尤亞林，李 慧，潘思軼，徐曉云?

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，環(huán)境食品學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430070）

細(xì)香蔥提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901抑制作用

尤亞林，李 慧，潘思軼，徐曉云?

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，環(huán)境食品學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430070）

通過四甲基偶氮唑藍(lán)比色法和流式細(xì)胞術(shù)研究不同細(xì)香蔥提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖的抑制作用及其對(duì)細(xì)胞周期、凋亡率的影響。結(jié)果顯示，細(xì)香蔥抗胃癌活性成分主要集中在75%乙醇提取部位，同一區(qū)域不同品種細(xì)香蔥抑制胃癌細(xì)胞增殖作用存在顯著性差異（P＜0.05），其中3號(hào)細(xì)香蔥75%乙醇提取物的抑制作用最強(qiáng)，其24、48、72 h時(shí)IC50值分別為（0.88±0.07）、（0.45±0.08）、（0.21±0.03） mg/mL；SGC7901細(xì)胞經(jīng)1.0、2.0 mg/mL的細(xì)香蔥75%乙醇提取物處理48 h后，S期細(xì)胞所占比例顯著增多（P＜0.05），細(xì)香蔥75%乙醇提取物阻礙人胃癌細(xì)胞SGC7901由S期向G2期的轉(zhuǎn)化，將細(xì)胞周期阻滯于S期；同時(shí)，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞相比對(duì)照組凋亡率顯著上升（P＜0.05），存在量效關(guān)系。綜上，細(xì)香蔥75%乙醇提取物能夠阻滯人胃癌細(xì)胞SGC7901由S期向G2期轉(zhuǎn)化、促進(jìn)其凋亡并抑制細(xì)胞增殖，細(xì)香蔥具有開發(fā)成為抗胃癌功能食品的潛力。

細(xì)香蔥；抗胃癌；人胃癌細(xì)胞SGC7901

細(xì)香蔥（Allium fi stulosum L. var. caespitosum Makino）為蔥屬（Allium）植物，是百合科（Liliaceae）多年生鱗莖植物[1]。細(xì)香蔥是人們熟悉且廣泛使用的調(diào)味品，在我國(guó)栽培歷史悠久，分布廣泛，山東、河北、河南、湖北等省是細(xì)香蔥種植大省。

蔥屬植物中含有含硫化合物[2-3]、黃酮類化合物[4-6]、甾體化合物[7]、多糖[8-10]、含氮化合物[11]等功能活性成分，使得蔥屬植物具有抗血小板凝集[12]、抑菌[13-14]、抗氧化[14]等功能活性。蔥屬植物還具有較好的抗癌活性[15]。韓正高等[16]通過體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，HeLa細(xì)胞株經(jīng)大蔥提取液作用后，細(xì)胞核體積增大、細(xì)胞膜破損并死亡，且呈現(xiàn)劑量效應(yīng)，初步證明蔥屬植物具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。蔥屬植物可影響多種作用于細(xì)胞周期的蛋白的表達(dá)量，阻礙DNA的合成，減緩腫瘤細(xì)胞增殖速率。將大蒜素分別作用人胃癌細(xì)胞MGC803和SGC7901 24 h后，兩種細(xì)胞的細(xì)胞周期發(fā)生變化，G0和G1期細(xì)胞逐漸減少，G2期和M期細(xì)胞逐漸增加，S期細(xì)胞無(wú)明顯變化，提示大蒜素將細(xì)胞周期阻滯于M期[17]。

本實(shí)驗(yàn)以細(xì)香蔥為研究對(duì)象，探究細(xì)香蔥不同提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖的抑制作用，確定了75%乙醇提取部分為細(xì)香蔥抗胃癌活性部位，對(duì)比該部位與其他部位提取物的化學(xué)成分差異，分析了細(xì)香蔥提取物中可能的活性組分，探討了同一區(qū)域下遺傳因素對(duì)細(xì)香蔥抗胃癌活性的影響，還從細(xì)胞SGC7901周期、細(xì)胞凋亡兩方面研究了細(xì)香蔥醇提物抗胃癌作用方式。研究可為細(xì)香蔥的精深加工利用積累基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

