沈 迪，陳錦紅，朱小峰

（浙江中法制藥有限公司，浙江 嘉興 314008）

蛇床子是傘形科植物蛇床（Cnidium monnieri(L)Cuss.）的干燥成熟果實(shí)。夏、秋二季果實(shí)成熟時(shí)采收，除去雜質(zhì)，曬干[1]。蛇床子外用能燥濕祛風(fēng)、殺蟲止癢，用于陰部濕癢、濕疹、濕瘡、疥癬；并且它辛潤而不燥，性溫能助陽，入腎經(jīng)而有溫腎壯陽之功，故可用于腎陽虛衰所致的陽痿遺精，宮冷不孕等癥[2]?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》將蛇床子列為上品，言其“主男子陽痿，久服輕身”[3]。唐宋時(shí)期，蛇床子臨床作為補(bǔ)虛常用藥。明清以后，近代以來，蛇床子主要作外用，很少作內(nèi)服。如《本草正義》提到蛇床子“絕少用為內(nèi)服之藥”[4]。

關(guān)于蛇床子的炮制首見于《雷公炮灸論》[5]“須用濃蘭汁、并百部草根自然汁二味，同浸三伏時(shí)，漉出，日干。卻，用生地黃汁相拌蒸，從午至亥，日干用”；《日華子本草》[6]有云“蛇床，凡合藥服食即挼去皮殼取仁，微炒殺毒即不辣，作湯洗病則生使”；有文獻(xiàn)認(rèn)為蛇床子入藥內(nèi)服須經(jīng)過炮制[7]。蛇床子的主要炮制方法有炒制、酒炙、酥炙等?，F(xiàn)今，古代的炮制方法已基本不用，一般市場上提供的都是蛇床子生品。現(xiàn)為了進(jìn)一步研究炮制的蛇床子和生品的理化性質(zhì)和蛇床子素含量的差異，為臨床用藥提供依據(jù)，本實(shí)驗(yàn)對不同炮制工藝的蛇床子理化性質(zhì)和蛇床子素含量進(jìn)行比較和研究。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（島津 LC-10ATVP）；CPA324S型電子天平；DHG-9070A電熱恒溫古風(fēng)干燥箱；Sx2-2.5-10型箱式電阻爐；三明紫外儀；超聲清洗儀。

蛇床子的生產(chǎn)廠家安徽盛海堂中藥飲片有限公司，批號(hào)2016090151，經(jīng)鑒定為傘形科植物蛇床（Cnidium monnieri(L) Cuss.）的干燥成熟果實(shí)；蛇床子素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)110822-201308）；乙腈為色譜純；乙醇為分析純；純化水；其它溶液均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 蛇床子的炮制方法

①生品：取蛇床子藥材，篩選，除去雜質(zhì)，即可[8]。②炒蛇床子：取上述生品50 g，置鍋內(nèi)，用文火炒，至有香味逸出，取出攤涼。③酒炙：取上述生品50 g，加10 ml黃酒，與凈藥材拌勻，稍悶，吸盡，用文火炒至香氣逸出，色變深時(shí)，取出攤涼。④酥炙：取上述生品50 g，酥油10 g，小火拌炒至酥油吸盡，香氣漸濃即可，取出攤涼。上述4種蛇床子均搗碎。用于含量測定的過30目篩后備用。

2.2 蛇床子及炮制品的水分測定

根據(jù)中國藥典水分測定法中第二法（烘干法）[9]對蛇床子及各炮制品進(jìn)行水分測定：取供試品2～5 g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，精密稱定，開啟瓶蓋在105℃干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，放冷30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時(shí)，放冷，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5 mg。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品水分含量。蛇床子及炮制品平均含水量的測定結(jié)果：生品蛇床子11.1%，炒制3.4%，酒炙9.4%，酥炙2.3%。

2.3 蛇床子及炮制品的總灰分

根據(jù)中國藥典[9]對蛇床子及各炮制品進(jìn)行水分測定：粉碎供試品，使能通過二號(hào)篩，混合均勻后，取供試品3～5 g，置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量，緩緩熾熱，至完全炭化時(shí)，逐漸升高溫度至600℃，使完全灰化并至恒重。蛇床子及炮制品灰分的測定結(jié)果：生品蛇床子10.9%，炒制11.9%，酒炙11.3%，酥炙8.5%。

2.4 蛇床子及炮制品酸不溶性灰分

根據(jù)中國藥典[9]的方法，對蛇床子及各炮制品進(jìn)行酸不溶性灰分的測定：取2.3項(xiàng)所得的灰分，在坩堝中小心加入稀鹽酸約10 ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5 ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。蛇床子及炮制品的酸不溶性灰分的測定結(jié)果：生品蛇床子3.1%，炒制2.7%，酒炙3.7%，酥炙2.1%。

2.5 蛇床子及炮制品浸出物

根據(jù)中國藥典[9]的方法，取供試品約4 g，精密稱定，置250 ml的錐形瓶中，精密加95%乙醇100 ml，密塞，冷浸，前6個(gè)小時(shí)內(nèi)時(shí)時(shí)振搖，再浸置18小時(shí)，用干燥濾器迅速濾過，精密量取續(xù)濾液20 ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量（%）。蛇床子及炮制品的浸出物含量的測定結(jié)果：生品蛇床子18.2%，炒制17.1%，酒炙15.1%，酥炙23.5%。

2.6 蛇床子及炮制品蛇床子素的含量測定

2.6.1 色譜條件

色譜柱：迪馬C18（150 mm×4.6 mm，5 μm，北京迪科馬科技有限公司）；流動(dòng)相：乙腈-水（65:35）；流速1.0 ml/min；檢測波長322 nm；柱溫35℃；理論板數(shù)按蛇床子素計(jì)算應(yīng)不低于3000。

