馬雙昆，石永杰

（安陽市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 安陽 455000）

豬支原體肺炎自然病例的臨床觀察和病理學(xué)研究

馬雙昆，石永杰

（安陽市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 安陽 455000）

豬支原體肺炎（MPS）又叫豬氣喘?。ɑ虼瓪獠。?，病原體是豬肺炎支原體（MHP），該病具有高發(fā)病率，低死亡率的特點，是一種慢性呼吸道傳染病。目前豬支原體肺炎在大多數(shù)養(yǎng)豬國家均有報道，豬群中感染豬肺炎支原體的概率在35%～80%，對養(yǎng)豬行業(yè)的發(fā)展帶來了十分嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

豬肺炎支原體是一種沒有細(xì)胞壁的，較小的，呈點狀、球狀、桿狀和多形態(tài)的微生物。該菌不易著色，革蘭氏染色陰性，用姬姆薩和瑞特氏染色良好。同時能在無細(xì)胞的人工培養(yǎng)基上生長，但要求必須有嚴(yán)格的培養(yǎng)條件，生長發(fā)育極為困難，分離用的培養(yǎng)基大多是組織培養(yǎng)平衡鹽類溶液，加入乳清蛋白水解物、酵母浸出物及豬血清，培養(yǎng)材料中必須沒有其他支原體存在。該菌適合在37℃有氧條件下培養(yǎng)。在接種后需要培養(yǎng)7～10 d，因為該菌在固體培養(yǎng)基上生長緩慢，只有這樣才能用肉眼觀察到針尖大小露珠狀、中央隆起、邊緣整齊的小菌落。有些老齡菌落中心稍凹陷，不像一般支原體的“荷包蛋”狀菌落。

豬支原體肺炎一旦在某地或某養(yǎng)殖場發(fā)生，慢性或隱性感染豬的癥狀不明顯或沒有癥狀，但長期帶菌成為傳染源，進(jìn)而傳染給其他易感豬群，導(dǎo)致該病長期在各地廣泛流行卻無法得到有效控制，造成這樣結(jié)果的根本原因，則是豬肺炎支原體不易分離培養(yǎng)，很難做出準(zhǔn)確的診斷。豬肺炎支原體只有在疾病的初級階段具有高度靈敏性，病原數(shù)量在整個疾病的發(fā)展過程中也會逐漸下降，所以目前臨床實踐中對該病的診斷主要依靠對其臨床癥狀觀察及流行病學(xué)調(diào)查和病理學(xué)變化的研究。

1 材料和方法

1.1 材料

安陽地區(qū)部分發(fā)病豬場和散養(yǎng)戶豬群中自然感染豬支原體肺炎的病例，病死或處死后，在無菌條件下采其肺臟、肝臟、腎臟等。

1.2 流行病學(xué)調(diào)查

通過對發(fā)病豬場及散養(yǎng)村組進(jìn)行深入調(diào)查，以及與養(yǎng)殖場獸醫(yī)防疫員交談等方法，對自然感染豬支原體肺炎的發(fā)病地區(qū)進(jìn)行疫情來源及流行情況調(diào)查與分析，包括發(fā)病的年齡、數(shù)量、感染率及發(fā)病率、病死率等內(nèi)容，同時通過結(jié)合疫病流行的傳播方式和途徑、豬群的飼養(yǎng)管理方法等，詳細(xì)了解和掌握發(fā)生豬支原體肺炎的基本情況。

1.3 典型病例的臨床診斷和病理學(xué)診斷

在此次調(diào)查研究中選擇臨床癥狀比較明顯的病例，觀察其個體及群體發(fā)病的具體臨床表現(xiàn)，并進(jìn)行詳細(xì)的文字和圖片記錄，通過X射線透視胸肺部，觀察記錄其病理變化。對發(fā)病豬只進(jìn)行剖檢，觀察并記錄各組織器官的病變特點，并從其支氣管、肺、肝臟、脾、腎、心臟等部位采集病理材料，于100 ml/L中性甲醛溶液中進(jìn)行固定，之后進(jìn)行石蠟包埋切片，最后HE染色，鏡檢，觀察各組織器官最典型的組織學(xué)變化。

