方 蕾 侯 睿 費(fèi)巧玲 高 源 蔡潤(rùn)蘭 齊 云

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京100193)

·免疫學(xué)技術(shù)與方法·

一種以蝦原肌球蛋白為致敏原的Th2反應(yīng)小鼠模型的建立①

方 蕾 侯 睿 費(fèi)巧玲 高 源 蔡潤(rùn)蘭 齊 云

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京100193)

目的：采用蝦原肌球蛋白為致敏原建立Th2反應(yīng)小鼠模型。方法：蝦原肌球蛋白腹腔注射小鼠6周誘導(dǎo)Th2反應(yīng)，ELISA測(cè)定小鼠血清總IgE、sIgE和sIgG水平、脾淋巴細(xì)胞分泌Th1和Th2細(xì)胞因子的含量，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血液中嗜堿性粒細(xì)胞的活化。結(jié)果：與對(duì)照組比較，致敏6周的小鼠血清總IgE、sIgE和sIgG(sIgG1、sIgG2a和sIgG2b)均顯著升高；脾淋巴細(xì)胞在抗原刺激后分泌Th2細(xì)胞因子(IL-4、IL-5、IL-10和IL-13)增加，而Th1細(xì)胞因子INF-γ則出現(xiàn)明顯降低；血液中嗜堿性粒細(xì)胞表面標(biāo)志物CD200R和CD41表達(dá)增強(qiáng)。結(jié)論：成功建立一種以蝦原肌球蛋白為致敏原的Th2反應(yīng)小鼠模型。

Th2反應(yīng)；蝦原肌球蛋白；嗜堿性粒細(xì)胞；IgE

輔助T細(xì)胞(T helper，Th)是由初始CD4+T細(xì)胞分化而來(lái)。初始CD4+T細(xì)胞在胸腺內(nèi)成熟后遷移至外周淋巴器官，與激活的抗原呈遞細(xì)胞相互作用分化為Th1、Th2、Th17和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞等多種功能亞群，Th細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)維持動(dòng)態(tài)平衡。目前認(rèn)識(shí)到Th1/Th2細(xì)胞失衡現(xiàn)象存在于感染性疾病、腫瘤、自身免疫性疾病和變態(tài)反應(yīng)性疾病等多種疾病中[1]，而Th2優(yōu)勢(shì)反應(yīng)最常見于過(guò)敏性疾病，與IgE生成密切相關(guān)。在實(shí)驗(yàn)研究中，Ⅰ 型過(guò)敏反應(yīng)動(dòng)物模型通常以卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)和二硝基苯酚(Dinitrophenol，DNP)與載體蛋白的偶聯(lián)物誘導(dǎo)。前者模擬大分子致敏，后者則模擬小分子(半抗原)致敏。但我們的研究結(jié)果卻顯示OVA對(duì)嚙齒類動(dòng)物IgE的誘導(dǎo)情況并不理想，尤其在沒(méi)有佐劑的情況下更為明顯[2]。這與普通鼠飼料含蛋粉，長(zhǎng)期食用致免疫耐受有關(guān)[3]。而小分子DNP誘導(dǎo)的過(guò)敏模型代表半抗原致敏，并不能完全替代臨床上對(duì)大分子(蛋白質(zhì)、多肽)致敏的情形。因此，實(shí)驗(yàn)研究中迫切需要一種致敏性高的大分子抗原物質(zhì)。蝦蛋白也是食品中極重要的一類變應(yīng)原[4]，且不是普通鼠飼料中的必須組分。通過(guò)與相同劑量條件下的OVA進(jìn)行比較，小鼠對(duì)蝦蛋白的響應(yīng)性遠(yuǎn)高于OVA[2]。據(jù)此，我們提取了蝦的主要過(guò)敏原成分——原肌球蛋白，誘導(dǎo)小鼠模型，從與IgE生成密切相關(guān)的Th2效應(yīng)來(lái)探討蝦原肌球蛋白致敏模型的特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和細(xì)胞 雌性BALB/c小鼠(6～8周齡)，16～18 g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司[許可證編號(hào)：SCXK(京)2012-0001]。于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所SPF級(jí)動(dòng)物房常規(guī)飼養(yǎng)。

