韓慶彬，張 瓊，張 川，姜愛芳

（商丘市動物疫病預防控制中心，河南 商丘 476100）

商丘市規(guī)模養(yǎng)殖場秋季免疫抗體監(jiān)測情況分析

韓慶彬，張 瓊，張 川，姜愛芳

（商丘市動物疫病預防控制中心，河南 商丘 476100）

免疫抗體監(jiān)測是動物接種疫苗后通過血清學的方法對其進行抗體水平的測定，依據(jù)抗體檢測結果來檢驗免疫的效果，是評價疫苗質(zhì)量、評估免疫程序是否科學合理、了解畜禽健康狀況及其對疫病抵抗能力的重要方法。為了確保商丘市規(guī)模養(yǎng)殖場的免疫質(zhì)量，及時發(fā)現(xiàn)并分析免疫過程中存在的問題，筆者對商丘市9個縣區(qū)秋季集中免疫后抽檢的規(guī)模養(yǎng)殖場的血清樣本進行了抗體檢測，并對結果進行了初步分析和探討，以期為當?shù)氐闹卮髣游镆卟》揽毓ぷ魈峁┮欢ǖ膮⒖肌?/p>

1 材料

1.1 樣品來源

檢測的血清樣品分別采自商丘市所轄的9個縣區(qū)（分別用SQ1-SQ9表示），每個縣采集1個規(guī)模豬場、1個規(guī)模牛場或羊場、1個規(guī)模雞場，每個規(guī)模場采集30頭（只）的血樣。豬的每份血清樣品平均分成4份，雞的每份血清樣品平均分成3份，牛的每份血清樣品平均分成2份，羊的每份血清樣品平均分成3份，所有畜禽的每個血清樣品均留1份備份。除備份血清以外豬810（270×3）份、雞540（270× 2）份、牛60份、羊420（210×2）份。豬群用豬瘟弱毒苗、高致病性藍耳病弱毒苗、O型口蹄疫滅活苗進行免疫；羊群用O型-亞Ⅰ型口蹄疫二價滅活苗和小反芻獸疫弱毒苗進行免疫；牛群用O型-亞Ⅰ型口蹄疫二價滅活苗和A型口蹄疫單價滅活苗進行免疫；雞群用重組禽流感H5N1亞型（Re-6株+Re-7株+Re-8株）三價苗、新城疫疫苗進行免疫。

1.2 主要儀器

酶標儀（DNM-9602G型）、自動洗板機（EXL-50型）、高速離心機（TGL-16型）、超純水儀（Easy10型）、八道移液器（eppendorf）、微量振蕩器（MM-3型）、電熱恒溫培養(yǎng)箱（DH-500型）等。

1.3 試劑來源

用無禽流感、新城疫抗體的健康成年公雞3只制備的1%紅細胞懸液，商丘市動物疫病預防控制中心獸醫(yī)實驗室制備。豬瘟病毒抗體檢測試劑盒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測試劑盒由IDEXX公司提供，豬口蹄疫病毒ELISA抗體檢測試劑盒由北京億森寶生物科技有限公司提供，牛羊口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA試劑盒由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所提供，小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測試劑盒由國家外來動物疫病研究中心提供，禽流感病毒H5亞型HI試驗抗原由哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司提供，新城疫HI試驗抗原由動物用生物制品國家工程研究中心提供。

2 檢測方法和結果判定

豬瘟、豬口蹄疫、豬藍耳病、牛羊O型口蹄疫、小反芻獸疫抗體檢測按照各廠家試劑盒內(nèi)的使用說明書進行操作和結果判定。禽流感和新城疫分別依據(jù)GB/T18936-2003《高致病性禽流感診斷技術》和GB/T16550-2008《新城疫診斷技術》，采用HI方法檢測雞禽流感H5亞型Re-6株抗體和新城疫抗體及結果判定。

3 結果分析

商丘市2016年秋季防疫，雞的禽流感抗體和新城疫抗體的合格率均為100%，而豬、牛和羊的抗體合格率存在差異，監(jiān)測結果見表。

從表中的監(jiān)測匯總數(shù)據(jù)可以看出，商丘市2016年秋季集中免疫總體效果良好，所抽檢的各病種總的平均免疫抗體合格率均在70%以上，達到了農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標準。其中豬瘟、高致病性藍耳病、豬口蹄疫、牛羊O型口蹄疫平均抗體合格率較高分別為88.9%、83%、90%、82.6%，免疫效果較好。SQ3縣的豬高致病性藍耳病抗體合格率只有10%，SQ3和SQ9縣的羊小反芻獸疫抗體合格率較低，導致小反芻獸疫總的平均抗體合格率剛過農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標準。

