亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        鈉離子對洋蔥細胞程序性死亡的誘導(dǎo)

        2017-03-21 23:49:35趙錦慧周琳
        江蘇農(nóng)業(yè)科學 2016年11期
        關(guān)鍵詞:鈉離子丙二醛洋蔥

        趙錦慧+周琳

        摘要:對洋蔥進行活化培養(yǎng),探討鈉離子不同誘導(dǎo)濃度與時間對洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細胞程序性死亡的影響。結(jié)果表明:隨著鈉離子誘導(dǎo)濃度的升高及誘導(dǎo)時間的延長,細胞形狀和結(jié)構(gòu)均會發(fā)生不同程度的變化,細胞凋亡數(shù)目增加,細胞中丙二醛含量上升,且細胞凋亡率及丙二醛含量在不同處理間均差異顯著。說明鈉離子在一定誘導(dǎo)濃度與時間下,對洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、細胞凋亡率、丙二醛含量均有不同程度的影響。

        關(guān)鍵詞:鈉離子;洋蔥;細胞程序性死亡;細胞凋亡率;丙二醛

        中圖分類號: Q942 文獻標志碼: A

        文章編號:1002-1302(2016)11-0189-02

        20世紀90年代初國際上才把細胞程序性死亡(PCD)概念引入到植物學,隨后有關(guān)研究遍布植物發(fā)育生物學、植物生理學等各個領(lǐng)域[1-5]。PCD和細胞凋亡意義相同,均屬于細胞生理性死亡,它貫穿高等植物生長發(fā)育的一生,具有重要的生命意義。

        中國每年的農(nóng)作物和瓜果蔬菜都會受到各種逆境因子不同程度的影響,因此對植物的抗逆性機制及調(diào)控進行研究,既有理論意義又有實際應(yīng)用價值。鹽脅迫是植物經(jīng)常遇到的逆境之一,Katsuhara研究發(fā)現(xiàn)鹽脅迫誘導(dǎo)的大麥根部細胞凋亡表現(xiàn)出典型的凋亡特征[6],揭示了根部細胞凋亡可能是植物抗鹽脅迫的一種生理機制。本試驗選用洋蔥鱗莖內(nèi)表皮作為材料,對鈉離子不同誘導(dǎo)濃度及誘導(dǎo)時間下洋蔥細胞程序性死亡現(xiàn)象進行研究,主要觀察凋亡細胞在形態(tài)學上發(fā)生的變化,并統(tǒng)計細胞凋亡率及測定細胞中丙二醛含量。旨在探索鈉離子不同處理濃度及處理時間誘導(dǎo)洋蔥細胞程序性死亡的效果。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        市售隔年洋蔥。

        1.2 試劑

        0.1、0.3、0.5、0.7 mol/L氯化鈉溶液、PBS緩沖液、改良苯酚品紅染液、10%三氯乙酸、0.6%硫代巴比妥酸等。

        1.3 試驗方法

        1.3.1 洋蔥的預(yù)處理 取隔年洋蔥,室溫下于清水中培養(yǎng) 2~3 d,每天換水,直到露出幼嫩的白根,表明洋蔥已被活化。

        1.3.2 細胞程序性死亡觀察 取活化后的洋蔥鱗莖,切取約1 cm2的內(nèi)表皮若干,分成3組進行處理。第1組是正對照,在PBS緩沖液中處理1 h;第2組是鈉離子誘導(dǎo)組,分別用0.1、0.3、0.5、0.7 mol/L NaCl誘導(dǎo)1、4 h;第3組是負對照,在沸水中處理5 min。各組處理結(jié)束后,將洋蔥鱗莖內(nèi)表皮用改良苯酚品紅染液染色10~15 min,染色完成后制成玻片標本,光學顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化。選擇染色效果好、背景干凈、細胞分散良好的視野進行拍照,并對凋亡細胞進行計數(shù)統(tǒng)計。細胞凋亡率=凋亡細胞數(shù)/視野中觀察的細胞總數(shù)×100%。每個處理觀察3個玻片標本,細胞凋亡率用3個視野統(tǒng)計的平均值表示。

        1.3.3 丙二醛(MDA)含量的測定 參照劉萍等的方法[7],用硫代巴比妥酸法測定細胞中丙二醛(MDA)含量,測定時設(shè)置3個重復(fù),最終含量用平均值表示。

        1.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 采用Excel 2003對實驗數(shù)據(jù)進行作圖,運用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件,在95%水平上進行One-Way ANOVA分析處理間差異顯著性。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 對照組細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察