1.1.2 主要試劑 小鼠IgE ELISA試劑盒購(gòu)自美國(guó)Biolegend公司，protein G PLUS-Agarose購(gòu)自美國(guó)Santa cruz biotechnology公司，HRP標(biāo)記的大鼠抗小鼠IgE二抗購(gòu)自英國(guó)Abcam公司，兔抗小鼠IgG1、IgG2a和IgG2b抗體購(gòu)自美國(guó)OriGene Technologies公司，F(xiàn)ITC標(biāo)記的抗小鼠IgE、PerCP-eFluor 710標(biāo)記的抗小鼠CD41、PE標(biāo)記的抗小鼠CD200R抗體購(gòu)自美國(guó)BD Bioscience公司。

1.2 方法

1.2.1 鋁佐劑的配制 分別配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的Al2(SO4)3溶液和NaOH溶液，取Al2(SO4)31.0 g，溶于20 ml無(wú)菌三蒸水中，即NaOH 0.4 g，溶于8 ml無(wú)菌三蒸水中；在強(qiáng)烈攪拌下，將NaOH加入Al2(SO4)3中，4 000 r/min離心15 min，無(wú)菌生理鹽水重懸2次，最終以生理鹽水定容至20 ml，-20℃分裝保存。

1.2.2 蝦原肌球蛋白的提取和鑒定 取新鮮的刀額新對(duì)蝦(Metapenaeusensis)，去頭去殼，蝦肉研碎勻漿，參照文獻(xiàn)[5]采用等電點(diǎn)沉淀的方法提取原肌球蛋白，通過(guò)SDS-PAGE對(duì)其分子量進(jìn)行鑒定。

1.2.3 蝦原肌球蛋白誘導(dǎo)小鼠Th2反應(yīng) 小鼠隨機(jī)分為佐劑對(duì)照組和模型組。蝦原肌球蛋白配制成400 μg/ml(生理鹽水配制)，再加入等體積的鋁佐劑，蝦原肌球蛋白的終濃度為200 μg/ml。模型組小鼠腹腔注射0.1 ml蝦原肌球蛋白，即20 μg/只，每周1次，共6周。佐劑對(duì)照組則給予等體積含佐劑的生理鹽水。

1.2.4 ELISA法測(cè)定小鼠血清總IgE及抗原特異性IgE(antigen-special immunoglobulin E，sIgE) 小鼠6周末摘眼球取血，分離血清，參照ELISA測(cè)定試劑盒說(shuō)明書測(cè)定總IgE的含量。sIgE的檢測(cè)參考文獻(xiàn)[6]所述，并加以改進(jìn)：待測(cè)血清先與protein G PLUS-Agarose以體積比1∶9混合，除去血清中的IgG。室溫反應(yīng)30 min，期間每隔5 min混懸1次；2 500 r/min 離心10 min，取上清；將上清以PBS稀釋10倍后取100 μl加入預(yù)包被蝦原肌球蛋白的ELISA板(1 μg/孔)中，37℃孵育1 h；PBST洗板4次，加入HRP-大鼠抗小鼠IgE二抗(1∶5 000稀釋)，100 μl/孔，37℃孵育1 h；PBST洗板5次，TMB顯色37℃孵育10 min，每孔加100 μl 2 mol/L H2SO4終止，于450 nm處讀數(shù)。

1.2.5 ELISA法測(cè)定小鼠抗原特異性IgG(antigen-special immunoglobulin G，sIgG) 取6周末小鼠血清檢測(cè)sIgG，方法與上述測(cè)定sIgE的方法相似：待測(cè)血清稀釋后直接加入包被蝦原肌球蛋白的ELISA板中，37℃孵育1 h；PBST洗板4次，加入兔抗小鼠IgG1(1 ng/ml)或IgG2a(2 μg/ml)或IgG2b抗體(1 ng/ml)，37℃孵育1 h；PBST洗板4次，加入HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，37℃孵育1 h；PBST洗板4次，37℃ TMB孵育10 min顯色，H2SO4終止，于450 nm處讀數(shù)。