2 結(jié)果與分析

2.1 流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

對安陽地區(qū)發(fā)病的2個大型豬場及部分養(yǎng)殖戶進(jìn)行豬支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)查及通過臨床觀察、X射線胸透、病理剖檢和病原分離鑒定等方法確診為豬支原體肺炎。結(jié)果表明，不同年齡、性別和品種的豬都能感染豬支原體肺炎，但其中哺乳仔豬及幼齡豬的發(fā)病率及病死率最高，此病一旦爆發(fā)則會導(dǎo)致仔豬生長發(fā)育緩慢，最后成為“僵豬”；其次是哺乳和妊娠后期母豬，種豬及育肥豬發(fā)病率及病死率最低，并且多是隱性感染，一般情況下沒有明顯的臨床癥狀，只有通過X射線透視及病原鑒定進(jìn)行診斷。

2.2 臨床癥狀調(diào)查結(jié)果

在試驗過程中通過觀察臨床癥狀比較典型的病例，尤其是哺乳期仔豬，主要表現(xiàn)為突然精神沉郁，頭下垂，離群獨立或伏臥于地，呼吸次數(shù)逐漸增加，多呈腹式呼吸，咳嗽次數(shù)少而低沉，體溫一般正常，最后往往會引起其他細(xì)菌性或病毒性的繼發(fā)感染，主要表現(xiàn)全身癥狀加重，體溫逐漸升高，且致死率也明顯升高。母豬、幼齡豬及育肥豬主要表現(xiàn)為慢性經(jīng)過，臨床癥狀有精神沉郁，采食量明顯下降，機(jī)體逐漸消瘦。與同群豬相比，生長發(fā)育明顯受阻，最后形成“僵豬”；病豬常在清晨、夜晚運動后或進(jìn)食后發(fā)生咳嗽，由輕到重，繼而呈現(xiàn)不同程度的呼吸困難。通過X線透視肺部發(fā)現(xiàn)局限性片狀模糊陰影。

2.3 病理剖檢

尸體剖檢過程中通過肉眼觀察到病變的主要部位在肺部。其出現(xiàn)肺高度膨大，被膜緊張，幾乎充滿整個肺腔，同時伴有不同程度的水腫、氣腫，并且肺部顏色變?yōu)榛野?、灰紅、橘紅色等，肺門和縱膈淋巴結(jié)明顯腫大、質(zhì)硬、灰白色等急性病理表現(xiàn)；慢性病例則表現(xiàn)出肺臟的尖葉、心葉、中間葉膈葉前緣甚至一側(cè)或整個肺臟呈“肉樣”或“蝦肉樣”實質(zhì)性變化。

在病理剖檢過程中發(fā)現(xiàn)肝臟體積增大，并且表現(xiàn)有色澤灰黃，渾濁無光澤，邊緣鈍圓，質(zhì)地較軟脆，結(jié)構(gòu)模糊等癥狀。腎臟也發(fā)生輕微變化，表現(xiàn)為腫大，顏色褐黃，切面隆起，邊緣外翻，質(zhì)地較軟等病理變化。個別病例脾臟出現(xiàn)不同程度的腫大，質(zhì)地變軟脆。還有的病例皮下有大面積出血點，胃腸腔內(nèi)出現(xiàn)不同程度的膨脹性臌氣。引起這些病理變化的因素可能與其他細(xì)菌或病毒混合感染及胃腸內(nèi)容物異常發(fā)酵有關(guān)。

