范艷麗,張博,李梓溢,仝瑤,張航,翟剛
(寧夏大學(xué),寧夏銀川750021)
紅棗核總黃酮的提取工藝及抗氧化活性研究
范艷麗,張博,李梓溢,仝瑤,張航,翟剛
(寧夏大學(xué),寧夏銀川750021)
采用Box-Behnken Design(BBD)開(kāi)展響應(yīng)面試驗(yàn),研究料液比、乙醇濃度、浸提溫度、浸提時(shí)間和提取級(jí)數(shù)五因素及其互作效應(yīng)對(duì)紅棗核總黃酮提取率的影響,確定紅棗核總黃酮的最佳提取工藝條件為:料液比1∶70(g/mL),乙醇濃度40%,浸提溫度80℃,浸提時(shí)間4 h,提取級(jí)數(shù)3次,在此條件下黃酮提取率為16.64 mg/g。此外,以BHT和VC為陽(yáng)性對(duì)照評(píng)價(jià)了提取物的抗氧化活性,結(jié)果表明在一定濃度范圍內(nèi)紅棗核總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基、羥基自由基、DPPH自由基、亞硝基離子自由基、ABTS自由基的最高清除率分別達(dá)到53%、85%、71%、68%、91%,總還原能力分別為BHT和VC的35%和36%,表明所提取的紅棗核黃酮具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性。
紅棗核;黃酮;提?。豢寡趸?/p>
紅棗又稱(chēng)華棗、大棗,是鼠李科(Rhamnaceae)棗屬植物棗(Ziziphus jujuba Mill.)的果實(shí),原產(chǎn)于我國(guó),在日本和韓國(guó)也有少量種植,主要分布在北緯23°~42.5°,東經(jīng)76°~124°之間的廣大區(qū)域[1]?,F(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究表明,紅棗中含有豐富的蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、有機(jī)酸、脂肪、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)成分以及鐵、鋅、磷、鈣、硒等微量元素,還有多種維生素如VC、VP、VA、VB1、VB2等[2-3]。隨著人們對(duì)紅棗成分及其營(yíng)養(yǎng)功效的深入研究,發(fā)現(xiàn)紅棗還含有一些具有顯著生理活性的特殊生物成分,包括紅棗多糖、黃酮、三萜類(lèi)化合物、腺苷、生物堿和甾醇等[4]。不僅如此,研究表明棗核中同樣含有大量的多酚和黃酮類(lèi)物質(zhì),且具有良好的DPPH自由基清除能力[3]和有效抑制α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶及透明質(zhì)酸酶的活性[5-6]。目前,棗核作為紅棗加工及食用后的下腳料絕大多數(shù)以廢物的形式丟棄或作為燃料被燃燒掉,未能實(shí)現(xiàn)更高附加值的資源利用。本研究以棗核為研究對(duì)象,采用乙醇提取法制備總黃酮類(lèi)化合物,通過(guò)響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化工藝參數(shù),并對(duì)其進(jìn)行體外抗氧化活性研究,以此篩選具有較強(qiáng)抗氧化能力的天然抗氧化劑,提高紅棗核利用價(jià)值,為紅棗核的開(kāi)發(fā)利用提供思路和理論依據(jù)。
1.1 材料與設(shè)備
紅棗核:由寧夏盛康源紅棗酒業(yè)生物科技有限公司提供;蘆丁、無(wú)水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、石油醚、氯化亞鐵、氯化鉀、過(guò)二硫酸鉀,均為分析純?cè)噭?/p>
RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:上海亞榮生化儀器廠;DL-5-A型臺(tái)式離心機(jī):上海安亭科學(xué)儀器廠;JDG-0.2型真空凍干試驗(yàn)機(jī):蘭州科近凍干技術(shù)有限公司;7230G可見(jiàn)分光光度計(jì):上海精密科學(xué)儀器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 紅棗核總黃酮的提取工藝研究
棗核清洗后,50℃真空干燥,粉碎過(guò)40目篩,避光貯存?zhèn)溆?。?zhǔn)確稱(chēng)取3.00 g棗核粉,以一定料液比加入乙醇溶液中,用膜封口,水浴攪拌浸提一定時(shí)間,離心取提取液,測(cè)定黃酮提取率。
1.2.1.1 響應(yīng)面試驗(yàn)