湖北省不同品種細(xì)香蔥由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院提供，被華中農(nóng)業(yè)大學(xué)蔬菜教研室鑒定為百合科（Liliaceae）多年生鱗莖植物。

MEM培養(yǎng)基 美國(guó)Gibco公司；青-鏈霉素混合液、無(wú)噬菌體胎牛血清 浙江天杭生物科技有限公司；四甲基偶氮噻唑藍(lán)（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide，MTT）、胰蛋白酶 美國(guó)Genview公司；細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 南京凱基生物公司。

所有提取用有機(jī)溶劑均為分析純 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 瑞士Buchi公司；全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀 美國(guó)Thermo公司；TS100倒置顯微鏡 日本Nikon公司；HERA CELL 150i培養(yǎng)箱 武漢赤城生物技術(shù)有限公司；TG16W醫(yī)用離心機(jī) 長(zhǎng)沙平凡儀器儀表有限公司；FACS Calibur流式細(xì)胞儀 美國(guó)BD Biosciences公司。

1.3 方法

1.3.1 細(xì)香蔥提取物的制備

新鮮細(xì)香蔥，去根須，洗凈，50 ℃烘干，粉碎，干燥陰涼處貯存?zhèn)溆?。?zhǔn)確稱取10.00 g蔥粉4份于圓底燒瓶，分別加入200 mL蒸餾水、75%乙醇溶液、乙酸乙酯、丙酮，進(jìn)行回流提取，提取溫度70 ℃，提取2 次，每次4 h，合并2 次提取液。提取液于4 000 r/min離心10 min，取上清液過濾得細(xì)香蔥提取液，減壓蒸發(fā)濃縮，真空冷凍干燥，得到細(xì)香蔥水提物、75%乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、丙酮提取物。以同樣的方法制得不同品種細(xì)香蔥乙醇提取物。

1.3.2 總糖含量的測(cè)定

采用苯酚-硫酸法[18]測(cè)定提取物中總糖含量。

1.3.3 總黃酮含量的測(cè)定

采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法[19]測(cè)定總黃酮類化合物含量。

1.3.4 含硫化合物含量的測(cè)定

采用定硫法[20]測(cè)定細(xì)香蔥提取物含硫化合物含量。1.3.5 細(xì)香蔥提取物對(duì)胃癌細(xì)胞抑制作用的測(cè)定

采用MTT比色法[21]評(píng)價(jià)細(xì)香蔥提取物對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人胃癌細(xì)胞SGC7901，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.25%胰蛋白酶消化，倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)，用MEM培養(yǎng)基稀釋調(diào)整細(xì)胞密度約5×104個(gè)/mL，配制成細(xì)胞懸浮液，接種于96 孔板，每孔100 μL，邊緣孔用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）填充，同時(shí)設(shè)只加培養(yǎng)液不接種細(xì)胞的空白對(duì)照，37 ℃、5% CO2孵育15 h。棄掉孔內(nèi)培養(yǎng)基，加入由培養(yǎng)基配制的不同質(zhì)量濃度樣品溶液（0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL），每孔200 μL，并分別設(shè)置陰性對(duì)照，每種處理設(shè)6 個(gè)重復(fù)，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)24、48、72 h。然后吸出培養(yǎng)基，每孔加入200 μL 0.5 mg/mL MTT溶液，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)孵育4 h。取出96 孔板，終止培養(yǎng)，棄除孔內(nèi)培養(yǎng)基，每孔加入150 μL二甲亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO），37 ℃水平振蕩搖動(dòng)10 min，用酶標(biāo)儀測(cè)定490 nm波長(zhǎng)處的吸光度，按下式計(jì)算抑制率。對(duì)細(xì)胞增殖的抑制率達(dá)到50%時(shí)細(xì)香蔥提取物質(zhì)量濃度為其IC50值。