2.4 病理組織學(xué)變化結(jié)果

大量的粉紅色漿液及巨噬細(xì)胞、紅細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤出現(xiàn)在細(xì)支氣管腔內(nèi)，同時在細(xì)支氣管內(nèi)發(fā)現(xiàn)有炎性分泌物，周圍微血管出現(xiàn)充血的現(xiàn)象及淋巴細(xì)胞增生的癥狀，細(xì)支氣管周圍及組織間隙可見多層的淋巴細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，同時有的病例尚有數(shù)量不等的酸性粒細(xì)胞，形成所謂的“套管現(xiàn)象”。在進(jìn)行病理學(xué)研究時發(fā)現(xiàn)肺泡壁增厚，毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，肺泡腔內(nèi)有大量漿液、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和少量的酸性粒細(xì)胞的存在。可見有少量的酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤出現(xiàn)在脾臟組織間隙內(nèi)。同時肝細(xì)胞的病理學(xué)組織變化主要表現(xiàn)在肝臟的中央靜脈擴(kuò)張，肝細(xì)胞腫脹，發(fā)生顆粒變性，胞漿淡染，胞漿內(nèi)可見大量的蛋白質(zhì)顆粒。

3 討論

3.1 豬支原體肺炎的病原學(xué)

肺炎支原體的生長需要嚴(yán)格的條件，雖然能夠在無細(xì)胞培養(yǎng)基上生長，但一般不容易從組織器官中分離培養(yǎng)出支原體，即使能分離出來也需要大量時間，不適合豬場的生產(chǎn)與發(fā)展。在臨床上豬支原體肺炎多數(shù)呈慢性經(jīng)過，主要表現(xiàn)為全身癥狀不明顯，缺乏特異性的臨床癥狀，給臨床診斷帶來一定的難度。在臨床試驗中X射線檢查作為檢查的一種輔助方法，對該病的診斷有重要價值，但不同階段的病例，其病變陰影有很大區(qū)別，有時會給臨床診斷帶來一定的困惑。長期以來，流行病學(xué)調(diào)查及病理組織學(xué)變化一直是人們作為診斷豬支原體肺炎的一項重要依據(jù)。

3.2 流行病學(xué)

該病的發(fā)病特點為一年四季均可發(fā)生，但以冬春寒冷季節(jié)發(fā)病較多，新發(fā)病區(qū)內(nèi)豬群常表現(xiàn)為突然爆發(fā)，多呈急性經(jīng)過，老疫病區(qū)多為慢性經(jīng)過。在豬場內(nèi)自然感染情況下，引起病勢加劇和病豬死亡的重要原因之一是繼發(fā)感染。該病只感染豬。哺乳仔豬和斷乳仔豬為易感動物，懷孕母豬次之，育肥豬和種豬發(fā)病較少。我國地方土種豬與雜種豬和純種豬比較起來發(fā)病率高。該病的病原體主要存在于病豬肺的細(xì)支氣管和支氣管上皮細(xì)胞表面和纖毛上，隨病豬咳嗽、氣喘和噴嚏的飛沫排出體外。如果在此情況下病豬與健康豬同圈、同運動場或同地放牧直接接觸時，會經(jīng)呼吸道引起該病的傳播與發(fā)展。因此，如果該豬場通風(fēng)設(shè)備不好，飼養(yǎng)密度過大以及圈舍衛(wèi)生條件差等都容易引起病原體的互相傳染。該病的主要傳染源是病豬和隱性帶菌豬，其中最大的傳染源是隱性帶菌豬，隱性病豬沒有明顯的臨床癥狀，不仔細(xì)觀察很難辨別?，F(xiàn)實生產(chǎn)中，有時對有輕微的咳嗽氣喘病豬根本不當(dāng)回事，因此造成的經(jīng)濟(jì)損失更大。在生產(chǎn)過程中吃奶小豬會通過病母豬受到感染，母子傳遞的現(xiàn)象可長期存在；在產(chǎn)仔季節(jié)，一般豬場內(nèi)會導(dǎo)致幾窩小豬互相串群，或斷奶后混群育肥，從而造成病原體相互傳染，使該病在豬群中長期存在。雖然后期對病豬進(jìn)行過很好的治療，但是有些病原體在病豬的癥狀消失后半年或者一年，仍然會在其體內(nèi)發(fā)現(xiàn)病原體的存在，結(jié)果就會引起其他健康豬群的大批量感染。因此，一個豬場如果想徹底凈化，減少其經(jīng)濟(jì)損失就必須狠下決心，采取嚴(yán)格的綜合防治措施。豬場內(nèi)飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生條件不良導(dǎo)致該病的發(fā)生以及病情的加重，比如飼料質(zhì)量差，在飼糧中缺乏維生素或飼喂過程中突然更換飼料，以及圈舍環(huán)境陰暗潮濕，圈舍內(nèi)擁擠造成通風(fēng)不良，豬只的長途運輸以及寄生蟲病等都可促進(jìn)病情加重，這種環(huán)境為繼發(fā)細(xì)菌感染創(chuàng)造了良好的條件，從而加快病情的發(fā)展，甚至引起死亡，導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