1.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血液中嗜堿性粒細(xì)胞CD200R和CD41的表達(dá) 小鼠摘眼球取血，全血置于EDTA-K2抗凝管中，取抗凝血100 μl加入終濃度為5 μg/ml的蝦原肌球蛋白，37℃孵育。2 h后，加入FITC標(biāo)記的抗小鼠IgE、PerCP-eFluor 710標(biāo)記的抗小鼠CD41和PE標(biāo)記的抗小鼠CD200R抗體，4℃避光孵育15 min，再加入流式專用紅細(xì)胞裂解液2 ml避光孵育5 min，1 000 r/min離心5 min，棄上清，加2 ml PBS洗1次，離心，最后加0.3 ml PBS重懸細(xì)胞，F(xiàn)ACSCalibur型流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD公司)檢測(cè)，收集1 000個(gè)IgE+細(xì)胞，于流式分析軟件Flowjo 7.6.1中分析CD200R和CD41的表達(dá)(Mean fluorescence intensity，MFI)。

1.2.7 蝦原肌球蛋白刺激小鼠脾淋巴細(xì)胞72 h分泌細(xì)胞因子 小鼠于6周末處死后，于75%酒精中浸泡5 min消毒皮毛。參照文獻(xiàn)[5]，無(wú)菌條件下取脾臟，制備脾細(xì)胞懸液，以4×106個(gè)/孔鋪24孔板，各孔加入終濃度為4 μg/ml蝦原肌球蛋白，37℃孵育培養(yǎng)。蛋白刺激72 h后，取上清采用ELISA法測(cè)定IL-4、IL-5、IL-10、IL-13和IFN-γ的含量。

2 結(jié)果

2.1 模型小鼠血清總IgE和sIgE 經(jīng)電泳鑒定提取的刀額新對(duì)蝦原肌球蛋白分子量為36 kD，與文獻(xiàn)報(bào)道吻合[7]。采用蝦原肌球蛋白誘導(dǎo)小鼠模型，與對(duì)照組比較，第6周的動(dòng)物血清總IgE和sIgE含量均明顯升高(P<0.01)，見圖1。

2.2 模型小鼠血清sIgG1、sIgG2a和sIgG2b 由圖2可見，與對(duì)照組比較，模型組小鼠血清sIgG2a、 sIgG2b和sIgG1均明顯升高(P< 0.01)。從血清稀釋倍數(shù)可見，以sIgG1含量最高。

圖1 小鼠血清總IgE和sIgE含量Fig.1 Levels of total IgE and sIgE in serum of ST-sensitized miceNote: Mice were sensitized by ST intraperitoneally once a week.At day 42,sera from different groups of mice were obtained.The total IgE (A) and sIgE (B) levels were determined by using ELISA.Data present the ±s(n=6).##.P< 0.01 vs control group.

圖2 模型小鼠血清sIgG1、sIgG2a和sIgG2b含量Fig.2 Levels of sIgG1,sIgG2a and sIgG2b in serum of ST-sensitized miceNote: Mice were sensitized by ST intraperitoneally once a week.At day 42,sera from different groups of mice were obtained.The levels of sIgG1 (A),sIgG2a (B) and sIgG2b (C) were determined by using ELISA.Sera were diluted 1∶2×105 for sIgG1,1∶1 000 for sIgG2a,and 1∶4×104 for sIgG2b.Data present the ±s(n=6).##.P< 0.01 vs control group.

圖3 蝦原肌球蛋白刺激模型小鼠脾細(xì)胞分泌細(xì)胞因子Fig.3 Splenocyte cytokine secretion in response to STNote: Spleen cells from control or ST-sensitized mice were cultured for 72 h in the presence of ST.Cytokines in culture supernatants (A.IL-4,B.IL-5,C.IL-10,D.IL-13 and E.IFN-γ) were measured by ELISA.Data present the ±s(n=5).##.P< 0.01 vs control group.

圖4 模型小鼠血液中嗜堿性粒細(xì)胞CD200R和CD41的表達(dá)Fig.4 Basophil CD200R and CD41 expression in response to STNote: Whole blood was incubated with ST.MFI of CD200R (A,C-F) and CD41 (B,G-J) on basophils were analyzed by flow cytometry.).#.P< 0.05,##.P< 0.01 vs control group.

