段德平

（內(nèi)蒙古電子信息職業(yè)技術(shù)學(xué)院體育教學(xué)部，內(nèi)蒙古呼和浩特010070）

堅果混合飲品對訓(xùn)練引起DOMS炎癥反應(yīng)的影響

段德平

（內(nèi)蒙古電子信息職業(yè)技術(shù)學(xué)院體育教學(xué)部，內(nèi)蒙古呼和浩特010070）

由于運動量過大產(chǎn)生的遲性肌肉酸痛癥狀（DOMS）癥狀，嚴(yán)重影響人們工作和生活的狀態(tài)。本研究采用多種堅果混合制備一種運動飲品，并通過構(gòu)建動物模型和招募社區(qū)自愿者參與實驗的方式，證明所制備的運動飲品具有緩解DOMS癥狀的功效。結(jié)果表明：大鼠DOMS模型實驗中，觀察組大鼠在連續(xù)服用堅果混合飲品后，可以較對照組有效降低體內(nèi)的炎癥因子表達水平（P＜0.05）；社區(qū)自愿者實驗中，觀察組人員在連續(xù)服用堅果混合飲品后，可以較對照組有效降低體內(nèi)的炎癥因子表達水平（P＜0.05），同時通過問卷調(diào)查，觀察組人員的DOMS癥狀明顯較對照組人員發(fā)生緩解（P＜0.05）。

堅果；飲品；運動；炎癥

堅果富含營養(yǎng)成分，具有提高免疫力、抗衰老和抗腫瘤等多種生物學(xué)活性。研究指出，一周食用4次或以上的人群，慢性炎癥癥狀明顯減弱，體內(nèi)炎癥因子的表達水平會發(fā)生明顯降低[1]。關(guān)于堅果的加工研究開展深入，但多集中于零食和保健食品的開發(fā)，對于以堅果為原料開發(fā)的運動功能食品開展較少[2]。大強度耐力運動訓(xùn)練后，骨骼肌在2 h～24 h內(nèi)發(fā)生延遲性肌肉酸痛癥狀（DOMS），按壓、拍打和收縮反應(yīng)部位會產(chǎn)生明顯酸痛，需要一段時間才可以恢復(fù)，對運動員和普通人的比賽訓(xùn)練和日常生活造成一定影響[3]。DOMS屬于肌肉炎癥反應(yīng)，但發(fā)生機制并不明確，因此至今仍未有明確的改善方法[4]。由于多種堅果均具有消炎的功效，因此本研究以混合堅果為原料，制備堅果混合飲品，采用動物模型和社區(qū)居民為研究對象，研究堅果混合飲品對DOMS炎癥反應(yīng)的改善作用和對骨骼肌恢復(fù)的影響。為探討堅果混合飲品的可能作用機理，為進一步開發(fā)堅果混合飲品提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 堅果及試劑

夏威夷果、開心果、杏仁、葵花籽、核桃、芝麻、花生：當(dāng)?shù)卮笮统?；IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α檢測試劑盒：北京中生北控科技股份有限公司。

1.1.2 主要儀器

BSA224S-CW分析天平：賽多利斯；3K15離心機：德國希格瑪；CHD-6030水浴鍋：杭州HR；PT-3502PC酶標(biāo)儀：北京普天。

1.1.3 堅果混合飲品的研制

具體流程如下：堅果混合（夏威夷果、開心果、杏仁、葵花籽、核桃、芝麻、花生等量混合）—破碎—過篩—收集堅果粉，放置于干燥處備用。將堅果粉（30 g）脫脂奶粉（10 g）、乳清蛋白粉（10 g）、維生素（0.5 g）、微量元素（0.1 g）和調(diào)味劑（0.2 g）混合，配制成1份。

1.2 方法

1.2.1 堅果混合飲品對慢性炎癥動物模型的影響

選擇20只雄性Wistar大鼠分為觀察組和對照組，每組10只，均采用游泳法訓(xùn)練至力竭狀態(tài)，具體執(zhí)行方法如下：觀察組大鼠在實驗開始前7天開始灌胃服用堅果混合飲品2mL，每天服用兩次，并堅持到實驗結(jié)束。準(zhǔn)備120 cm×55 cm×65 cm玻璃缸，水溫保持（31.5±1.5）℃，水深45 cm，所有大鼠均進行負重游泳，負重重量為總體重的5%。每天進行兩次，上午8點開始，下午13點開始。在游泳訓(xùn)練過程中，當(dāng)實驗動物漂在水面不進行游泳或出現(xiàn)肢體協(xié)調(diào)性下降并沉入水中時，后需木棒驅(qū)趕促進游泳。直至下沉次數(shù)超過3次，下沉?xí)r間達到10 s，游泳訓(xùn)練結(jié)束。連續(xù)訓(xùn)練7天后，采集所有大鼠血清進行檢測。

