劉 帥，周麗艷，杜金友

(1遷安市農(nóng)業(yè)畜牧水產(chǎn)局，河北遷安，064400；2河北科技師范學(xué)院生命科技學(xué)院)

紫葉李(PrunuscerasiferaEhrh. f.atropupureaRehd.)屬薔薇科李屬，是重要的觀(guān)葉觀(guān)花觀(guān)果植物[1]，目前在冀東地區(qū)常用作風(fēng)景林及背景樹(shù)。紫葉李具有抗較高濃度氯氣的功能，可作為抗大氣污染的綠化植物栽植[2]。紫葉李果實(shí)甜美，可鮮食，也可加工后食用。果仁和花瓣均可入藥[3]。此外，紫葉李還具有較強(qiáng)的抗性，株型緊湊，近年來(lái)已成為果樹(shù)雜交育種重要種質(zhì)資源親本之一[4]。

目前，紫葉李的常規(guī)繁殖方法有播種、扦插、壓條；或采用桃、李、梅等為砧木進(jìn)行嫁接，但這些繁殖方法生產(chǎn)周期長(zhǎng)，成活率低，繁殖系數(shù)不高[5]。隨著植物組織培養(yǎng)技術(shù)的日益成熟并廣泛應(yīng)用[6]，研究者也試圖應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖紫葉李。早在2005年孫在紅等就已報(bào)道以紫葉李春季萌生苗嫩枝為外植體探索了腋芽誘導(dǎo)、叢生芽增殖和生根培養(yǎng)基的配比[7]；2008年馬志波等也探討了紫葉李嫩莖分化和生根培養(yǎng)基的配比[8]，但兩者研究結(jié)果不盡相同。

近年來(lái)，隨著紫葉李被不斷開(kāi)發(fā)利用，其快速繁殖也尤顯重要。筆者試圖以帶腋芽的莖段為外植體，探索不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑以及水解乳蛋白對(duì)紫葉李快速繁殖的影響，為紫葉李大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

材料取自河北科技師范學(xué)院花卉標(biāo)本園，選取當(dāng)年生的、未萌芽的成年紫葉李樹(shù)幼嫩枝條作為試驗(yàn)材料。

1.2 試驗(yàn)方法

選取腋芽飽滿(mǎn)、無(wú)病蟲(chóng)害的嫩枝，在流水下用毛筆輕輕刷洗，用吸水紙吸干水分，在超凈工作臺(tái)上用質(zhì)量濃度為1.0 g/L的升汞水溶液消毒10 min，用無(wú)菌水沖洗5～6次，剪取2.5 cm長(zhǎng)的腋芽段，接種于不同培養(yǎng)基中。

1.3 培養(yǎng)基

紫葉李莖段離體培養(yǎng)誘導(dǎo)再生植株培養(yǎng)基共有4種：(1)6- BA誘導(dǎo)萌芽- 成芽培養(yǎng)基(表1)；(2)不同激素誘導(dǎo)萌芽- 成芽培養(yǎng)基(表2)；(3)誘導(dǎo)芽增殖培養(yǎng)基(表3)；(4)誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基(表4)。

1.4 培養(yǎng)條件

培養(yǎng)溫度為26 ℃；光照時(shí)間12～14 h/d；光照度1 800～2 000 lx；生根時(shí)暗培養(yǎng)。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法及標(biāo)準(zhǔn)

萌芽率=(萌芽段數(shù)/接種段數(shù))×100%，萌芽標(biāo)準(zhǔn)為芽長(zhǎng)>芽寬。

成芽率=(成芽段數(shù)/萌芽段數(shù))×100%，成芽標(biāo)準(zhǔn)為第一葉完全展開(kāi)。

生根率=(生根數(shù)/接種芽數(shù))×100%

表1 誘導(dǎo)萌芽- 成芽的6- BA質(zhì)量濃度

表2 誘導(dǎo)萌芽- 成芽的激素質(zhì)量濃度

表3 誘導(dǎo)芽增殖的激素質(zhì)量濃度

表4 誘導(dǎo)生根的激素質(zhì)量濃度

2 結(jié)果與分析

2.1 6- BA濃度對(duì)紫葉李萌芽- 成芽的影響

6- BA的濃度對(duì)紫葉李萌芽率和成芽率有顯著的影響(表5)。6- BA濃度較低時(shí)(≤1.0 mg/L)有利于芽的萌發(fā)和形成；當(dāng)6- BA為1.0 mg/L時(shí)，萌芽率達(dá)78.26%，成芽率達(dá)55.56%，均高于其它處理。6- BA的濃度超過(guò)3.0 mg/L不利于芽的萌發(fā)和形成。