2.3 蝦原肌球蛋白刺激模型小鼠脾淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子 通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)我們考察了蝦原肌球蛋白(0.5～8 μg/ml劑量范圍)的最佳刺激量為4 μg/ml。在該造模劑量條件下，如圖3所示，與對(duì)照組比較，抗原刺激模型小鼠脾淋巴細(xì)胞72 h可見上清中IL-4、IL-5、IL-10和IL-13含量均顯著升高(P<0.01)，而模型組的IFN-γ則顯著降低(P<0.01)。

2.4 模型小鼠血液中嗜堿性粒細(xì)胞CD200R和CD41的表達(dá) 通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)我們考察了5～20 μg/ml劑量范圍內(nèi)蝦原肌球蛋白的體外刺激小鼠抗凝血合理劑量為5 μg/ml。抗原與抗凝血孵育2 h后，模型組CD200R的表達(dá)較對(duì)照組明顯增強(qiáng)(圖4E、F：CD200R+嗜堿性粒細(xì)胞對(duì)照組2.17% vs 模型組52.9%)；CD41的表達(dá)也增加，但是不如CD200R趨勢(shì)顯著(圖4I、J：CD41+嗜堿性粒細(xì)胞對(duì)照組18.3% vs 模型組33.0%)。

3 討論

Ⅰ型過(guò)敏反應(yīng)常見Th2優(yōu)勢(shì)反應(yīng)，Th2細(xì)胞因子是促進(jìn)B細(xì)胞發(fā)生抗體類型轉(zhuǎn)換生成IgG1和IgE類抗體的關(guān)鍵因子。過(guò)敏患者可見血清sIgG、sIgG1和sIgE的明顯升高[8]；Th2細(xì)胞因子IL-4在哮喘患兒血清中濃度升高，而Th1細(xì)胞因子IFN-γ濃度則下降，出現(xiàn)Th1/Th2細(xì)胞免疫失衡[9]。在本文建立的以蝦原肌球蛋白為抗原的小鼠Th2模型中，小鼠血清總IgE、sIgE和sIgG(sIgG以sIgG1含量最高)含量均顯著增加(圖1～2)；同時(shí)，抗原刺激模型小鼠脾細(xì)胞分泌的Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-10和IL-13均顯著升高，而Th1效應(yīng)則受到抑制，IFN-γ的含量明顯下降(圖3)，可見該模型呈現(xiàn)典型的Th2反應(yīng)亢進(jìn)。

人們很早就認(rèn)識(shí)到肥大細(xì)胞是 Ⅰ 型過(guò)敏反應(yīng)的主要參與者，通過(guò)IgE介導(dǎo)其激活。然而，和肥大細(xì)胞表型和功能相似的嗜堿性粒細(xì)胞，由于占白細(xì)胞總數(shù)的比例不到1%，在很長(zhǎng)一段時(shí)期內(nèi)，都被認(rèn)為是血液循環(huán)中殘余的肥大細(xì)胞，對(duì)其功能關(guān)注并不多。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)多種過(guò)敏性疾病的發(fā)生以及發(fā)病的嚴(yán)重程度與人體內(nèi)能夠激活的致敏嗜堿性粒細(xì)胞(其表面標(biāo)志物CD63的表達(dá)增強(qiáng))的比例以及脫顆粒的程度相關(guān)[10，11]。隨著嗜堿性粒細(xì)胞條件性缺失技術(shù)的發(fā)展和高純度細(xì)胞分選技術(shù)的應(yīng)用，嗜堿性粒細(xì)胞的新生物學(xué)作用被逐一闡明：目前已發(fā)現(xiàn)它不僅是Th2細(xì)胞因子IL-4的主要來(lái)源細(xì)胞，而且可能具有潛在獨(dú)立的或協(xié)同樹突狀細(xì)胞的抗原提呈作用，調(diào)節(jié)Th2應(yīng)答[12]。進(jìn)一步的研究則明確了嗜堿性粒細(xì)胞參與過(guò)敏性哮喘小鼠Th2反應(yīng)：抗原致敏和激發(fā)導(dǎo)致了小鼠血液和肺組織中嗜堿性粒細(xì)胞的數(shù)量明顯增加，同時(shí)伴隨其激活標(biāo)志物CD200R的表達(dá)上調(diào)。然而，采用MAR-1或Ba103抗體清除嗜堿性粒細(xì)胞后氣道炎癥明顯減輕，脾臟和引流淋巴結(jié)Th2亞群減少，肺組織IL-4和血清sIgE均顯著降低[13]。目前，小鼠嗜堿性粒細(xì)胞激活標(biāo)志物研究并不多，研究顯示小鼠的嗜堿性粒細(xì)胞CD200R的激活和胞內(nèi)IL-4的水平成正相關(guān)[14]；CD41是血小板和巨核細(xì)胞的標(biāo)志物，還表達(dá)于人和小鼠骨髓來(lái)源的肥大細(xì)胞，2014年有研究者首次嘗試將CD41作為寄生蟲感染性疾病嗜堿性粒細(xì)胞活化的標(biāo)志物[15]。在本文建立的以蝦原肌球蛋白為抗原的Th2模型中，我們檢測(cè)到小鼠血液中嗜堿性粒細(xì)胞表面活化標(biāo)志物CD200R和CD41表達(dá)明顯增強(qiáng)(圖4)，表明嗜堿性粒細(xì)胞處于激活狀態(tài)。