選取5個(gè)單因素,分別為料液比、乙醇濃度、浸提溫度、浸提時(shí)間和提取級(jí)數(shù),研究各單因素對(duì)黃酮提取率的影響,并確定各因素的適宜條件。根據(jù)各單因素試驗(yàn)結(jié)果,采用Box-Behnken Design(BBD)開(kāi)展響應(yīng)面試驗(yàn),研究具有顯著影響的因素之間的交互作用,擬合出多元二次回歸模型并進(jìn)行方差分析,最終確定紅棗核總黃酮的最佳提取工藝條件。
1.2.1.2 黃酮提取率的測(cè)定方法
參照徐紅艷等報(bào)道的方法[7],采用亞硝酸鈉-硝酸鋁法,以蘆丁作標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)定提取物總黃酮含量,按照公式(1)計(jì)算提取率(mg/g)。
1.2.2.2 清除羥基自由基的活性測(cè)定[9]
取5支比色管加入1mL,0.15mg/mL的鄰二氮菲溶液和2mL pH7.4的PBS緩沖溶液,混勻,之后加入0.2mg/mL的FeSO4溶液1mL搖勻。分別加入0.2mg/mL樣品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL,混勻。同時(shí)做受損傷管和空白參照管。于37℃的水浴中恒溫1 h,并在波長(zhǎng)536 nm測(cè)定受損傷管(A1)、空白參照管(A2)、樣品管(A3)和樣品參照管(A4)的吸光度值,以VC和BHT作陽(yáng)性對(duì)照,計(jì)算清除率SR(%)。
1.2.2 紅棗核總黃酮的抗氧化活性研究
1.2.2.1 清除超氧陰離子自由基的活性測(cè)定[8]
取0.05mol/LTris-HCl緩沖溶液(pH8.2)5mL,置于25℃水浴中預(yù)熱20min后,分別加入1mL不同濃度的試樣溶液,混勻后加入25℃預(yù)熱的3mmol/L鄰苯三酚溶液0.5mL,混勻后于25℃水浴中反應(yīng)5min,加入8mmol/L鹽酸1mL終止反應(yīng),在299 nm處測(cè)定溶液的吸光度Ai,同時(shí)測(cè)定空白對(duì)照組吸光度A0。以0.5mL的蒸餾水代替鄰苯三酚溶液,在299 nm處測(cè)得的吸光度為Aj,以VC和BHT為對(duì)照。由公式(2)計(jì)算清除率SR(%)。
1.2.2.3 清除DPPH自由基的活性測(cè)定[10]
準(zhǔn)確稱(chēng)取DPPH 0.008 0 g,用無(wú)水乙醇定容于100mL的容量瓶,配制成2.0×10-4mol/L的溶液。量取2mL樣品溶液分別放于10mL比色管,加入2mL無(wú)水乙醇溶液混勻,避光靜置60min,在波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定其吸光度,其值記為Aj,再分別量取樣品溶液和DPPH溶液各2mL置于比色管,振蕩混勻避光靜置60min,在波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定其吸光度,其值記為Ai;然后再量取無(wú)水乙醇溶液和DPPH溶液各2mL置于比色管,混勻避光靜置60min,在波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定其吸光度,其值記為A0,以VC、BHT作陽(yáng)性對(duì)照。由公式(3)計(jì)算得出其清除率SR(%)。
1.2.2.4 清除亞硝基離子的活性測(cè)定[11]
將0.2mg/mL的樣品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL分別加入比色管中,分別加入5μg/mLNaNO2溶液1mL,置于37℃水浴鍋中恒溫30min,加入0.4%對(duì)氨基苯磺酸1mL,充分混勻后靜置5min,再加入0.2%鹽酸萘乙二胺0.5mL,混合均勻后加70%乙醇定容,靜置15min,在540 nm處測(cè)定各樣品管吸光度記為A1,以蒸餾水做空白測(cè)定吸光度值記為A0,同時(shí)以VC和BHT為陽(yáng)性對(duì)照。由公式(4)計(jì)算得出清除率SR(%)。
1.2.2.5 清除ABTS自由基的活性測(cè)定[12]
將ABTS用蒸餾水配制成濃度為7mmol/L的溶液,然后與等體積的濃度為2.45mmol/L過(guò)硫酸鉀溶液混合均勻后,避光、4℃條件下放置12 h~16 h。用蒸餾水稀釋ABTS溶液使其在734 nm下的吸光值在0.7± 0.02之間,取ABTS溶液(吸光度在0.7±0.02內(nèi))3.9mL加入到不同濃度的0.1mL樣品溶液中,搖勻,在室溫下放置6min,于734 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。用蒸餾水代替產(chǎn)物作為空白對(duì)照,同時(shí)以VC和BHT為陽(yáng)性對(duì)照。由公式(5)計(jì)算得出其清除率SR(%)。式中:A0為空白管的吸光值;A1為產(chǎn)物吸光值。
1.2.2.6 總還原能力的測(cè)定[13]