表5 不同濃度6- BA對(duì)紫葉李萌芽- 成芽的影響

2.2 6- BA與生長(zhǎng)素混合使用對(duì)誘導(dǎo)紫葉李萌芽- 成芽的影響

6- BA分別與IBA，NAA，IAA混合使用，萌芽率、成芽率間存在差異(表6)。3.0 mg/L 6- BA與1.0 mg/L IAA組合使用最好，萌芽率為97.37%，成芽率為75.68%。6- BA在0.5 mg/L～5.0 mg/L范圍內(nèi)與IBA組合，誘導(dǎo)紫葉李萌芽的效果好于6- BA與NAA組合，說(shuō)明對(duì)于芽的萌發(fā)，生長(zhǎng)素IBA比NAA誘導(dǎo)效果好。另外生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的濃度比例對(duì)于紫葉李芽的萌發(fā)和形成也很關(guān)鍵。0.5 mg/L 6- BA分別與1.0 mg/L IBA，1.5 mg/L NAA組合較好，萌芽率、成芽率均較高(處理6與處理7，處理8與處理9相比)。

表6 不同培養(yǎng)基中紫葉李萌芽- 成芽情況

2.3 水解乳蛋白對(duì)誘導(dǎo)紫葉李萌芽- 成芽的影響

培養(yǎng)基中加入水解乳蛋白(LH)未能起到促進(jìn)紫葉李芽的萌發(fā)和形成的作用(表6)。處理5與處理6萌芽率、成芽率間達(dá)到顯著差異(t=2.10)，這說(shuō)明500 mg/L LH對(duì)紫葉李芽的萌發(fā)、形成有抑制作用。

2.4 外植體部位對(duì)誘導(dǎo)紫葉李芽的影響

外植體在枝條上的部位(上部和下部)顯著影響紫葉李芽的萌發(fā)和形成(表7)。所有培養(yǎng)基中，上部莖段的萌芽率和成芽率都高于下部莖段，多數(shù)已達(dá)顯著水平(29號(hào))，有的達(dá)極顯著水平(28號(hào)，30號(hào)，32號(hào))。

2.5 生長(zhǎng)素對(duì)紫葉李生根的影響

將誘導(dǎo)的紫葉李芽接種于7種生根培養(yǎng)基中，進(jìn)行根的誘導(dǎo)(表8)。結(jié)果表明：木本植物生根一直比較困難，培養(yǎng)20 d后，處理21～26均未生根，培養(yǎng)35 d后，調(diào)查結(jié)果亦無(wú)明顯變化，也說(shuō)明紫葉李在1/2MS培養(yǎng)基上，加IBA、NAA均不能生根。處理27培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20 d后生根率達(dá)27.27%，說(shuō)明MS+1.0 mg/L IBA可以促使紫葉李生根。

表7 不同外植體部位紫葉李萌芽- 成芽的情況

表8 不同生長(zhǎng)素誘導(dǎo)紫葉李生根的情況

2.7 紫葉李試管苗移栽

將有根的6株小苗移植到經(jīng)嚴(yán)格消毒的蛭石上，遮蔭并經(jīng)常噴霧保濕，濕度保持在98%以上，20 d后有4株正常生長(zhǎng)。成活的小苗根系生長(zhǎng)較慢，見(jiàn)光后葉子逐漸變成紅色。

3 結(jié)論與討論

3.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)紫葉李芽萌發(fā)、形成及增殖的影響

本試驗(yàn)中誘導(dǎo)紫葉李芽萌發(fā)和形成的最佳激素組合是3.0 mg/L 6- BA+1.0 mg/L IAA，明顯高于孫在紅[7]和馬志波的結(jié)果[8]。其萌芽率和成芽率在17個(gè)處理中均為最高。相同濃度下，IBA誘導(dǎo)紫葉李萌芽、成芽效果好于NAA。適當(dāng)濃度的6- BA(1.0 mg/L)單獨(dú)使用比與生長(zhǎng)素混合使用誘導(dǎo)效果好，這與月季[6]有關(guān)報(bào)道一致。誘導(dǎo)紫葉李芽增殖的較好組合是：0.5 mg/L 6- BA+1.0 mg/L IBA。

3.3 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)紫葉李生根的影響

以1/2MS為基本培養(yǎng)基的所有處理均未能誘導(dǎo)紫葉李生根，只有MS+1.0 mg/L IBA誘導(dǎo)出根，但是正如大部分木本植物一樣，生根率也不是很高，只有27.27%。這與孫在紅[7]和馬志波[8]的結(jié)果略有差異。為了紫葉李組織培養(yǎng)快速繁殖，提高其生根率有待進(jìn)一步的研究。

[1] 王蓮英,朱秀珍,虞佩珍,等.中國(guó)名貴花卉鑒賞與栽培[M].合肥:安徽科學(xué)技術(shù)出版社,1997.

[2] 江蘇省植物研究所.抵抗和吸收有毒氣體的綠化樹(shù)種選擇[G]//湖北水生生物研究所.環(huán)境保護(hù)生物監(jiān)測(cè)與治理資料匯編.北京:科學(xué)出版社,1978:206- 211.

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