向東

湖北三峽職業(yè)技術學院 湖北宜昌 443000

重金屬污染物免疫學檢測技術研究進展探究

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免疫學檢測技術是一項新興檢測技術，跟傳統(tǒng)檢測技術比較，更具靈敏性及高速性，同時便于攜帶方便、成本低以及適用于現(xiàn)場迅速檢測。文章即將介紹最近的重金屬污染物免疫學檢測技術，進而對該技術的實際運用及發(fā)展前景進行探究。

重金屬；污染物；免疫學檢測技術

銅和鋅等重金屬作為生命活動中必要的微量元素，但是攝入太多會危及身體健康，鉛、汞、以及鍋等重金屬并不是生命活動中需要的元素，若超過相應的濃度，則會對機體的健康構成威脅。通常重金屬污染存在諸多特征，如來源多、較強隱蔽性、遷移性不大、毒性強、化學行為與生態(tài)效應呈現(xiàn)復雜性…無論是環(huán)境，還是食物及物品，一定含有超量的重金，會經(jīng)過食物鏈、呼吸以及表面接觸，來對人體進行毒害，同時憑借一些遷移形式進入到大氣和水體中。大部分重金屬的毒性來源自身的物理化學形態(tài)，根據(jù)單克隆抗體制備，還有免疫學檢測技術能夠?qū)σ阅撤N形式呈現(xiàn)的重金屬離子進行檢測，便于在環(huán)境與食品樣品檢測重金屬中，創(chuàng)造定量或者半定量的有效檢測方法。

一、重金屬污染物免疫學檢測技術

（一）酶聯(lián)免疫吸附反應方法

酶聯(lián)免疫吸附反應方法，主要結合了酶催化作用和抗原抗體特異性免疫反應，屬于一項結合型檢測技術。該技術具有諸多優(yōu)點，如特異性更強、靈敏度更高、操做簡單便捷、非常易攜帶、高效準確性，并且能對大量的樣品進行檢測。在操作該項技術中，通常不需采用貴重的儀器設施。融合 ELISA技術，屬于實驗室常規(guī)檢測技術，不要求結合專業(yè)化、系統(tǒng)化的科學理論，一般普通的實驗人員都可以進行操作。由于在樣品檢測中時間短，可結合標準曲線來定量檢測物，正常在 ELISA試劑盒檢測區(qū)間內(nèi)的樣品，都可以采用該檢測技術。但是 ELISA試劑盒的檢測區(qū)域，容易受到特異性抗體親和力，還有靈敏度的限制。所以，在規(guī)定適用范圍內(nèi)，實際檢測出來的樣品，有可能存在假陽性問題，從而引發(fā)判定偏差，要求定量檢測過程中要好標準曲線。

（二）免疫膠體金方法

免疫膠體金方法通常將膠體金當作示蹤標志物，運用在抗原抗體中一項創(chuàng)新免疫標記技術。該方法具有靈活性及快速性，且檢查結果用肉眼就能進行判讀定，免疫膠體金方法比較適宜在現(xiàn)場檢測分析使用。免疫膠體金檢測技術經(jīng)過水樣里的鍋離子，應用納米欽富集水里的鍋離子來檢測，檢測結果達到5μg·L-1，該方法針對環(huán)境水樣進行檢測。在水樣進行檢測時，達到100 ng·mL-1，且檢測結果和ICP-AES具有一致性，類型相同的技術在進行水樣檢測時可達1 mg ·mL-1。所以，該方法適用于對水中鍋離子現(xiàn)場進行檢測。經(jīng)過構建鍋離子的免疫膠體金檢查技術，可應用二氧化欽集水中的鍋離子進行檢測，可升高6.7 ng·mL-1。該項研制的試紙條，置于5℃環(huán)境下能儲存8周，其穩(wěn)定性較佳，并且檢測成果和ICP-MS具有良好的相關性。

二、重金屬污染物免疫學檢測技術的注意要素

1.抗體制備及篩選

因為重金屬離子分子量過小，其結構簡單，不能用作制備抗體，要求通過雙功能鰲合劑，與其他試劑進行反應后，結合載體蛋白才能對動物進行免疫。在制備的抗體中，有些會與其他離子產(chǎn)生交叉反應。例如，丁菌制作的Cr3+離子單抗和Mo6+產(chǎn)生交叉反應；還有唐勇制作的鍋離子抗體和Hg2+發(fā)生交叉反應；在選擇抗體過程中，具有嚴格的要求，要求將篩選范圍擴大化，特別是亟待通過競爭 ELISA技術，來測定不同的離子針對抗體反應的抑制程度，必須要選擇特異性良好與靈敏的抗體。因此，許多研究報道逐步注重核酸適配體技術，探討其在重金屬免疫檢測方面的運用。例如，黃蜻創(chuàng)建的膠體金檢測技術，建立在特異性核酸序列與配對序列基礎上，有利于達到檢測的目的，更具靈敏性。

2.樣本前處理

在免疫技術檢測能力方面，現(xiàn)有報道的不同類檢測技術，靈敏度均高達mg ·mL-1水平，大體上符合多類樣本中的重金屬污染物限量指標。針對檢測樣本而言，不同的探究中選用的樣本大部分是水（涉及到自來水或者江河水等）。這樣，密切關系到樣本基質(zhì)的單一、干擾較小以及無須特別解決。針對食品安全包含的樣本報道不多，例如青菜、果類、谷物、肉類等，這些和樣本處理復雜性、耗時性以及干擾大息息相關。通常的設備分析技術，在進行測量重金屬中，一般會選用灰化或消解方式，檢測中費時費力。在免疫檢測樣本處理中，通常要通過此流程，尤其是對于大部分食品類樣本而言。所以說，構建省時省力樣本時，同時要求檢測結果影響不大，已然是重金屬免疫檢測探究的要點。汪慧基于該問題，作出了具體研究，通過稀酸浸提蛋白類食品中，含有的重金屬作為免疫檢測分析。該研究說明，新技術處理樣本檢測的結果和以往處理技術檢測的結果存在具有較好的線性相關性，尤其是對銅、鉛及鍋進行檢測，能替換以往樣本處理技術。另外，固相萃取技術、液相萃取技術也運用到重金屬檢測中。

三、發(fā)展趨勢及展望

從未來發(fā)展方向看，首先必須強化重金屬污染檢測，特別是毒性強且傷害大的重金屬。其次，加大重金屬含量的檢測力度，尤其是影響大、攝入量較高的重金屬。再次，加大科技研究力度，對于危害程度不一的重金屬污染進行合理分類，并且作出快速的測量與評價。最后，務必將定量檢測和定性篩選有機結合，針對迅速篩選的技術與設備，沒有必要力求太低的檢出限標準，進而節(jié)省測試資金，保證篩查的高效率。

總結

隨著我國經(jīng)濟的飛快發(fā)展，在食品和環(huán)境中，出現(xiàn)大量的重金屬污染問題。人們逐漸加強思想認識，如何高速性及準確性檢測出樣品含有的重金屬離子，這已經(jīng)變成世界各國家值得研究課題。

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1672-5018（2017）01-207-01