1.2.2 堅果混合飲品對耐力運動訓(xùn)練后人體慢性炎癥反應(yīng)的影響

1.2.2.1 實驗對象選擇

上海市某社區(qū)男性居民20名，年齡（31±3.52）歲，身高（174.15±2.14）cm，體重（67.34±1.55）kg。所有入選的實驗對象具有日常鍛煉的習(xí)慣，并無任何運動損傷癥狀存在。所有入選人員隨機分為觀察組和對照組兩組，每組10人。觀察組所有人員在實驗開始時每日服用運動食品2次，每次200mL，連續(xù)服用4周至實驗結(jié)束。

1.2.2.2 耐力運動訓(xùn)練模型設(shè)計

本次實驗在社區(qū)內(nèi)商業(yè)化健身房內(nèi)進行，實驗過程中有專業(yè)教練指導(dǎo)，避免損傷發(fā)生。訓(xùn)練前一周，所有參與實驗的人員避免任何激烈運動。實驗共進行4周，第1周和第2周為適應(yīng)性訓(xùn)練，訓(xùn)練內(nèi)容以有氧運動為主，配合無氧運動，第3周開始加大運動強度，第4周進行1次適應(yīng)性訓(xùn)練后，進行1次大強度的跑步機耐力測試，測試結(jié)束后立即進行檢測。

1.2.2.3 血樣采集與檢測

在測試結(jié)束后和每周的訓(xùn)練結(jié)束后最后一天（上午9：00左右）進行血樣采集，每次采用肘靜脈采血法采集靜脈血3mL，將裝有靜脈血的試管置于37℃水浴鍋作用10min，凝集充分后離心（3 000 r/min），收集血清，放于4℃冰箱中備用。

1.2.2.4 主觀酸痛感覺問卷調(diào)查

在測試結(jié)束后和每周的訓(xùn)練結(jié)束后最后一天（上午10：00左右）進行DOMS問卷調(diào)查，根據(jù)參與實驗人員的評分結(jié)果分析耐力訓(xùn)練帶來的DOMS癥狀。評分標(biāo)準(zhǔn)如表1所示，分別對各組的總分進行比較，得分越高說明DOMS癥狀越明顯。

表1 DOMS癥狀問卷調(diào)查評分表Table1 DOMS symptoms questionnaire scale

1.8 安全性分析

兩組人員在實驗進行過程中，均為發(fā)生任何不良反應(yīng)，表明我們所制備的運動食品和所設(shè)計的實驗方案具有足夠的安全性。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS18.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件處理，計量資料進行采用t檢驗，計數(shù)資料采用x2檢驗，P＜0.05為差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 動物模型試驗結(jié)果分析

大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α表達水平分析見表2。

表2 大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α表達水平分析Table2 Analysis the expression level of IL-1β，IL-6，IL-8 and TNF-α in rats serum ng/mL

檢測結(jié)果如表2所示，通過檢測兩組模型動物血清，我們發(fā)現(xiàn)觀察組大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表達水平明顯低于對照組大鼠，并且差異顯著，P＜0.05。證明觀察組大鼠在服用本研究所制備的堅果混合飲品后，體內(nèi)炎性因子表達水平發(fā)生明顯下降。

2.2 社區(qū)自愿者4項炎癥因子表達水平分析

社區(qū)居民血清中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α表達水平分析見表3。

表3 社區(qū)居民血清中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α表達水平分析Table3 Analysis the expression level of IL-1β，IL-6，IL-8 and TNF-α in ng/mL

結(jié)果如表3所示，經(jīng)過連續(xù)4周的實驗，兩組人員血清中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表達水平均發(fā)生明顯提高，但兩組人員的增長趨勢有明顯差異。觀察組人員在連續(xù)服用堅果混合飲品后，體內(nèi)的炎癥因子表達水平得到一定程度控制，并未隨著訓(xùn)練強度增高而的顯著增高。而對照組人員由于訓(xùn)練強度的顯著增大，均產(chǎn)生一定程度的DOMS炎性癥狀，IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α4項指標(biāo)較觀察組人員發(fā)生顯著性增高，并且差異顯著，P＜0.05。

2.3 問卷調(diào)查結(jié)果分析

通過問卷調(diào)查的方式，可以直接反映出參與實驗人員對DOMS癥狀的反應(yīng)，調(diào)查結(jié)果如表4所示，對照組人員得分顯著高于觀察組人員，并且差異顯著，P＜0.05。調(diào)查得分情況與炎癥因子增長趨勢接近，說明當(dāng)DOMS癥狀逐漸加劇時，體內(nèi)的炎癥因子表達水平也發(fā)生相應(yīng)提高。