式中：A0為空白對(duì)照組吸光度；A1為陰性對(duì)照組吸光度；A2為實(shí)驗(yàn)組吸光度。

1.3.6 細(xì)香蔥提取物對(duì)細(xì)胞周期影響作用的測(cè)定

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人胃癌細(xì)胞SGC7901，0.25%胰蛋白酶消化，倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)，用MEM培養(yǎng)基稀釋調(diào)整細(xì)胞密度約5×105個(gè)/mL，配制成細(xì)胞懸浮液，接種于6 孔板，每孔2 mL，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)24 h，棄掉孔內(nèi)舊培養(yǎng)基，加入含有不同質(zhì)量濃度樣品的新鮮培養(yǎng)基溶液（0.0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL），每孔2 mL，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)48 h。

用不含乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）的0.25%胰蛋白酶消化細(xì)胞，終止消化后收集細(xì)胞，1 500 r/min離心5 min，去上清液，加PBS重懸潤(rùn)洗2 次，1 000 r/min離心5 min，去上清液，加入100 μL PBS重懸細(xì)胞，緩慢加入700 μL預(yù)冷的80%乙醇，使乙醇終體積分?jǐn)?shù)為70%，4 ℃固定4 h以上。1 000 r/min離心5 min，預(yù)冷PBS潤(rùn)洗2 次，加入100 μL RNAase（50 μg/mL），37 ℃水浴30 min加入400 μL碘化丙啶（propidium iodide，PI）（50 μg/mL），4 ℃避光染色30 min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.3.7 細(xì)香蔥提取物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用的測(cè)定

藥物作用同1.3.6節(jié)，用不含EDTA的0.25%胰酶消化細(xì)胞，終止消化后收集細(xì)胞，1 500 r/min，離心5 min，棄上清液，加PBS重懸；用PBS將細(xì)胞潤(rùn)洗2次，1 500 r/min，離心5 min后，棄上清液，加入500 μL Binding Buffer重懸細(xì)胞，加入5 μL AnnexinV-EITC混勻后再加入5 μL PI，輕搖混勻，室溫避光反應(yīng)5～15 min（同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照，即陰性空白組細(xì)胞不加Annexin和PI；陽(yáng)性對(duì)照1，以凋亡效果最明顯的溶劑組作為陽(yáng)性對(duì)照，只加5 μL AnnexinV單標(biāo)；陽(yáng)性對(duì)照2，以凋亡效果最明顯的溶劑組作為陽(yáng)性對(duì)照，只加5 μL PI單標(biāo)），流式細(xì)胞儀上機(jī)檢測(cè)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)香蔥提取物成分分析

表1 細(xì)香蔥提取物化學(xué)成分含量Table1 Chemical composition of chive extracts mg/g

由表1可知，細(xì)香蔥提取物中含有多種化學(xué)成分，水提物、醇提物兩種極性溶劑提取物中，糖類為主要組分，所占比例較高，醇提物中總黃酮類化合物、含硫化合物含量顯著高于其他3 種提取物；丙酮、乙酸乙酯兩種非極性溶劑提取物中總糖類、總黃酮類化合物含量較低，未檢出含硫化合物。

2.2 細(xì)香蔥提取物對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的抑制作用

采用MTT法測(cè)定細(xì)香蔥不同極性溶劑提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖的抑制作用，并通過其對(duì)腫瘤細(xì)胞半數(shù)抑制濃度（IC50）比較活性大小。細(xì)香蔥4 種不同極性溶劑提取物中水提物幾乎無(wú)細(xì)胞增殖抑制作用，在樣品質(zhì)量濃度達(dá)到2.0 mg/mL時(shí)對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901的抑制率僅為13.89%；丙酮提取物和乙酸乙酯提取物以DMSO作為助溶劑，當(dāng)溶劑中DMSO體積分?jǐn)?shù)低于0.1%時(shí)對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷作用，在DMSO體積分?jǐn)?shù)為0.1%時(shí)，細(xì)香蔥丙酮、乙酸乙酯提取物作用最高質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL時(shí)，無(wú)細(xì)胞增殖抑制作用；75%乙醇提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901的增殖具有較好的抑制作用，乙醇提取物中總黃酮類化合物和含硫化合物含量顯著高于水提物，而黃酮類化合物和含硫化合物是蔥屬植物的主要活性成分[22]，這可能促使細(xì)香蔥乙醇提取物具有較好的抗胃癌活性，推測(cè)75%乙醇提取部分是細(xì)香蔥抗胃癌活性部位。

