王玉海，田艷群，呂啟忠

(1.湖南省張家界市永定區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南張家界427000；2.湖南省張家界市永定區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，湖南張家界427000)

近年來(lái)我省禽流感防控形勢(shì)依然嚴(yán)峻，2016年我省發(fā)生14例H5疫情，2017年3月我省出現(xiàn)H7禽流感變異株和雞感染H7禽流感疫情，與此同時(shí)，全國(guó)和我省H7N9人感染病例數(shù)、死亡數(shù)、流行范圍不斷增加，這使的活禽市場(chǎng)又被推上風(fēng)口浪尖[1]。不管是出現(xiàn)人間H7N9流感病例，或是暴發(fā)家禽疫情，還是在實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)該病毒病原學(xué)陽(yáng)性情況，獸醫(yī)部門都需要開展緊急流感病學(xué)調(diào)查[2]。

為掌握永定區(qū)動(dòng)物間H7N9流感疫情流行情況和查明疫情來(lái)源，永定區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心會(huì)同區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所抽調(diào)技術(shù)人員立即開展緊急流行病學(xué)調(diào)查，采取現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查與實(shí)驗(yàn)室相結(jié)合的方式，對(duì)全區(qū)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)和城區(qū)活禽交易市場(chǎng)進(jìn)行了調(diào)查和監(jiān)測(cè)?，F(xiàn)將有關(guān)情況報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品的來(lái)源及數(shù)量

檢測(cè)樣品均來(lái)自市城區(qū)活禽交易市場(chǎng)。3月29-30日在4個(gè)活禽交易市場(chǎng)進(jìn)行隨機(jī)采樣，共采集血清樣品51份、口腔和泄殖腔拭子51份、環(huán)境拭子106份。詳見下表1

表1 城區(qū)部分活禽交易市場(chǎng)采樣情況

1.1.2 主要試劑

熒光RT-PCR試劑為達(dá)安基因公司西安天隆核酸提取試劑盒（批號(hào)：E0111201A1）。血清學(xué)檢測(cè)試劑生產(chǎn)單位為哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)有限公司(診斷抗原批號(hào)為2016004，陽(yáng)性血清批號(hào)為2016002)。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)地調(diào)查法

3月29日至4月6日對(duì)全區(qū)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)和市城區(qū)所有活禽交易市場(chǎng)通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)詢問(wèn)、填寫調(diào)查表、查閱銷售臺(tái)帳、檢疫證明的方式進(jìn)行調(diào)查，主要調(diào)查養(yǎng)殖場(chǎng)和市場(chǎng)家禽臨床健康狀況，活禽交易市場(chǎng)家禽來(lái)源，三清市場(chǎng)周邊情況等。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法

血清學(xué)檢測(cè)采用血凝抑制（HI）試驗(yàn)，血清學(xué)樣本由桑植縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)血清中H7亞型禽流感病毒血凝素抗體，病原學(xué)檢測(cè)采用熒光RT-PCR檢測(cè)方法，口腔和泄殖腔拭子及環(huán)境拭子樣本由長(zhǎng)沙市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用熒光PCR進(jìn)行H7N9病毒核酸檢測(cè)。

1.2.3 結(jié)果判定

檢測(cè)血清中H7亞型流感抗體，HI抗體水平≥24，判定為陽(yáng)性。病原學(xué)檢測(cè)采用熒光RT-PCR檢測(cè)方法，結(jié)果判定按照試劑（盒）的使用說(shuō)明進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查總體情況

患者胡某，男性，現(xiàn)年50歲，西溪坪街道辦事處人，患者在三清農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)上從事蔬菜零賣。三清市場(chǎng)共有家禽經(jīng)營(yíng)戶2戶，一戶是李某，一戶是陳某，患者胡某的蔬菜攤位位于兩個(gè)家禽經(jīng)營(yíng)戶之間，距南邊的李某約15米左右，與北邊的陳某相毗鄰?，F(xiàn)場(chǎng)調(diào)查時(shí)李某存籠雞45羽、鴨32羽，陳某存籠雞60羽、鴨25羽，銷售的家禽臨床上沒(méi)有發(fā)病死亡現(xiàn)象，主要銷售給零散的市民，市民購(gòu)買后現(xiàn)場(chǎng)宰殺。

全區(qū)24個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)58個(gè)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)和14個(gè)活禽交易市場(chǎng)經(jīng)走訪調(diào)查，臨床上未發(fā)現(xiàn)家禽流感癥狀和異常死亡現(xiàn)象。

2.2 病源追溯調(diào)查情況

永定城區(qū)共有農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)14個(gè)，家禽經(jīng)營(yíng)戶37戶，每月銷售家禽近12萬(wàn)羽，通過(guò)查閱家禽批發(fā)商的檢疫證明和銷售臺(tái)帳發(fā)現(xiàn)，市城區(qū)的家禽主要來(lái)自湖北監(jiān)理、寧鄉(xiāng)、桃源、石門等地，從外地調(diào)入家禽約占城區(qū)市場(chǎng)的90%左右。三清市場(chǎng)李某和陳某的家禽主要來(lái)自奇峰市場(chǎng)批發(fā)商鄧和某、鄧學(xué)某。家禽來(lái)源追溯情況見圖1。

