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        中藥茅蒼術(shù)研究進(jìn)展

        2017-03-21 14:41:56戴紅君程金花虞德容
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年11期
        關(guān)鍵詞:遺傳多樣性生物學(xué)

        戴紅君+程金花+虞德容

        摘要:茅蒼術(shù)是江蘇省鎮(zhèn)江市茅山地區(qū)的道地藥材,中醫(yī)臨床使用歷史悠久。近年來(lái)由于其優(yōu)良種質(zhì)資源的瀕危、過(guò)度開(kāi)墾、生存環(huán)境遭到破壞,茅蒼術(shù)野生資源日益枯竭,受到廣泛關(guān)注。本文對(duì)茅蒼術(shù)的品種資源、遺傳多樣性、生物學(xué)、理化特性、育種、栽培管理、藥理藥性等方面的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展作簡(jiǎn)要綜述,以期為茅蒼術(shù)的資源保護(hù)、合理栽培、應(yīng)用提供依據(jù)。

        關(guān)鍵詞:茅蒼術(shù);品種資源;遺傳多樣性;生物學(xué);理化特性;藥理藥性

        中圖分類號(hào): R282.71 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

        文章編號(hào):1002-1302(2016)11-0026-03

        茅蒼術(shù)[Atractylodes lancea (Thunb.) DC.]系菊科蒼術(shù)屬多年生草本植物,根狀莖作蒼術(shù)入藥。因主產(chǎn)于江蘇省鎮(zhèn)江市茅山山脈一帶,且集散于江蘇省南京市,因此其別稱南蒼術(shù)、茅術(shù)、京蒼術(shù)。國(guó)內(nèi)外關(guān)于茅蒼術(shù)的研究主要涉及品種資源與遺傳多樣性、生物學(xué)與理化特性、育種與栽培管理、藥理藥性等方面。本文綜述了茅蒼術(shù)的品種資源、遺傳多樣性、生物學(xué)、理化特性、育種、栽培管理和藥理藥性等方面的研究進(jìn)展,以期為茅蒼術(shù)的資源保護(hù)、合理栽培和應(yīng)用提供依據(jù)。

        1 茅蒼術(shù)品種資源與遺傳多樣性

        1.1 品種資源

        據(jù)《本草圖經(jīng)》《本草綱目》等記載,茅山地區(qū)是茅蒼術(shù)的道地產(chǎn)地,但茅蒼術(shù)在中國(guó)分布廣泛,主產(chǎn)于江蘇、浙江、山東、江西、廣東、安徽、湖北、四川等地區(qū)[1-2]。有學(xué)者采用野外調(diào)查、遙感影像、典型取樣的方法對(duì)茅山、大別山等地區(qū)的茅蒼術(shù)種質(zhì)資源分布情況進(jìn)行了調(diào)查研究。例如,孫宇章等利用遙感技術(shù)對(duì)茅山地區(qū)野生中藥茅蒼術(shù)的資源進(jìn)行了監(jiān)測(cè)[3];居學(xué)鋒等對(duì)湖北省羅田縣野生茅蒼術(shù)垂直分布進(jìn)行了調(diào)查[4]。在種質(zhì)資源保護(hù)方面,國(guó)內(nèi)主要采用人工輔助授粉、人工補(bǔ)種、組織快繁等技術(shù)或手段來(lái)保存或擴(kuò)繁瀕危的品種或種群。

        不同品種或產(chǎn)地的茅蒼術(shù)植物形態(tài)、生長(zhǎng)特性、化學(xué)成分存在很大差異。Sang等對(duì)鎮(zhèn)江市4種葉型(尖葉型、長(zhǎng)橢圓葉型、橢圓葉型、鋸齒葉型)茅蒼術(shù)的生長(zhǎng)情況進(jìn)行比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)鋸齒葉型茅蒼術(shù)的生長(zhǎng)情況最好[5]。鄧哲等對(duì)茅蒼術(shù)5種典型類型的形態(tài)進(jìn)行了研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)圓裂葉類型的所有性狀均較高[6]。朱耕新等研究發(fā)現(xiàn),茅蒼術(shù)栽培品含油率顯著低于野生品[7]。胡世林等對(duì)5個(gè)產(chǎn)地茅蒼術(shù)的植物形態(tài)多樣性、揮發(fā)油含量和化學(xué)組分、揮發(fā)油的抑菌作用進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)茅蒼術(shù)是一個(gè)受地理環(huán)境影響很大的復(fù)合體,其揮發(fā)油成分和抗菌作用因產(chǎn)地不同而有顯著差別[8]。朱曉琴等分別開(kāi)展了不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)藥材化學(xué)成分、茅蒼術(shù)揮發(fā)油特征性成分分析,茅蒼術(shù)水溶性成分的HPLC指紋圖譜研究以及茅蒼術(shù)藥材無(wú)機(jī)元素測(cè)定及分析研究[9-12]。