分別量取1mL不同濃度的樣品溶液置于比色管中,分別加入0.2mol/L的磷酸鈉緩沖液(pH 6.6)2.5mL和1%鐵氰化鉀溶液2.5mL,充分混勻后將試管放于50℃水浴中恒溫20min,再向其中分別加入10%三氯醋酸溶液2.5mL,3 000 r/min離心10min。分別取上清液2.5mL,加入蒸餾水2.5mL和0.1%FeCl3溶液1mL,振蕩混勻靜置10min,于波長(zhǎng)700 nm處測(cè)定其吸光度,由吸光度的大小來(lái)判斷還原能力的強(qiáng)弱,吸光度越高,還原能力越強(qiáng)。
2.1 響應(yīng)面法優(yōu)化紅棗核總黃酮提取工藝
2.1.1 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果
在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,采用料液比1∶70(g/mL)、提取級(jí)數(shù)3次,以乙醇濃度(X1)、浸提時(shí)間(X2)、浸提溫度(X3)3個(gè)因素作為自變量,黃酮的提取率作為響應(yīng)值(Y)。根據(jù)Box-Behnken Design(BBD)試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理制定因素水平表(見(jiàn)表1)。
采用Design Expertv8.0.7.0軟件進(jìn)行三因素三水平的Box-Behnken Design(BBD)試驗(yàn)設(shè)計(jì)。整個(gè)試驗(yàn)設(shè)計(jì)在中心點(diǎn)處共有17組試驗(yàn),試驗(yàn)隨機(jī)完成,結(jié)果見(jiàn)表2。
表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平表Table1 Variables and levels in the response surface design
表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table2 Response surface Box-Behnken design arrangement and experimental results
2.1.2 二次多元回歸模型的建立與方差分析
響應(yīng)面回歸模型的方差分析及顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 響應(yīng)面回歸模型的方差分析及顯著性檢驗(yàn)Table3 Variances analysis and significance test for the created regression model
續(xù)表3響應(yīng)面回歸模型的方差分析及顯著性檢驗(yàn)Continue table3 Variances analysis and significance test for the created regression model
分別對(duì)X1、X2、X3各因素和響應(yīng)值Y進(jìn)行回歸擬合,得到黃酮提取率(Y)的二次多元回歸方程如下:
由表3方差分析可知,提取率回歸模型P=0.020 2<0.05表明模型是顯著的,一次項(xiàng)X2(浸提時(shí)間)=0.033 0<0.05有顯著影響,二次項(xiàng)X3(浸提溫度)=0.000 6<0.01有高度顯著影響,交互項(xiàng)對(duì)回歸模型影響不顯著,回歸模型失擬項(xiàng)P=0.193 1>0.05不顯著,說(shuō)明該回歸模型能夠很好的擬合試驗(yàn)結(jié)果。此外,影響紅棗核總黃酮提取率的各因素按照影響大小排序依次為X2(浸提時(shí)間)>X3(浸提溫度)>X1(乙醇濃度)。
2.1.3 各因素交互作用的響應(yīng)面分析
圖1~圖3分別為乙醇濃度、浸提溫度、浸提時(shí)間三因素交互作用對(duì)紅棗核總黃酮提取率的響應(yīng)曲面圖。
圖1 乙醇濃度與浸提溫度對(duì)紅棗核總黃酮提取率影響的響應(yīng)面圖Fig.1 Response surface reflecting the interactive effects of ethanol concentration and extraction temperature on the yield of total flavonoids from Chinese jujube seeds
圖2 乙醇濃度與浸提時(shí)間對(duì)紅棗核總黃酮提取率影響的響應(yīng)面圖Fig.2 Response surface reflecting the interactive effects of ethanol concentration and extraction time on the yield of total flavonoids from Chinese jujube seeds