2.6.2 對照品溶液的制備

精密稱取蛇床子素適量，精密稱定，加乙醇制成每1 ml含45 μg的溶液，即得。

2.6.3 供試品溶液的制備

精密稱取上述蛇床子不同炮制粉末約0.1 g（過三號(hào)篩），置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇25 ml，密塞，稱定重量，放置2小時(shí)，超聲處理（功率300 W，頻率50 KHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用無水乙醇補(bǔ)足減失的重量。精密量取上清液5 ml，置10 ml量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，即得。

2.6.4 測定方法

使用外標(biāo)法對蛇床子生品及炮制品中含的蛇床子素進(jìn)行測定；進(jìn)樣量：對照品10 μL，供試品10 μL；校正因子=（對照品峰面積×稀釋倍數(shù)）/對照品重量；蛇床子含量=（供試品峰面積×稀釋倍數(shù)×10-3）/[平均校正因子×粉末重量×（1-含水量）]×100%

2.6.5 測定結(jié)果

測定結(jié)果見表1。

表1 蛇床子及炮制品蛇床子素的含量

3 討 論

對蛇床子生品和蛇床子炮制品的理化性質(zhì)和蛇床子素含量進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，蛇床子采用炒、炙的炮制方法通過加熱使蛇床子生品的水分蒸發(fā)，因此炮制品的水分含量下降。此外，經(jīng)炮制后，蛇床子的總灰分、酸不溶性灰分并沒有顯著變化，這可能和蛇床子藥材本身特性和采收過程有關(guān)。在炮制后，浸出物的含量有變化，尤其是采用酒炙和酥炙，推測可能和蛇床子中的主要有效成分香豆素類和萜類化合物[10]能溶解于酒精或者是脂溶性物質(zhì)中，或者是與酒精或脂溶性物質(zhì)發(fā)生了酯化反應(yīng)等，因此經(jīng)酒炙或酥炙后，炮制品中的水溶性浸出物含量與生品的浸出物含量有差異。蛇床子的浸出物含量變化還需要做進(jìn)一步的研究和分析。

對于蛇床子中有效成分的分析，考慮到目前蛇床子的活性成分研究多集中在香豆素類成分，尤其是蛇床子中含量最高的香豆素（約占60%）——蛇床子素[11]，它屬于簡單香豆素。在中華人民共和國藥典（2015年版）也將蛇床子素作為蛇床子的指標(biāo)成分。所以本項(xiàng)研究對于生蛇床子和炮制品的主要活性成分的研究主要以蛇床子素作為參照進(jìn)行比較。蛇床子經(jīng)炒制、酒炙和酥炙之后，其蛇床子素的含量均有不同程度的下降。尤其是酥炙之后，蛇床子素含量下降較大。

蛇床子的生品在中國藥典[1]的性味與歸經(jīng)為：辛、苦，溫；有小毒。歸腎經(jīng)。查閱古代文獻(xiàn)，《藥性論》[12]和《雷公炮制論性解》[13]描述蛇床子有小毒?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，蛇床子生品對小鼠的半數(shù)致死量（LD50）為83.37 g/kg，其急性毒性高于關(guān)木通和香加皮[14]。也有研究發(fā)現(xiàn)蛇床子素對細(xì)胞體外生長抑制率達(dá)到70.13%，有較強(qiáng)的體外細(xì)胞毒活性[15]。蛇床子經(jīng)炒制、酒炙和酥炙等炮制方式，一定程度上能將蛇床子素的含量降低，就是傳統(tǒng)炮制描述的“改變其燥性”，這可能也是炮制之后降低生品蛇床子毒性的一個(gè)方面。對于蛇床子炮制后的藥理藥效等變化，需要做進(jìn)一步深入的研究。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:315.

[2]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典臨床用藥須知:中藥飲片卷[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2011:1215.

[3]魏·吳普.神農(nóng)本草經(jīng)[M].北京:科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,1996:30-31.

[4]張山雷.本草正義[M].程?hào)|旗,點(diǎn)校.福建:福建科學(xué)技術(shù)出版社,2006:166-167.

[5]南北朝·雷敩.雷公炮制論[M].王興法,輯校.上海:上海中醫(yī)學(xué)院出版社,1986:26.

[6]常敏毅,輯注.日華子本草輯注[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2016:35.

[7]伍冠一,曾曼櫚,吉玉芳,等.蛇床子本草考證[J].中國民族民間醫(yī)藥,2017,25(4):72-75.

[8]石繼連,何 群,楊梓懿.不同炮制方法對蛇床子中蛇床子素含量的影響[J].中國藥師,2007,10(1):44-45.

[9]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(四部)[S].北京,中國醫(yī)藥科技出版社,2015.

[10]陳 艷,張國剛,余仲平.蛇床子的化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,23(4):256-260.

[11]沈麗霞,張丹參,張 力.蛇床子化學(xué)成分藥理作用與應(yīng)用的研究[J].醫(yī)學(xué)綜述,2003,9(9):565-567.

[12]唐·甄權(quán).藥性論[M]蕪湖:皖南醫(yī)學(xué)院科研科,1983:22.

[13]明·李中梓.雷公炮制藥性解[M]金芷君,校注.北京:中國中醫(yī)藥出版社,1998:98.

[14]張 智,閃增郁,向麗華,等.15味有毒中藥小鼠半數(shù)致死量的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2005,11(6):435-436.

[15]段緒紅,張玉卓,何 培,等.蛇床子中的細(xì)胞毒活性香豆素[J].中國中藥雜志,2015,40(18):3594-3597.