圖1 永定區(qū)三清市場(chǎng)家禽來(lái)源追溯情況

2.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

3月29日到桑植縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室做血清學(xué)檢測(cè)，所采樣品檢測(cè)結(jié)果均為陰性，3月31日將157份拭子(咽喉、泄殖腔拭子51份，環(huán)境拭子106份)送長(zhǎng)沙市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，結(jié)果經(jīng)營(yíng)戶李某攤位的11份環(huán)境拭子全部為陽(yáng)性，其余146樣品為陰性。詳見表2。

表2 市城區(qū)部分家禽經(jīng)銷攤點(diǎn)抽樣檢測(cè)情況

3 分析與討論

3.1 從實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)來(lái)看，李某攤位的11份環(huán)境拭子檢測(cè)均為陽(yáng)性，表明李某攤位存在H7N9流感病毒且環(huán)境污染嚴(yán)重。

3.2 本次疫源很有可能是從外地調(diào)運(yùn)傳播而來(lái)，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，全區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)經(jīng)排查沒(méi)有發(fā)現(xiàn)疫情和異常死亡現(xiàn)象，同時(shí)調(diào)查發(fā)現(xiàn)3月31日永定區(qū)疾控中心在奇峰市場(chǎng)鄧和某的環(huán)境拭子中檢測(cè)到H7N9病毒核酸陽(yáng)性，說(shuō)明病源來(lái)自奇峰市場(chǎng)鄧和某。而李某采購(gòu)的家禽來(lái)自奇峰市場(chǎng)家禽批發(fā)商鄧和某與鄧學(xué)某，鄧和某主要是從寧鄉(xiāng)溫氏集團(tuán)和湖北監(jiān)理溫氏集團(tuán)等地購(gòu)進(jìn)，故本次疫源很有可能是鄧和某從外地調(diào)運(yùn)引入的。

3.3 感染來(lái)源可能與活禽交易市場(chǎng)外環(huán)境病毒有關(guān)，患者胡某雖然沒(méi)有直接接觸家禽，但處在兩個(gè)家禽經(jīng)銷攤位之間，暴露于致病因素之中。同時(shí)檢測(cè)結(jié)果顯示，本次H7N9流感疫情病原學(xué)陽(yáng)性主要出現(xiàn)在市場(chǎng)環(huán)境中，市場(chǎng)活禽中并未檢測(cè)到H7N9流感病毒陽(yáng)性，這與永定區(qū)疾控中心監(jiān)測(cè)的結(jié)果是一致的，因此，這表明患者的感染可能與市場(chǎng)環(huán)境暴露有關(guān)，外環(huán)境病毒可能是本次人感染H7N9流感病例的傳染來(lái)源，這與韓光躍等[4]、戴夢(mèng)[5]等研究結(jié)果一致。但患者感染的H7N9毒株與市場(chǎng)環(huán)境中檢測(cè)到的H7N9毒株基因是否具有同源性有待于進(jìn)一步研究。

3.4 疫情發(fā)生后，永定區(qū)人民政府采取了關(guān)閉全區(qū)活禽交易市場(chǎng)，并嚴(yán)格的清洗和消毒；對(duì)三清市場(chǎng)的家禽進(jìn)行了撲殺和無(wú)害化處理，污染場(chǎng)所和用具進(jìn)行徹底消毒，后來(lái)未發(fā)現(xiàn)家禽和人員感染情況。關(guān)閉城區(qū)內(nèi)活禽交易市場(chǎng)、加強(qiáng)活禽交易市場(chǎng)的清洗消毒和監(jiān)測(cè)等措施，是控制人感染H7N9流感疫情的有效措施?！?/p>

[1] 林源，王衛(wèi)國(guó)，何世成，等.2016年湖南省活禽市場(chǎng)禽流感和新城疫監(jiān)測(cè)與分析[C]//2016年湖南省動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與分析.長(zhǎng)沙：湖南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，2017：40-47.

[2] 田召芳，李春蕾，黨安坤，等.H7N9流感緊急流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)病毒抽樣方案的制定與體會(huì)[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2017，34（7）：25-27.

[3] 余平，熊英，李輝，等.江西省首例人感染H7N9流感病例的流行病學(xué)調(diào)查[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2014，41（8）：1351-1353.

[4] 韓光躍，李巖，劉艷芳，等.河北省人感染H7N9流感病例的流行病學(xué)調(diào)查與病原學(xué)分析[J].中國(guó)病原生物學(xué)雜志，2015，10（5）：435-438.

[5] 戴猛，蔡亞輝，黃一偉，等.岳陽(yáng)市2例人感染H7N9禽流感病例的流行病學(xué)調(diào)查與外環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，22（2）：52-54.