圖3 浸提溫度與浸提時(shí)間對(duì)紅棗核總黃酮提取率影響的響應(yīng)面圖Fig.3 Response surface reflecting the interactive effects of extraction temperature and extraction time on the yield of total flavonoids in Chinese jujube seed
當(dāng)浸提時(shí)間一定時(shí),乙醇濃度與浸提溫度對(duì)紅棗核總黃酮提取率的交互影響如圖1所示??梢钥闯觯?dāng)乙醇濃度一定時(shí),隨著浸提溫度的增加,紅棗核黃酮提取率呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。當(dāng)浸提溫度低于80℃時(shí),黃酮提取率隨著乙醇濃度的增大而增大;當(dāng)浸提溫度大于80℃時(shí),黃酮提取率隨著乙醇濃度的增加而增大。而當(dāng)浸提溫度一定時(shí),黃酮提取率隨乙醇濃度變化范圍不大。
當(dāng)浸提溫度一定時(shí),乙醇濃度與浸提時(shí)間對(duì)紅棗核總黃酮提取率的交互影響如圖2所示??梢钥闯?,當(dāng)乙醇濃度一定時(shí),隨著浸提時(shí)間的增加,黃酮提取率顯著增加;當(dāng)浸提時(shí)間一定時(shí),黃酮提取率隨著乙醇濃度的增大僅有小幅變化,表明延長(zhǎng)浸提時(shí)間,能夠有效提高紅棗核黃酮提取率。
當(dāng)乙醇濃度一定時(shí),浸提溫度與浸提時(shí)間對(duì)紅棗核總黃酮提取率的交互影響如圖3所示??梢钥闯?,當(dāng)浸提溫度一定時(shí),隨著浸提時(shí)間的增加,紅棗核總黃酮提取率呈現(xiàn)上升趨勢(shì),尤其在80℃附近顯著增加;當(dāng)浸提時(shí)間一定時(shí),黃酮得率隨浸提溫度的升高先增加后降低。因此表明,一定程度上增加浸提時(shí)間并控制浸提溫度于80℃,能夠提高黃酮提取率。
2.1.4 最佳工藝參數(shù)的確定與模型驗(yàn)證
通過(guò)紅棗核總黃酮提取率的二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型,由軟件分析得到紅棗核總黃酮的最佳提取工藝條件為:乙醇濃度40.74%,浸提溫度為79.52℃,浸提時(shí)間3.54 h,黃酮理論提取率為16.550 2mg/g,95%置信區(qū)間為13.662 4mg/g~19.437 9mg/g??紤]到實(shí)際操作問(wèn)題,最終確定紅棗核總黃酮提取工藝條件為:乙醇濃度40%,浸提溫度80℃,浸提時(shí)間4 h。以此參數(shù)進(jìn)行3組平行驗(yàn)證試驗(yàn),測(cè)得黃酮提取率為16.64mg/g,與理論值基本一致,說(shuō)明方程與實(shí)際情況擬合較好,所建模型適用于提取紅棗核黃酮的工藝條件。
2.2 紅棗核總黃酮的抗氧化活性評(píng)價(jià)
2.2.1 對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用
紅棗核總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用見(jiàn)圖4。
圖4 紅棗核總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用Fig.4 Scavenging effect of total flavonoids from Chinese jujube seed on superoxide anion
試驗(yàn)結(jié)果顯示,當(dāng)樣品濃度小于0.4mg/mL時(shí),紅棗核總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基的清除效果優(yōu)于BHT和VC。當(dāng)樣品濃度大于0.4mg/mL時(shí),紅棗核黃酮和BHT對(duì)超氧陰離子自由基的清除率都趨于穩(wěn)定,而VC的清除率明顯增加。紅棗核黃酮對(duì)超氧陰離子自由基的最大清除率達(dá)53%。
2.2.2 對(duì)羥基自由基的清除作用
紅棗核總黃酮對(duì)羥基自由基的清除作用見(jiàn)圖5。
如圖5所示,紅棗核黃酮、VC和BHT對(duì)羥基自由基均具有顯著的清除作用,但紅棗核黃酮的清除作用較VC和BHT略低,但最大清除率仍達(dá)到85%。
2.2.3 對(duì)DPPH自由基的清除作用
紅棗核總黃酮對(duì)DPPH自由基的清除作用見(jiàn)圖6。
如圖6所示,在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi),紅棗核黃酮對(duì)DPPH自由基的清除效果低于VC,但隨濃度的增加,紅棗核黃酮的清除效果趨近BHT的清除效果,對(duì)DPPH自由基的最大清除率達(dá)71%,表明紅棗核黃酮對(duì)DPPH自由基具有明顯的清除效果。