        1.2 遺傳多樣性

        在遺傳多樣性與遺傳變異分析方面,國(guó)內(nèi)外學(xué)者分別采用染色體與核型分析技術(shù),隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)(RAPD)、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)(RFLP)、ISSR、核糖體DNA、葉綠體DNA等分子標(biāo)記,分析蒼術(shù)屬不同蒼術(shù)群體、不同地區(qū)茅蒼術(shù)亞群體等的遺傳多樣性和遺傳變異[13-17]。郭建林等采用RAPD標(biāo)記技術(shù)對(duì)分布于江蘇省小九華山、小湯山、湖山,安徽省金寨縣、蕪湖市以及湖北省??悼h、英山縣的7個(gè)南蒼術(shù)野生居群的 28個(gè) 單株基因組總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,在此基礎(chǔ)上分析居群的遺傳多樣性及遺傳分化,并采用聚類分析法對(duì)居群的遺傳關(guān)系進(jìn)行分析[15]。許夢(mèng)云等結(jié)合遺傳多樣性分析結(jié)果、化學(xué)成分分析結(jié)果,應(yīng)用Within-group linkage等聚類法對(duì)不同群體進(jìn)行系統(tǒng)聚類,構(gòu)建蒼術(shù)屬不同種的遺傳發(fā)生樹(shù)[16]。劉群等開(kāi)展茅蒼術(shù)功能基因(如HMGR)的克隆與序列分析,為后續(xù)功能基因定位與利用提供基礎(chǔ)[18]。在遺傳選育方面,國(guó)外已有根據(jù)茅蒼術(shù)光合特征、葉綠素?zé)晒鈪?shù)等生物學(xué)特征選育出茅蒼術(shù)優(yōu)良品系的報(bào)道[19]。

        2 茅蒼術(shù)生物學(xué)與理化特性

        在茅蒼術(shù)生物學(xué)與理化特性方面,國(guó)內(nèi)外學(xué)者結(jié)合高效液相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜、紫外分光光度法等化學(xué)分析技術(shù)比較不同產(chǎn)地群體、不同栽培或育苗方式、引種栽培與道地生長(zhǎng)等條件下茅蒼術(shù)的植物形態(tài)、藥材性狀、組織特征、常規(guī)化學(xué)成分、揮發(fā)油成分等[20-22],以及茅蒼術(shù)不同組織部位和不同發(fā)育階段揮發(fā)油類組成和含量的動(dòng)態(tài)變化[23];分析不同溫度、光照度、水分脅迫、pH值、營(yíng)養(yǎng)水平等外源條件和接種內(nèi)生菌,添加一氧化氮、過(guò)氧化氫、cPTIO、DPI/CAT、反式肉桂酸等外源物質(zhì)對(duì)茅蒼術(shù)植株代謝、揮發(fā)油成分與含量變化、根莖生長(zhǎng)、關(guān)鍵酶活性、根部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累和根部微生物種群變化的影響[24-30],并對(duì)接種內(nèi)生菌與添加外源物質(zhì)之間的競(jìng)爭(zhēng)與互作作用進(jìn)行分析。

        國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究較多的是茅蒼術(shù)化學(xué)成分與結(jié)構(gòu)分析,主要采用超臨界CO2萃取法、真空間歇精餾法、毛細(xì)管氣相色譜法、頂層固相萃取法、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC/MS)、GC/MS 結(jié)合直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法(HELP)、高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜質(zhì)譜法(LC/MS)、高效薄層色譜法(HPTLC)以及核磁共振法(NMR)提取茅蒼術(shù)揮發(fā)油或某一單體成分,分析揮發(fā)油組成及定量,解析揮發(fā)油單體結(jié)構(gòu)等[31-36]。也有少量茅蒼術(shù)多糖提取工藝[37-38],利用ICP-MS電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測(cè)定茅蒼術(shù)中無(wú)機(jī)元素[12],采用水蒸氣蒸餾法與氣相色譜質(zhì)譜(GC-MS)技術(shù)提取茅蒼術(shù)油類中揮發(fā)性香味物質(zhì)等的報(bào)道。茅蒼術(shù)的主要有效成分為倍半萜類和聚乙炔類兩大類成分,前者主要為β-桉葉醇,后者主要為蒼術(shù)素,其有效成分還有蒼術(shù)酮、茅術(shù)醇等。