        圖1顯示,正對照組細胞輪廓清晰,細胞之間的界限分明,細胞膜完整無損,細胞質(zhì)透明,背景干凈,細胞核呈球形。負對照組細胞輪廓及細胞之間的界限消失,細胞膜、細胞壁完全裂解,部分細胞核也發(fā)生裂解并且其形狀和位置均發(fā)生一定變化,細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)碎末狀物質(zhì),背景不干凈,細胞不能保持結(jié)構(gòu)的完整。

        2.2 不同濃度鈉離子誘導(dǎo)1 h后細胞程序性死亡觀察

        圖2顯示,不同濃度Na+誘導(dǎo)1 h后,隨著Na+濃度的增加,細胞輪廓及細胞之間的界限逐漸模糊,質(zhì)壁分離程度加深,形狀及位置發(fā)生變化的細胞核增多,細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)的碎末狀或塊狀物質(zhì)越來越多,細胞背景不干凈。

        2.3 不同濃度鈉離子誘導(dǎo)4 h后細胞程序性死亡觀察

        圖3顯示,不同濃度Na+誘導(dǎo)4 h后,細胞形態(tài)特征發(fā)生了更明顯的變化,部分細胞的細胞膜已經(jīng)破裂,細胞核輪廓模糊,著色變淺,細胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象更明顯,細胞質(zhì)內(nèi)塊狀或碎末狀物質(zhì)更多,細胞背景極不干凈。

        2.4 不同濃度鈉離子誘導(dǎo)下洋蔥內(nèi)表皮細胞凋亡情況

        圖4顯示,隨著Na+誘導(dǎo)濃度的增加及誘導(dǎo)時間的延長,細胞凋亡率呈上升趨勢,并且各處理間差異顯著。這說明不同濃度的Na+誘導(dǎo)不同時間對細胞的生命活動產(chǎn)生了不同程度的影響。

        2.5 不同處理下洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細胞中丙二醛(MDA)含量的變化

        MDA是脂質(zhì)過氧化物的代謝產(chǎn)物,其生物活性強,化學性質(zhì)穩(wěn)定,它的含量可以間接反映氧自由基對植物細胞的損傷程度。圖5顯示,Na+誘導(dǎo)組丙二醛含量均高于正對照組,并且A3~A9與A1間均表現(xiàn)出顯著差異。同樣誘導(dǎo)濃度下,隨著誘導(dǎo)時間的延長,MDA含量快速增加;同樣誘導(dǎo)時間下,隨著誘導(dǎo)濃度的增加,誘導(dǎo)時間短時MDA含量增加幅度小,誘導(dǎo)時間長時MDA含量增加幅度大。這說明一定濃度的Na+作用一定時間,會對植物細胞造成明顯傷害,并且Na+誘導(dǎo)時間對丙二醛的產(chǎn)生影響更大。

        3 結(jié)論與討論

        本研究結(jié)果表明,正對照組細胞輪廓清晰,形態(tài)正常,結(jié)構(gòu)完整;負對照組細胞輪廓消失,形態(tài)和結(jié)構(gòu)均發(fā)生明顯變化,細胞不能保持完整;Na+誘導(dǎo)組細胞輪廓發(fā)生變化,細胞質(zhì)壁出現(xiàn)不同程度的分離,細胞核、細胞質(zhì)、細胞膜等細胞結(jié)構(gòu)發(fā)生不同程度的變化,Na+誘導(dǎo)濃度和時間與細胞凋亡率及細胞中丙二醛含量成正比。

        NaCl之所以能夠誘導(dǎo)細胞程序性死亡,其可能機制是:(1)細胞程序性死亡需要大量的ATP,而線粒體是能不斷產(chǎn)生ATP的一種重要的細胞器,位于線粒體外膜上的受體可以被NaCl刺激,導(dǎo)致膜通透性孔不斷保持開放狀態(tài),最終使得線粒體的膜通透性增強,使細胞色素C、一些凋亡誘導(dǎo)因子等被釋放,從而加快細胞程序性死亡。(2)Na+濃度升高時,膜質(zhì)過氧化物會在細胞內(nèi)形成,這會破壞細胞膜上鈣離子與鈉離子的相對平衡狀態(tài),造成細胞膜上的Ca2+被Na+替換掉,從而改變Ca2+的流向,使得Ca2+由細胞內(nèi)向細胞外流動,最終導(dǎo)致細胞膜的透性增強,使細胞內(nèi)的某些凋亡誘導(dǎo)因子等物質(zhì)被釋放,進而加快細胞程序性死亡。(3)Na+濃度越高,細胞發(fā)生質(zhì)壁分離的程度越高, 達到一定程度后會導(dǎo)致細胞內(nèi)液泡裂解,然后液泡中的酸性水解酶等就會被釋放出來,它的釋放可以使細胞內(nèi)的細胞核、高爾基體、核糖體、細胞膜、線粒體等被分解,細胞結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯改變后誘發(fā)了細胞程序性死亡的發(fā)生[7-9]。