圖5 紅棗核總黃酮對(duì)羥基自由基的清除作用Fig.5 Scavenging effect of total flavonoids from Chinese jujube seed on·OH
圖6 紅棗核總黃酮對(duì)DPPH自由基的清除作用Fig.6 Scavenging effect of total flavonoids from Chinese Jujube seed on DPPH radical
2.2.4 對(duì)亞硝基離子的清除作用
紅棗核總黃酮對(duì)亞硝基離子的清除作用結(jié)果見(jiàn)圖7。
圖7 紅棗核總黃酮對(duì)亞硝基離子的清除作用Fig.7 Scavenging effect of total flavonoids from Chinese jujube seed on nitrite ion
試驗(yàn)表明(如圖7),在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)BHT對(duì)亞硝基離子的清除率較低,紅棗核黃酮和VC對(duì)亞硝基離子具有顯著的清除效果。其中,VC對(duì)亞硝基離子的清除效果優(yōu)于紅棗核黃酮,紅棗核黃酮對(duì)亞硝基離子的最大清除率為68%。
2.2.5 對(duì)ABTS自由基的清除作用
紅棗核總黃酮對(duì)ABTS自由基的清除作用見(jiàn)圖8。
圖8 紅棗核總黃酮對(duì)ABTS自由基的清除作用Fig.8 Scavenging effect of total flavonoids from Chinese jujube seed on ABTS radical
研究發(fā)現(xiàn)(如圖8),紅棗核黃酮、VC和BHT對(duì)ABTS自由基均具有顯著的清除作用。在試驗(yàn)濃度內(nèi),VC和BHT對(duì)ABTS自由基的清除效果優(yōu)于紅棗核黃酮,但紅棗核黃酮對(duì)ABTS自由基的清除率隨濃度的增加顯著增高。在0.5mg/mL時(shí),紅棗核黃酮對(duì)ABTS自由基的清除率趨近于VC和BHT,達(dá)最大清除率91%。2.2.6紅棗核總黃酮的總還原能力
紅棗核總黃酮的總還原能力試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖9。
圖9 紅棗核總黃酮的總還原能力Fig.9 Ferric reducing ability of total flavonoids from Chinese jujube seed
如圖9所示,紅棗核黃酮在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)和VC、BHT一樣隨濃度的升高,總還原能力增強(qiáng),但始終低于VC和BHT的總還原能力。當(dāng)紅棗核黃酮濃度達(dá)0.3mg/mL時(shí),其總還原能力趨于穩(wěn)定,其總還原能力最大達(dá)到BHT的35%,VC的36%。
1)以提取率(Y)為指標(biāo),采用BBD試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法得出紅棗核黃酮提取工藝參數(shù)的回歸方程為:Y=16.05+0.097X1+1.05X2+0.38X3+0.017X1X2-0.62X1X3-0.11X2X3-0.78X12-0.16X22-3.18X32
對(duì)該模型進(jìn)行方差和顯著性分析,最終得到最優(yōu)提取條件為:料液比1∶70(g/mL),乙醇濃度40%,浸提溫度80℃,浸提時(shí)間4 h,提取級(jí)數(shù)3次。在此工藝條件下黃酮提取率為16.64mg/g。
2)在一定濃度范圍內(nèi)紅棗核總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基、羥基自由基、DPPH自由基、亞硝基離子自由基、ABTS自由基的最高清除率分別達(dá)到53%、85%、71%、68%、91%,總還原能力分別是BHT和VC的35%和36%,表明紅棗核總黃酮提取物具有較強(qiáng)的體外抗氧化能力。
[1]雷昌貴,陳錦屏,盧大新.紅棗的營(yíng)養(yǎng)成分及其保健功能[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2006,6(3):56-57,62
[2]張吉祥,歐來(lái)良.棗核總黃酮的微波輔助提取工藝優(yōu)化[J].食品科學(xué),2012,33(16):45-49
[3]張春蘭,張銳利,張建花,等.棗核中黃酮類(lèi)化合物的提取工藝[J].食品研究與開(kāi)發(fā),2011,32(9):33-36
[4]張吉祥,歐來(lái)良.正交試驗(yàn)法優(yōu)化超聲提取棗核總黃酮[J].食品科學(xué),2012,33(4):18-21