        3 茅蒼術(shù)育種與栽培管理

        3.1 育種

        國(guó)內(nèi)有學(xué)者研究了種子處理(浸種時(shí)間、溫度)和接種內(nèi)生真菌[39]、覆蓋不同覆蓋物(稻草、枯落松針)等外源因素[40]對(duì)茅蒼術(shù)種子發(fā)芽率、幼苗生長(zhǎng)的影響。王坤等研究發(fā)現(xiàn),以灌根的方式給予木醋液,可以促進(jìn)茅蒼術(shù)的生長(zhǎng)發(fā)育[41]。汪文杰等研究發(fā)現(xiàn),海拔高度500 m左右產(chǎn)地的茅蒼術(shù)結(jié)實(shí)率和種子質(zhì)量明顯較高[42]。

        現(xiàn)有茅蒼術(shù)組織快繁方面的研究集中在組培部位的篩選(葉片、根莖、葉柄等)、培養(yǎng)基優(yōu)化、脫毒處理、溫度和時(shí)間控制等關(guān)鍵技術(shù)上,通過(guò)這些研究建立茅蒼術(shù)組培快繁和再生技術(shù)體系,為茅蒼術(shù)工廠化育苗提供技術(shù)參考。同時(shí),開(kāi)展了超低溫、玻璃化、誘導(dǎo)劑、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等外源處理對(duì)種子萌發(fā)、試管苗再生與分化、出苗率、幼苗生長(zhǎng)等影響的試驗(yàn),對(duì)組織快繁與再生、工廠化育苗等技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化。李西騰等研究了茅蒼術(shù)的組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)[43]。巢建國(guó)等研究了不同激素配比的培養(yǎng)基對(duì)葉片與葉柄愈傷組織誘導(dǎo)的影響,并研究了不同激素配比對(duì)芽增殖、試管苗生根的影響[44]。宋剛等研究發(fā)現(xiàn),以茅蒼術(shù)種子為外植體,用清水浸泡0.5 h后,10%乙醇浸泡30 s,0.1%氯化汞消毒15~18 min,接種誘導(dǎo)出無(wú)菌苗,其污染率最低[45]。王紅娟等針對(duì)茅蒼術(shù)工廠化育苗的高頻快繁、試管苗生根及移栽的關(guān)鍵環(huán)節(jié)開(kāi)展研究[46]。

        3.2 栽培管理

        茅蒼術(shù)適宜生長(zhǎng)在丘陵山區(qū)半陰半陽(yáng)的荒坡地。盧進(jìn)等開(kāi)展了茅蒼術(shù)不同播種期試驗(yàn),結(jié)果表明茅蒼術(shù)適宜在3月中旬至4月上旬播種;并研究了各性狀間的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)茅蒼術(shù)的葉生長(zhǎng)狀況對(duì)根莖質(zhì)量的影響比較大,在育苗期間應(yīng)注意采取促進(jìn)葉生長(zhǎng)的相關(guān)栽培措施[47]。汪文杰等對(duì)茅蒼術(shù)種植的關(guān)鍵環(huán)節(jié)開(kāi)展了研究,提出了種植密度、打頂是茅蒼術(shù)規(guī)范化種植的關(guān)鍵點(diǎn)[48]。茅蒼術(shù)露地栽培可與花生間套作,能降低土壤中化感物質(zhì)的累積,增加土壤酶活性,改善土壤根際微生物的組成[49]。

        茅蒼術(shù)的病蟲(chóng)害主要有輪紋病、枯萎病、根腐病、軟腐病、白絹病、黑斑病、線蟲(chóng)害等,江蘇地區(qū)多于5—9月發(fā)生茅蒼術(shù)病蟲(chóng)害,除可加強(qiáng)田間管理進(jìn)行預(yù)防外,還可利用甲基硫菌靈、多菌靈、代森錳鋅等化學(xué)藥劑,采取土壤消毒、種子處理、葉面噴灑,并結(jié)合對(duì)根和根頸部病害、發(fā)病中心灌根等措施進(jìn)行防治[50]。茅蒼術(shù)忌連作,可與禾本科植物(如玉米、小麥等)輪作,既起遮陰作用,又可預(yù)防土傳病害的傳播[51]。另有研究表明,應(yīng)用內(nèi)生熒光假單胞菌預(yù)處理茅蒼術(shù)幼苗可以顯著降低白絹病導(dǎo)致的死亡率[52]。