圖1 細(xì)香蔥醇提物質(zhì)量濃度對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901的增殖抑制率Fig.1 Inhibitory rates of human gastric cancer SGC7901 cells treated with ethanol extract from chive

如圖1所示，當(dāng)細(xì)香蔥醇提物作用于對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901 24、48、72 h時(shí)，其IC50值分別為（1.28±0.59）、（0.84±0.39）、（0.63±0.44） mg/mL，隨著乙醇提取物質(zhì)量濃度的增加，其對(duì)人胃癌細(xì)胞的增殖抑制率增大，隨著乙醇提取物作用時(shí)間的延長(zhǎng)，其對(duì)人胃癌細(xì)胞的增殖抑制率增大，乙醇提取物對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用具有較好的劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。

2.3 不同細(xì)香蔥提取物對(duì)胃癌細(xì)胞增殖抑制作用的比較

選用細(xì)香蔥抗癌活性部位75%乙醇提取物進(jìn)行不同品種細(xì)香蔥抗胃癌活性差異比較。不同品種細(xì)香蔥乙醇提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖抑制作用見表2，隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)，IC50逐漸降低，對(duì)胃癌細(xì)胞的增殖抑制作用增強(qiáng)，均具有時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。

11 個(gè)細(xì)香蔥品種中3號(hào)細(xì)香蔥抑制胃癌細(xì)胞增殖作用最強(qiáng)，24、48 、72 h IC50分別為（0.88±0.07）、（0.45±0.08）、（0.21±0.03） mg/mL，與其他品種之間差異顯著（P＜0.05）。其余細(xì)香蔥部分品種間無(wú)顯著差異，如1、2、7號(hào)和8號(hào)，4、5號(hào)和6號(hào)，可能是由于提取物成分較為復(fù)雜，具有抗腫瘤活性的有效成分并非單一成分，各化合物共同作用，使得部分細(xì)香蔥品種醇提物抗胃癌活性強(qiáng)弱相當(dāng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明同一區(qū)域中細(xì)香蔥的品種對(duì)其抗胃癌活性產(chǎn)生了影響。

表2 不同品種細(xì)香蔥乙醇提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901的IC50Table2 Anti-proliferation effect of ethanol extracts from different chive cultivars on human gastric cancer SGC7901 cells

2.4 細(xì)香蔥醇提物對(duì)細(xì)胞周期影響

細(xì)胞周期分為間期（DNA合成前期G1期、DNA合成期S期與DNA合成后期G2期）與分裂期（M期）兩個(gè)階段。Gl期合成RNA和蛋白質(zhì)，S進(jìn)行DNA的復(fù)制，在G2期檢查修復(fù)DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性。細(xì)胞在M期后，有的可繼續(xù)分裂進(jìn)行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G0期，G0期細(xì)胞處于靜息狀態(tài)[23]。

從圖2、表3可以看出，與SGC7901細(xì)胞空白對(duì)照組相比，細(xì)香蔥醇提物質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL時(shí)，SGC7901細(xì)胞的G0/G1（表示從G0到G1狀態(tài)的細(xì)胞，下同）期細(xì)胞減少，S期細(xì)胞增多，G2/M期細(xì)胞不變，表明0.5 mg/mL細(xì)香蔥醇提物有一定的推進(jìn)細(xì)胞周期進(jìn)程作用，并將細(xì)胞周期阻滯在S期；細(xì)香蔥醇提物質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL時(shí)，SGC7901細(xì)胞的G0/G1期細(xì)胞減少，S期細(xì)胞增多，G2/M期細(xì)胞減少，表明1.0 mg/mL細(xì)香蔥醇提物能夠引起S期阻抑；細(xì)香蔥醇提物質(zhì)量濃度為2.0 mg/mL時(shí)，SGC7901細(xì)胞的G0/G1期細(xì)胞不變，S期細(xì)胞增多，G2/M期細(xì)胞驟減，表明2.0 mg/mL細(xì)香蔥醇提物能夠?qū)GC7901細(xì)胞周期阻滯在S期。實(shí)驗(yàn)質(zhì)量濃度條件下的細(xì)香蔥醇提物阻礙了人胃癌細(xì)胞SGC7901由S期向G2期的轉(zhuǎn)化，將細(xì)胞阻滯于S期，DNA合成受到抑制，細(xì)胞復(fù)制周期變得紊亂失控，胃癌細(xì)胞增殖速率減緩。