綜上所述，蝦原肌球蛋白克服了傳統(tǒng)大分子抗原OVA在嚙齒類動(dòng)物中的免疫耐受問(wèn)題，具有更高的致敏性，可能是經(jīng)典致敏原的一個(gè)更好的替代品。經(jīng)腹腔注射蝦原肌球蛋白能夠成功誘導(dǎo)小鼠發(fā)生明顯的Th2優(yōu)勢(shì)反應(yīng)，產(chǎn)生與臨床Ⅰ型過(guò)敏反應(yīng)患者類似的免疫學(xué)改變，表現(xiàn)為脾淋巴細(xì)胞分泌Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-10和IL-13增加，分泌Th1細(xì)胞因子IFN-γ的含量明顯下降，呈現(xiàn)Th1/Th2免疫反應(yīng)的明顯失衡；血清抗體水平總IgE、sIgE和sIgG的含量升高；血液中嗜堿性粒細(xì)胞活化，其表面活化標(biāo)志物CD200R和CD41表達(dá)明顯增強(qiáng)。該模型的應(yīng)用價(jià)值在于，研究者們能夠利用這種以Th2反應(yīng)為主的動(dòng)物模型為基礎(chǔ)選擇進(jìn)行多種實(shí)驗(yàn)，例如可直接以抗原激發(fā)建立全身(經(jīng)靜脈)或局部(經(jīng)呼吸道)的主動(dòng)過(guò)敏模型，或采用其富含IgE的致敏血清可用于被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng)模型；而脾細(xì)胞反應(yīng)以及嗜堿性粒細(xì)胞激活實(shí)驗(yàn)均可用于體外抑制Th2反應(yīng)藥物的評(píng)價(jià)，這些將為抗過(guò)敏性疾病創(chuàng)新藥物的機(jī)制研究提供良好的應(yīng)用平臺(tái)。

[1] 董興高.Th1/Th2、Th17/Treg 細(xì)胞的平衡與臨床[J].湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2012，29(1)：67-69.

[2] 方 蕾,侯 睿，費(fèi)巧玲，等.蝦原肌球蛋白及其IgE單克隆抗體建立Ⅰ型過(guò)敏反應(yīng)體內(nèi)外模型[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2016，32(10)：1422-1427.

[3] 鄭珊珊，劉火媛，周藉良，等.小鼠IgE抗體生成的免疫調(diào)節(jié)-IV抗卵清蛋白IgE抗體應(yīng)答的研究[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào)，1987，9(5)：329-333.

[4] 孫一帆，黃建芳，王彩霞，等.中國(guó)人的蝦、蟹致敏過(guò)敏原組分分析[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志，2014，30(10)：1325-1329.