        4 茅蒼術(shù)藥理藥性

        4.1 胃腸促進(jìn)作用

        李育浩等研究發(fā)現(xiàn),75 mg/kg茅蒼術(shù)丙酮提取物能明顯促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng),產(chǎn)生該作用的主要活性成分為β-按葉醇、茅術(shù)醇[53]。王金華等研究了β-桉葉醇以及茅術(shù)醇+β-桉葉醇混合物對(duì)3種小鼠(正常小鼠、新斯的明負(fù)荷小鼠、大黃粉致脾虛小鼠)胃腸道運(yùn)動(dòng)機(jī)能方面的影響,結(jié)果表明,β-桉葉醇能夠明顯促進(jìn)正常小鼠的胃腸運(yùn)動(dòng);顯著抑制因新斯的明負(fù)荷小鼠引起的胃腸功能亢進(jìn);增加脾虛小鼠體質(zhì)量,明顯改善脾虛小鼠的體征;抑制脾虛小鼠的胃腸運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗泄瀉;試驗(yàn)還表明,β-桉葉醇對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)機(jī)能有雙向調(diào)節(jié)作用;β-桉葉醇、茅術(shù)醇+β-桉葉醇混合物可以作為蒼術(shù)健脾燥濕作用的有效活性成分之一,而茅術(shù)醇也是蒼術(shù)健脾作用的有效成分[54]。

        4.2 抗缺氧作用

        李育浩等研究發(fā)現(xiàn),茅蒼術(shù)的丙酮提取物及β-桉葉醇能明顯延長(zhǎng)氰化鉀中毒小鼠的存活時(shí)間,降低相對(duì)死亡率,有較強(qiáng)的抗缺氧能力,主要活性成分為β-桉葉醇[55]。

        4.3 抗血糖作用

        茅蒼術(shù)多糖能有效防治四氧嘧啶誘導(dǎo)小鼠的高血糖[56],改善Ⅱ型糖尿病大鼠體質(zhì)量下降情況,降低空腹血糖含量,提升胰島素水平[57]。茅蒼術(shù)多糖的抗糖尿病作用機(jī)制可能與其抗氧化作用有關(guān)。

        4.4 抑菌抗病毒作用

        茅蒼術(shù)水提液及其石油醚、乙酸乙酯、正丁醇部位均有抑制幽門螺桿菌的作用[58]。茅蒼術(shù)對(duì)結(jié)核菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、綠膿桿菌也有明顯的抑制或滅活作用[59]。有體外細(xì)胞試驗(yàn)表明,茅蒼術(shù)具有一定的抗HIV病毒的活性[60]。

        4.5 抑制癌細(xì)胞增殖作用

        茅蒼術(shù)提取物對(duì)體外培育人肝癌細(xì)胞株HepG2、人類膽管癌細(xì)胞系CL-6、肺癌A549細(xì)胞、胃癌BGC-823和 SGC-7901細(xì)胞、子宮頸癌SKOV-3細(xì)胞的增殖均有明顯的抑制作用。

        茅蒼術(shù)藥理藥性的研究對(duì)于臨床應(yīng)用具有指導(dǎo)意義。據(jù)古書(shū)記載及眾多研究表明,茅蒼術(shù)有燥濕健脾、祛風(fēng)、散寒、降血壓、抗?jié)?、利尿、減肥、催眠、煙熏空氣消毒等作用。在我國(guó)傳統(tǒng)用藥中,茅蒼術(shù)揮發(fā)油部分是主要藥用成分。不同產(chǎn)地茅蒼術(shù)揮發(fā)油各組成成分含量存在差異,茅山茅蒼術(shù)中蒼術(shù)素、蒼術(shù)酮含量明顯高于其他產(chǎn)地,具有明顯道地性特征。近年來(lái)茅山茅蒼術(shù)產(chǎn)量已明顯下降,自然條件下茅蒼術(shù)根莖生長(zhǎng)緩慢,是其資源趨于枯竭的重要原因,栽培條件下的無(wú)性繁殖技術(shù)日趨成熟,是解決這一問(wèn)題的重要手段。茅蒼術(shù)野生轉(zhuǎn)家種及其種群內(nèi)遺傳多樣性的研究,以及如何提高其藥用成分含量、合理開(kāi)發(fā)利用,對(duì)于茅蒼術(shù)種質(zhì)資源的保護(hù)很有必要。

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