表4 問卷調(diào)查結(jié)果分析Table4 Questionnaire result analysis

3 討論

大量研究指出，運動可以改變體內(nèi)炎癥因子的表達水平，特別是長距離長時間的耐力運動，可以導(dǎo)致骨骼肌發(fā)生DMOS炎癥反應(yīng)，引起體內(nèi)炎癥因子發(fā)生顯著性升高[5]。關(guān)于DMOS炎癥反應(yīng)的研究發(fā)現(xiàn)，耐力運動后炎癥細胞在72 h內(nèi)發(fā)生急性蛋白物質(zhì)增加、溶酶體激活并且發(fā)現(xiàn)浸潤，發(fā)生TNF-α、IL-1β，IL-6和IL-8的表達水平增高，但增高趨勢仍然低于敗血癥或嚴(yán)重感染[6]。各項炎癥指標(biāo)的增高具有明顯的提示作用，如IL-1β表達水平增高，提示肌肉蛋白發(fā)生水解，暗示著肌肉發(fā)生損傷。IL-6的升高，表明肝細胞中的血漿蛋白增高，轉(zhuǎn)鐵蛋白和白蛋白的發(fā)生降低，意味著DMOS已經(jīng)造成機體組織損傷[7]。因此預(yù)防緩解DMOS的手段，具有明顯的實際應(yīng)用意義。

我國堅果資源，由于堅果含有豐富的功能性脂肪酸、功能性多糖和不飽和脂肪酸，一直是人們熱衷購買的食品[8]。研究指出，堅果中具有多種天然抗氧化劑，其中有一部屬于抗氧化劑炎癥調(diào)節(jié)劑，具有明顯的降低炎性因子表達水平的功效[9]。運動食品的開發(fā)進入精細化發(fā)展階段，對產(chǎn)品的功效要求明確[10]。在本研究中，我們采用混合制備的方法，將夏威夷果、開心果、杏仁、葵花籽、核桃、芝麻、花生多種已知具有炎癥調(diào)節(jié)功能的干果進行等量混合后粉碎，加入適量的蛋白質(zhì)和其他營養(yǎng)物質(zhì)，制備成一種運動飲品，該飲品我們認為應(yīng)具有一定的調(diào)節(jié)炎癥功能。為了驗證產(chǎn)品功能，在本研究中，我們首先通過建立大鼠DOMS模型的方式，研究堅果混合飲品的功效，結(jié)果表明觀察組大鼠在連續(xù)服用堅果混合飲品后，可以有效緩解大強度訓(xùn)練導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)，與對照組大鼠相比，緩解效果明顯，存在顯著性差異（P＜0.05）。通過動物模型試驗，我們認為堅果混合飲品具有調(diào)節(jié)DMOS炎癥反應(yīng)的功效，隨后我們開展社區(qū)自愿者試驗，進一步研究該飲品的功能。經(jīng)過一系列實驗，我們對參與實驗人員的炎癥因子水平和主觀癥狀進行研究，結(jié)果表明，隨著訓(xùn)練強度逐漸增大，觀察組運動在服用堅果混合飲品后，表現(xiàn)出明顯的炎癥調(diào)節(jié)效果，體內(nèi)炎性因子增長水平并不明顯，與對照組人員存在顯著性差距（P＜0.05）。同時，觀察組人員僅表現(xiàn)出輕微的DMOS癥狀，較對照組人員發(fā)生明顯緩解（P＜0.05）。

本研究所制備的堅果混合飲品，該飲品在大鼠動物模型和社區(qū)自愿者的研究中，均表現(xiàn)出緩解DMOS炎癥癥狀的功能，對提高運動能力，加強運動后恢復(fù)效果具有明顯的應(yīng)用價值，值得大力推廣。

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Effect of Nuts Mixed Drinks in Training Cause DOMS Inflammation Reaction

DUAN De-ping
（Department of Physical Education，Inner Mongolia Electronic Information Vocational Technical College，Hohhot010070，Inner Mongolia，China）

Due to the large amount of exercise caused late onset muscle soreness symptoms（DOMS），influence the people working and living condition seriously.This study used the many kinds of nuts，prepared a sports drink，and the animal model was constructed and recruit community volunteers to participate in the experiment，proved the preparation of sports drinks can alleviate symptoms of DOMS.Results show that the rat model of DOMS experiments，observation group rats taked nuts mixed drinks，can reduce inflammation factor expression levels effectively than the control group（P＜0.05）；In community volunteers experiments，observation group taked nuts mixed drinks，observation group rats taked nuts mixed drinks，can reduce inflammation factor expression levels effectively than the control group（P＜0.05），at the same time，through the questionnaire，the observation group of DOMS symptoms was released significantly than the control group（P＜0.05）.

nuts；drink；movement；inflammation

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.03.041

2016-09-13

段德平（1961—），男（漢），副教授，本科，學(xué)士，主要從事運動生理學(xué)、體育教學(xué)研究。