[5]張志國(guó),陳錦屏,邵秀芝,等.紅棗核類(lèi)黃酮清除DPPH自由基活性研究[J].食品科學(xué),2007,28(2):67-70
[6]劉杰超,張春嶺,劉慧,等.超臨界CO2萃取棗核多酚工藝優(yōu)化及其生物活性[J].食品科學(xué),2013,34(22):64-69
[7]徐紅艷,包怡紅.響應(yīng)面法優(yōu)化胡桃楸種仁殼總黃酮微波提取工藝[J].食品科學(xué),2013,34(18):32-35
[8]吳玉蘭.金櫻子總黃酮對(duì)氧化損傷HUVEC保護(hù)作用的研究[D].衡陽(yáng):南華大學(xué),2012:15
[9]崔玨,李超,王乃馨,等.大葉金花草總黃酮的抗氧化活性研究[J].中國(guó)食品添加劑,2011(4):117-120
[10]李鉉軍,崔勝云.抗壞血酸清除DPPH自由基的作用機(jī)理[J].食品科學(xué),2011(1):86-90
[11]李彩霞,李復(fù)興,李鵬,等.國(guó)槐葉黃酮的抗氧化活性研究[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā),2013,25(5):676-680,683
[12]徐紅艷,褚鳳艷,包怡紅.胡桃楸種仁殼黃酮的純化及抗氧化性研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(22):113-118,122
[13]楊桂林,胡祥宇,袁葉飛,等.青果總黃酮體外抗氧化作用研究[J].瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2012,35(4):397-398
Study on Extraction Process and Anti-oxidative Activity of Total Flavonoids from Chinese Jujube Seeds
FAN Yan-li,ZHANG Bo,LI Zi-yi,TONG Yao,ZHANG Hang,ZHAI Gang
(Ningxia University,Yinchuan 750021,Ningxia,China)
The extraction effects of solid to liquid ratio,ethanol concentration,extraction temperature,extraction time,extraction times and their interaction on total flavonoids from Chinese jujube seeds were studied using response surface methodology by Box-Behnken Design(BBD).The optimum extracting condition of total flavonoids was ascertained as solid to liquid ratio1∶70(g/mL),ethanol concentration 40%,extraction temperature 80℃,extraction time 4 h and 3 times,and the extraction rate of total flavonoids on this condition was 16.64mg/g.Moreover,the antioxidant activity of the product was evaluated taking VCand BHT as positive controls.The results showed that the optimum scavenging rate of the product on oxygen free radical,hydroxyl radicals,DPPH free radicals,nitroso ion and ABTS radicals was 53%,85%,71%,68%and 91%respectively,and the total reductive ability was 35% of BHT and 36%of VC,revealing the significant antioxidant activity of the extracted flavonoids from Chinese jujube seeds in vitro.
Chinese jujube seeds;flavonoids;extraction;anti-oxidation
10.3969/j.issn.1005-6521.2017.03.021
2016-05-14
寧夏大學(xué)科學(xué)研究基金項(xiàng)目(ZR1437)
范艷麗(1980—),女(漢),副教授,博士,研究方向:生物資源利用與開(kāi)發(fā)。