2.5 細(xì)香蔥醇提物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用

圖3 細(xì)香蔥醇提物作用人胃癌細(xì)胞SGC7901后Annexiinn V-FITC/PI雙染流式圖Fig.3 Flow cytometry analysis of human gastric cancer SGC7901 cells treated with ethanol extracts of chive through Annexin V-FITC/PI double staining

表4 細(xì)香蔥醇提物作用人胃癌細(xì)胞SGC7901后凋亡率Table4 Effect of ethanol extracts from chive on the apoptotic rate of human gastric cancer SGC7901 cells

采用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，結(jié)果如圖3、表4所示。空白對(duì)照組SGC7901細(xì)胞的總凋亡率是17.61%，由此看出其本身生長(zhǎng)過程中具有一定的自然凋亡率。添加細(xì)香蔥醇提物誘導(dǎo)后，與空白對(duì)照組相比，各組早期凋亡率和晚期凋亡率均有增加，特別是當(dāng)質(zhì)量濃度為2.0 mg/mL時(shí)，晚期凋亡率升高到41.54%。凋亡率隨細(xì)香蔥醇提物質(zhì)量濃度升高逐漸增大，表明細(xì)香蔥醇提物可以促進(jìn)SGC7901細(xì)胞的凋亡，且具有劑量-效應(yīng)關(guān)系。

3 討 論

已有文獻(xiàn)報(bào)道，蔥屬植物具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用[15-16,24-26]。通過MTT法篩選細(xì)香蔥活性部位，發(fā)現(xiàn)細(xì)香蔥75%乙醇提取部分對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖具有抑制作用，遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于槐耳浸膏[27]、黑加侖提取物[28]等天然產(chǎn)物，具有劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系，是細(xì)香蔥抗胃癌的活性部位。對(duì)比細(xì)香蔥不同極性溶劑提取物化學(xué)成分含量差異，發(fā)現(xiàn)75%乙醇提取物中總黃酮類化合物和含硫化合物含量顯著高于其他極性溶劑提取物，且黃酮化合物和含硫化合物均是蔥屬植物的生物活性組分[22]。因此，推測(cè)細(xì)香蔥中黃酮類化合物和含硫化合物是細(xì)香蔥抗胃癌活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。然而，本研究?jī)H對(duì)細(xì)香蔥活性部位（75%乙醇提取部分）進(jìn)行了初步成分分析，后續(xù)還需要進(jìn)一步對(duì)75%乙醇提取物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定、活性篩選及檢驗(yàn)研究。

比較同一區(qū)域11 個(gè)品種的細(xì)香蔥75%乙醇提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖IC50值，11 種提取物抗胃癌活性表現(xiàn)出品種差異?；瘜W(xué)成分是生物活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，細(xì)香蔥抗胃癌活性差異可能是因?yàn)檫z傳物質(zhì)的不同造成了細(xì)香蔥醇提物中黃酮類化合物、含硫化合物等活性成分有所差異，而天然產(chǎn)物的生物活性往往是多組分共同作用的結(jié)果，物質(zhì)基礎(chǔ)的不同導(dǎo)致了細(xì)香蔥抗胃癌活性的不同。