3.3 流行病學(xué)檢查

流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，豬支原體肺炎主要侵害哺乳仔豬、幼齡豬及成年豬，而成年豬多呈隱性感染。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，由于從外地買豬時檢疫不合格，致使豬支原體肺炎病豬感染其他豬群從而引起豬支原體肺炎突然爆發(fā)。另外，良好的飼養(yǎng)條件和完善的管理方式對該病的發(fā)生也起著十分重要的作用。一般來說，圈舍衛(wèi)生條件差、消毒不徹底或飼養(yǎng)密度過大、日糧搭配不合理及散養(yǎng)戶等都會造成該病的發(fā)病率較高；在豬場的生產(chǎn)實踐中對圈舍經(jīng)常消毒、進(jìn)行良好的通風(fēng)、保持得當(dāng)?shù)娘曫B(yǎng)管理方法則該病的發(fā)生會逐漸減少。

3.4 病理組織學(xué)檢查

對自然感染病例的病理學(xué)觀察結(jié)果表明肺臟特征性的肉眼及組織學(xué)變化是支原體肺炎主要的病變所在，此外，肝臟、脾臟、腎臟等均有炎癥表現(xiàn)，在顯微鏡下表現(xiàn)有細(xì)胞顆粒變性。在與自然病例對比之后發(fā)現(xiàn)，人工感染豬支原體肺炎的一些病例主要表現(xiàn)為右心室肥大，心包有較多積液，心肌顏色變淡的病理變化。然而在自然病例中尚未見此種明顯的變化，這種變化的出現(xiàn)可能與感染程度及個體差異有關(guān)。

3.5 PCR技術(shù)檢測

在豬肺炎支原體的檢測方面，目前國內(nèi)外發(fā)展較快的檢測技術(shù)是PCR技術(shù)，尤其是套式PCR，具有靈敏度高、經(jīng)濟(jì)價值高、特異性強(qiáng)且對擴(kuò)增產(chǎn)物可進(jìn)行測序等優(yōu)點，所以比較其他PCR技術(shù)有更好的性能。但是PCR技術(shù)對條件的要求較高，抑制劑的干擾可能會引起出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。因此，迫切要求科研人員研究出更高效、更靈敏，更具實用價值的檢測方法和檢測試劑盒。只有這樣豬支原體肺炎才能更快捷地得到診斷和防控。

4 結(jié)論

通過對豬支原體肺炎的臨床觀察和病理學(xué)研究分析發(fā)現(xiàn)，減少豬支原體肺炎在豬群間的傳播的主要途徑是控制傳染源。豬支原體肺炎的臨床診斷要快速、準(zhǔn)確。這不僅對感染支原體肺炎的動物具有十分重要的作用，同時對未感染的動物及時采取有效的防治措施具有重要的意義。

S858.28

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1004-5090（2017）06-0046-03

2017-03-15）