        目前對PCD有關(guān)的基因、PCD 的調(diào)節(jié)途徑、各信號分子的調(diào)節(jié)機理以及信號分子之間的關(guān)系等均獲得了一些了解。但是對洋蔥內(nèi)表皮細胞發(fā)生PCD時,相關(guān)酶和蛋白質(zhì)之間是怎樣聯(lián)系并發(fā)揮作用的還有待進一步研究。

        參考文獻:

        [1]Greenberg J T,Guo A,Klessig D F,et al. Programmed cell death in plants:a pathogen-triggered response activated coordinately with multiple defense functions[J]. Cell,1994,77:551-563.

        [2]Mccabe P F,Levine A,Mejjer P J,et al. A programmed cell death pathway activated in carrot cell cultured at low cell density[J]. Plant J,1997,12:267-280.

        [3]Pennell R I,Lamb C. Programmed cell death in plants[J]. Plant Cell,1997,9:1157-1168.

        [4]Yen C H,Yang C H. Evidence for programmed cell death during leaf senescence in plants[J]. Plant Cell Physiol,1998,39:922-927.

        [5]Xu Y,Hanson M R. Programmed cell death during pollination-induced petal senescence in petunia[J]. Plant Physiol,2000,122:1323-1333.

        [6]Katsuhara M. Apoptosis-like cell death in barley roots under salt stress[J]. Plant Cell Physiol,1997,38:1091-1093.

        [7]劉 萍,李明軍. 植物生理學實驗技術(shù)[M]. 北京:科學出版社,2007:150-152.

        [8]肖 軍,高 杰. 高等植物細胞凋亡的誘因及生物學意義[J]. 山東農(nóng)業(yè)大學學報,2008,39(1):125-128.

        [9]李云霞,程曉霞,代小梅,等. 植物在逆境脅迫中的細胞程序性死亡[J]. 生物技術(shù)通報,2009(4):7-11.

        猜你喜歡
        鈉離子丙二醛洋蔥
        SWAN在線鈉離子分析儀的使用及維護研究
        不同施肥對岷山紅三葉中丙二醛(MDA)含量的影響
        洋蔥寫檢討
        切洋蔥
        鈉離子通道與慢性心力衰竭
        鈉離子電池負極材料研究進展
        剝開心的洋蔥
        還原氧化石墨烯/TiO2復(fù)合材料在鈉離子電池中的電化學性能
        丙二醛對離體草魚腸道黏膜細胞的損傷作用
        油炸食品還能吃嗎?
        八小時以外(2014年2期)2014-04-29 00:44:03
        粉嫩国产av一区二区三区| 久久无码一一区| 久久精品国产久精国产69| 五月婷婷丁香视频在线观看| 久久精品国产免费观看三人同眠 | 国产a v无码专区亚洲av| 亚洲欧美日韩精品久久亚洲区色播 | 99久久无色码中文字幕人妻蜜柚 | 国产精品国产亚洲精品看不卡 | 色婷婷五月综合激情中文字幕| 日韩在线一区二区三区免费视频 | 国产黑丝美女办公室激情啪啪| 乱色精品无码一区二区国产盗 | 射进去av一区二区三区| 韩国三级在线观看久| 国产精品无套内射迪丽热巴| 特级毛片全部免费播放a一级 | 8ⅹ8x擦拨擦拨成人免费视频| 91美女片黄在线观看| 国产精女同一区二区三区久| 极品少妇hdxx麻豆hdxx| 国产成人精品一区二区视频| 91精品国产无码在线观看| 中文字幕日韩有码国产| 18禁无遮拦无码国产在线播放| 无码不卡高清毛片免费| 东京道一本热码加勒比小泽| 亚洲日本精品国产一区二区三区| 久激情内射婷内射蜜桃| 无码午夜剧场| 丝袜美腿亚洲综合一区| 日本大乳高潮视频在线观看| 精品少妇一区二区三区视频| 一区二区三区四区在线观看视频| 亚洲av不卡免费在线| 老熟女重囗味hdxx70星空| 国产av一区二区三区丝袜| 国产黄色一区二区在线看| s级爆乳玩具酱国产vip皮裤| 亚洲男人的天堂精品一区二区| 在线小黄片视频免费播放|