4 討論

口蹄疫、高致病性禽流感、新城疫、豬瘟、高致病性豬藍耳病、小反芻獸疫等重大動物疫病嚴重威脅著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，而使用疫苗免疫是預防疫病發(fā)生比較有效的手段，及時對免疫效果進行監(jiān)測是保證免疫質(zhì)量的重要措施，對重大動物疫病防控有重要的指導意義。從此次監(jiān)測結果可看出，商丘市規(guī)模禽場的整體抗體水平較高，合格率達100%，免疫確實有效。雖然商丘市畜禽的總體免疫質(zhì)量達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標準，但仍有2個縣2個羊場的小反芻獸疫抗體不合格，經(jīng)過入場調(diào)查發(fā)現(xiàn)，這2個羊場均為肉羊育肥場，從外地買入后育肥2個多月趕在年前出售，對防疫工作重視不夠；1個縣1個豬場的高致病性藍耳病抗體較低，經(jīng)入場調(diào)查發(fā)現(xiàn)，這1個豬場沒有免疫過高致病性藍耳病疫苗，所監(jiān)測到的抗體是自然感染導致的，這樣的高致病性藍耳病陽性豬場如不及時免疫疫苗，會存在一定的疫情風險。現(xiàn)就其中導致免疫效果不好的原因進行初步探索和分析。

表 商丘市2016年秋季免疫規(guī)模豬場、牛場和羊場抗體監(jiān)測結果

4.1 免疫接種操作不規(guī)范

①多種疫苗同時接種，隨意將兩種或兩種以上疫苗同時接種，疫苗之間產(chǎn)生相互干擾，例如豬的高致病性藍耳病疫苗同豬瘟疫苗或口蹄疫疫苗同時免疫，會影響后兩種疫苗的免疫效果，經(jīng)調(diào)查SQ1和SQ7兩縣的豬瘟抗體及SQ4縣的豬口蹄疫抗體之所以不是太高就是和高致病性藍耳病疫疫苗同時接種有關；②疫苗的稀釋劑選用不當，疫苗稀釋倍數(shù)錯誤，稀釋后存放時間過長；③接種劑量不準確，接種劑量過少或過多都不行，過少不能產(chǎn)生足夠的抗體，過多會抑制機體產(chǎn)生抗體，甚至出現(xiàn)免疫麻痹；④疫苗接種途徑不當，未按規(guī)定途徑接種疫苗；⑤在接種疫苗前后使用了抗病毒藥物，抑制了抗體的產(chǎn)生。

4.2 免疫程序不合理

4.2.1 母源抗體的干擾

新生幼畜在免疫接種疫苗時如果母源抗體滴度高，接種的疫苗就會被母源抗體中和而影響免疫應答的產(chǎn)生，導致幼畜免疫失敗。

4.2.2 免疫程序不適合本場實際

一些養(yǎng)殖場沒有根據(jù)本場的疫病發(fā)生規(guī)律和流行趨勢及所使用的疫苗來制定免疫程序，而是生搬硬套教科書上的或其他場的免疫程序，導致免疫失敗。

4.2.3 未按規(guī)定的免疫程序接種

免疫接種時隨意性大，免疫次數(shù)不夠，導致免疫失敗。

4.3 動物自身因素

動物機體的免疫應答在一定程度上受遺傳因素的影響，畜禽品種來源繁多，免疫應答各有差異，同一品種不同個體之間對同一種疫苗免疫應答的強弱也不同。有的動物患先天性免疫缺陷病或免疫抑制病，會導致免疫機能障礙，使動物機體對疫苗接種的應答反應性降低，最終免疫效價不高，甚至失敗。

4.4 飼養(yǎng)管理不當

①消毒衛(wèi)生制度不健全，或有制度執(zhí)行不到位，衛(wèi)生條件差；②飼喂霉變的飼料；③動物免疫接種前受到強烈的應激等。

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