[5] Capobianco F,Butteroni C,Barletta B,etal.Oral sensitization with shrimp tropomyosin induces in mice allergen-specific IgE,T cell response and systemic anaphylactic reactions[J].Intern Immunol,2008,20(8): 1077-1086.

[6] Li XM,Schofield BH,Huang CK,etal.A murine model of IgE-mediated cow's milk hypersensitivity[J].J Allergy Clin Immunol,1999,103(2 Pt 1):206-214.

[7] 洪 林，鄭禮娜，李振興，等.刀額新對(duì)蝦主要過(guò)敏原蛋白的肽指紋圖譜鑒定與分析[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，39(5)：919-924.

[8] Savilahti EM,Kuitunen M,Savilahti E,etal.Specific antibodies in oral immunotherapy for cow's milk allergy: kinetics and prediction of clinical outcome[J].Intern Arch Allergy Immunol,2014,164(1):32-39.

[9] 于華鳳，王廣新，韓玉玲，等.兒童支氣管哮喘血清IL-4、IL-10和IFN-γ濃度的測(cè)定及其臨床意義[J].中華哮喘雜志，2010，4(5)：320-323.

[10] Konradsen JR,Nordlund B,Nilsson OB,etal.High basophil allergen sensitivity (CD-sens) is associated with severe allergic asthma in children[J].Pediatr Allergy Immunol,2012,23(4):376-384.

[11] 楊皓征，曹蘭芳，王利民，等.過(guò)敏性疾病患兒外周血嗜堿性粒細(xì)胞百分比及活化率檢測(cè)定[J].臨床兒科雜志，2011，29(1)：59-62.

[12] Mukai K,Obata K,Tsujimura Y,etal.New insights into the roles for basophils in acute and chronic allergy[J].Allerg Intern,2009,58(1):11-19.

[13] Zhong W,Su W,Zhang Y,etal.Basophils as a primary inducer of the T helper type 2 immunity in ovalbumin-induced allergic airway inflammation[J].Immunology,2014,142(2): 202-215.

[14] Torrero MN,Larson D,Hubner MP,etal.CD200R surface expression as a marker of murine basophil activation[J].Clin Exp Allergy,2009,39(3):361-369.

[15] Bakocevic N,Claser C,Yoshikawa S,etal.CD41 is a reliable identification and activation marker for murine basophils in the steady state and during helminth and malarial infections[J].Eur J Immunol,2014,44(6):1823-1834.

[收稿2016-06-16 修回2016-08-25]

(編輯 倪 鵬)

A murine model of Th2 response induced by shrimp tropomyosin

FANGLei,HOURui,FEIQiao-Ling,GAOYuan,CAIRun-Lan,QIYun.

InstituteofMedicinalPlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollege,Beijing100193，China

Objective:To develop murine models of Th2 response induced by shrimp tropomyosin (ST).Methods: Mice were sensitized with ST for 6 weeks.The serum antigen-special IgE (sIgE),total IgE and sIgG level,Th1/Th2 cytokines production were measured by ELISA.The basophil activation in mice was measured by flow cytometry.Results: The intraperitoneal sensitization with ST for 6 weeks induced significant increase of serum sIgE,total IgE and sIgG (sIgG1,sIgG2a and sIgG2b) level in mice.Th2 cell response was induced and cytokines (IL-4,IL-5,IL-10 and IL-13) production increased in splenocytes stimulated by ST,while Th1 cytokine (IFN-γ) production decreased.As the markers of basophil activation,CD200R and CD41 expression also increased in response to ST.Conclusion: The Th2 response is dominant in ST-induced anaphylaxis in mice.

Th2 response;Shrimp tropomyosin;Basophil;IgE

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.02.014

①本文受國(guó)家科技重大專項(xiàng)(2014ZX09201022-006)和北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(7142112)資助。

方 蕾(1983年-)，女，博士，講師，主要從事抗過(guò)敏中藥藥理學(xué)研究，E-mail：fanglei@yzu.edu.cn，就職于揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院。

及指導(dǎo)教師：齊 云(1964年-)，男，博士，研究員，博士生導(dǎo)師，主要從事抗炎免疫藥理學(xué)研究，E-mail：yqi@implad.ac.cn。

R392.8

A

1000-484X(2017)02-0233-05