等的研究結(jié)果[12]相一致。在蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)過(guò)程中，新芽的形成與發(fā)育受多種因素的影響，其中接種密度是影響因子之一。依據(jù)植物種類（品種）、培養(yǎng)容器容積本試驗(yàn)4個(gè)品種的適宜接種密度分別為：在240 mL的組培瓶中，V31采用接種量為2叢，每叢叢植芽數(shù)為2、4株；火鳳凰的接種量為2叢，每叢叢植芽數(shù)為4株；鉅寶紅玫瑰接種量為4叢，每叢叢植芽數(shù)為3株；閃電接種量為4叢，每叢叢植芽數(shù)為3株。此外還受培養(yǎng)方式的不同而不同，李旭等以浸沒(méi)培養(yǎng)的方式，研究了10、20、30 g這3種接種量對(duì)大花蕙蘭原球莖增殖生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，大花蕙蘭原球莖在接種量為20 g時(shí)，增殖系數(shù)最大，增殖較快，生長(zhǎng)最好[2]。

3.2 接種部位對(duì)蝴蝶蘭增殖培養(yǎng)的影響

本試驗(yàn)選取莖尖和莖段2個(gè)接種部位來(lái)研究其對(duì)增殖培養(yǎng)的影響，是基于頂端優(yōu)勢(shì)的理論進(jìn)行的。頂端優(yōu)勢(shì)指頂芽?jī)?yōu)先生長(zhǎng)，抑制側(cè)芽發(fā)育的現(xiàn)象。本研究得出：莖段為接種部位，較有利于蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)。主要原因：莖段相當(dāng)于是破除頂端優(yōu)勢(shì)的植株，而莖尖則為保留頂端優(yōu)勢(shì)的植株，莖尖自身具有抑制側(cè)芽生長(zhǎng)的特性，因此蝴蝶蘭采用莖尖進(jìn)行增殖培養(yǎng)的效果不如莖段。

綜上所述，4個(gè)品種對(duì)增殖培養(yǎng)的影響不具有選擇性；叢植芽數(shù)為2、3、4株/叢時(shí)，有利于蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)；在一定容積的容器中，不同品種的接種密度不同，V31適宜的接種密度為2叢，每叢2株或4株；火鳳凰適宜的接種密度為2叢，每叢4株；鉅寶紅玫瑰和閃電適宜的接種密度為4叢，每叢為3株。以莖段為接種部位，較有利于蝴蝶蘭的增殖培養(yǎng)。

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