蔥屬植物可阻滯腫瘤細(xì)胞周期，誘導(dǎo)其凋亡，具有抗癌能力[17]。細(xì)胞周期是一個(gè)復(fù)雜有序、嚴(yán)格調(diào)控的過程，細(xì)胞通過檢查點(diǎn)（G1/S期和G2/M期及M期）進(jìn)行復(fù)制調(diào)控，細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制的失控，尤其是檢查點(diǎn)發(fā)生突變?cè)诩?xì)胞癌變過程中的作用至關(guān)重要[29]。人胃癌細(xì)胞SGC7901經(jīng)細(xì)香蔥醇提物作用后，G0/G1期基本不變，S期細(xì)胞增多，G2/M期細(xì)胞具有隨樣品質(zhì)量濃度增加而減少的趨勢(shì)，細(xì)香蔥醇提物將細(xì)胞周期阻滯在S期，降低了細(xì)胞增殖率。細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果表明，在細(xì)香蔥醇提物的刺激下，實(shí)驗(yàn)組凋亡率隨樣品質(zhì)量濃度的增加而變大，呈現(xiàn)劑量增加效應(yīng)。大蔥與細(xì)香蔥同屬蔥屬植物，在化學(xué)組成上相似，有文獻(xiàn)報(bào)道，大蔥提取物能誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞分化與凋亡，明顯抑制其增殖生長(zhǎng)，進(jìn)一步為本研究結(jié)果提供佐證[26]。

細(xì)香蔥75%乙醇提取部分是香蔥抗胃癌的活性部位，通過使人胃癌細(xì)胞SGC7901細(xì)胞分裂周期紊亂，將細(xì)胞周期阻滯在S期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，發(fā)揮抑制人胃癌細(xì)胞增殖的作用。利用細(xì)香蔥特有的生理活性開發(fā)天然抗癌功能食品，對(duì)我國(guó)細(xì)香蔥資源的深度利用具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣闊的市場(chǎng)前景。

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Inhibitory Effect of Chive Extract on the Proliferation of Human Gastric Cancer Cell Line SGC7901

YOU Yalin, LI Hui, PAN Siyi, XU Xiaoyun?
(Key Laboratory of Environment Correlative Dietology, Ministry of Education, College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)

The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and flow cytometry were used to analyze the proliferation, cell cycle and apoptosis of human gastric cancer SGC7901 cells in the presence of chive extract. Results showed that 75% ethanol extract from chive (CEE) had the highest antitumor activity among different solvent extracts. There was a significant difference in the antitumor activities of chive extracts from different cultivars of the same geographic origin (P ＜ 0.05). The 75% ethanol extract from chive cultivar No. 3 had the highest antitumor activity with IC50values at 24, 48 and 72 h of (0.88 ± 0.07), (0.45 ± 0.08), and (0.21 ± 0.03) mg/mL, respectively. The proportion of S-phase cells significantly (P ＜ 0.05) increased after treatment with this chive extract at 1.0 or 2.0 mg/mL for 48 h, indicating that CEE may inhibit cell transformation from S phase to G2phase. CEE could also induce S phase arrest. Meanwhile, the apoptosis rate in the experimental group increased significantly (P ＜ 0.05) in a dose-dependent manner when compared to the control group. Taken collectively, it is concluded that CEE is a promising natural anti-gastric cancer compound with potential applications in functional food industry for its effective inhibition on cell proliferation and cell cycle, and its promotion on cell apoptosis.

chive; anticancer activity; human gastric cancer SGC7901 cells

10.7506/spkx1002-6630-201703029

TS255.1

A

1002-6630（2017）03-0176-06

尤亞林, 李慧, 潘思軼, 等. 細(xì)香蔥提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901抑制作用[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(3)： 176-181.DOI：10.7506/spkx1002-6630-201703029. http：//www.spkx.net.cn

YOU Yalin, LI Hui, PAN Siyi, et al. Inhibitory effect of chive extract on the proliferation of human gastric cancer cell lineSGC7901[J]. Food Science, 2017, 38(3)： 176-181. (in Chinese with English abstract)

10.7506/spkx1002-6630-201703029.http：//www.spkx.net.cn

2016-06-30

公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（201303079）

尤亞林（1990—），女，碩士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物化學(xué)。E-mail：1090718797@qq.com

?通信作者：徐曉云（1970—），女，教授，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物化學(xué)。E-mail：xuxiaoyun@mail.hzau.edu.cn