鐘小梅，吳澄

(贛州市人民醫(yī)院，江西 贛州 341000)

臍血檢測在早發(fā)型新生兒敗血癥中的作用〔1〕

鐘小梅，吳澄

(贛州市人民醫(yī)院，江西 贛州 341000)

目的：探究臍血檢測在早發(fā)型新生兒敗血癥診斷中的作用。方法：選擇2014年1月—2015年5月出生、在72 h以內(nèi)發(fā)病、后經(jīng)過血培養(yǎng)證實為早發(fā)新生兒敗血癥患兒80 例為觀察組，選擇同期住院的無感染征象的新生兒80 例為對照組。觀察組在入院初期用藥前和恢復(fù)期分別采集空腹靜脈血，檢測CD4、CD8、降鈣素原(PCT)以及內(nèi)毒素，對照組入院時一次性采血檢測上述指標(biāo)。結(jié)果：入院時兩組的CD4、CD8、PCT、內(nèi)毒素比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；兩組恢復(fù)期的CD4、CD8、PCT、內(nèi)毒素與治療前比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。對患兒的臍血和靜脈血行降鈣素原、內(nèi)毒素、T淋巴細胞亞群檢測后發(fā)現(xiàn)，臍血中降鈣素原、內(nèi)毒素、T淋巴細胞亞群明顯增高，特別是降鈣素原診斷價值最高。結(jié)論：臍血作為新生兒體內(nèi)最早可得到的血液標(biāo)本，在臨床應(yīng)用中顯示出極大的優(yōu)越性，聯(lián)合應(yīng)用降鈣素原、內(nèi)毒素、T淋巴細胞亞群等臍血炎性指標(biāo)可以極大地提高新生兒敗血癥診斷的準(zhǔn)確性。

早發(fā)型新生兒敗血癥；臍血檢測；臨床作用

早發(fā)型新生兒敗血癥(EONS)指患兒在出生后72 h以內(nèi)發(fā)病，一般與母體密切相關(guān)，通常由母親垂直傳播引起，病死率極高。2002年該疾病被國際兒科敗血癥大會定義為一種繼發(fā)性感染的全身炎癥反應(yīng)綜合征，對于新生兒的生命安全威脅極大，由于新生兒免疫系統(tǒng)發(fā)育未成熟等原因，對新生兒期重癥感染的早期臨床診斷仍缺乏一種可靠準(zhǔn)確的檢測手段。降鈣素原、內(nèi)毒素、T淋巴細胞亞群是目前感染診斷方面的熱點，而臍血是可在新生兒獲取的最早血液標(biāo)本，因此我們嘗試檢測臍血中的降鈣素原、內(nèi)毒素、T淋巴細胞亞群水平來達到早期診斷早發(fā)型新生兒敗血癥的目的。本文對于我院已經(jīng)確診為早發(fā)型新生兒敗血癥的患兒進行臨床研究，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2014年1月—2015年5月出生、在72 h以內(nèi)發(fā)病、后經(jīng)過血培養(yǎng)證實為早發(fā)新生兒敗血癥的80 例患兒為觀察組，選擇同期住院的無感染征象的新生兒80 例為對照組。兩組均無先天性畸形、免疫系統(tǒng)缺陷、嚴(yán)重肝腎疾病以及遺傳代謝性疾病。觀察組男52 例，女28 例；出生體重(2 561.34±24.07) g；日齡1～15 d；胎齡35～42 周。對照組男49 例，女31 例；出生體重(2 557.18±21.37) g；日齡1～16 d；胎齡34～42 周。兩組患者性別、出生體重、日齡、胎齡等基礎(chǔ)資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性[1]。

1.2 方法

觀察組在入院初期用藥前和恢復(fù)期(抗感染治療1 周后)分別采集空腹靜脈血，采用美國Beckman CoulterEpics-XL4型單激光4色流式細胞儀檢測CD4、CD8，試劑及質(zhì)控品均為Beckman Coulter公司配套產(chǎn)品，采用免疫熒光檢測儀(廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司)檢測降鈣素原(PCT)，采用鱟試劑動態(tài)比濁定量測定法檢測內(nèi)毒素。對照組入院時一次性采血檢測CD4、CD8、PCT以及內(nèi)毒素，檢測方法同觀察組。

1.3 標(biāo)本采集

由于臍血難以保存，并且出生后一般都會丟棄，因此對于母體有高危感染因素(如糖尿病、三度以上羊水、胎膜早破、母體感染等)，全身情況較差的新生兒常規(guī)留取臍血；所有患兒入院后需在嚴(yán)格無菌條件下采集靜脈血，避免污染導(dǎo)致血培養(yǎng)檢查假陽性[2]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié) 果

入院時觀察組PCT、內(nèi)毒素顯著高于對照組，觀察組CD4、CD8指標(biāo)均顯著低于對照組，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

觀察組治療后恢復(fù)期時與治療前比較，PCT、內(nèi)毒素指標(biāo)均顯著降低，CD4、CD8指標(biāo)均顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

表1 兩組入院時CD4、CD8、PCT以及內(nèi)毒素的比較

表2 觀察組治療前后CD4、CD8、PCT以及內(nèi)毒素水平的變化

3 討 論

早發(fā)型新生兒敗血癥(ENOS)目前在臨床上沒有統(tǒng)一的認證標(biāo)準(zhǔn)，而通過對我國的相關(guān)文獻進行查閱可以發(fā)現(xiàn)幾乎沒有任何一篇文獻對此進行了確定的定義[3-5]。在對該病癥進行診斷時，由于缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，使診斷變得比較困難。每年全世界有超過百萬的新生兒死于感染。據(jù)不完全統(tǒng)計，新生兒感染的發(fā)病率為0.3%～3%。早期發(fā)現(xiàn)感染并及時治療能顯著改善新生兒的預(yù)后。早發(fā)型新生兒敗血癥感染與圍生期因素有關(guān)，一般由母嬰垂直傳播引起。本研究檢測臍血中降鈣素原、內(nèi)毒素、T淋巴細胞亞群的水平，明確臍血中此三項感染標(biāo)志物在診斷早發(fā)型新生兒敗血癥的作用，更好地為新生兒早期感染的診斷與治療提供指導(dǎo)和幫助[6-7]。對于如何提高早發(fā)新生兒敗血癥的臨床診斷效果一直是現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)的重點研究課題。在選擇可以判斷新生兒早發(fā)型敗血癥的標(biāo)志物時，要綜合考慮各方面的因素，首先標(biāo)志物的選擇應(yīng)對該種病情的變化具有非常高的靈敏度，另外，在特異性、陰性/陽性預(yù)測值方面也要具有比較高的比擬性。由于ENOS具有的高發(fā)病率和高致死率，所以漏診會給患者帶來嚴(yán)重影響，甚至危及患者的生命安全[8]。因此，對于ENOS標(biāo)志物的選擇至關(guān)重要?；純耗氀薪碘}素原、內(nèi)毒素、T淋巴細胞亞群對于該疾病的靈敏度較高，而且臨床表現(xiàn)特征明顯，是臨床診斷的一種重要參考指標(biāo)。

降鈣素原(PCT)是臨床診斷ENOS的一種重要參考指標(biāo)。有試驗研究[9]將PCT作為對ENOS進行診斷的標(biāo)準(zhǔn)。通過研究發(fā)現(xiàn)，PCT的特異性和靈敏度都非常高，分別達到了86%和82%。PCT是降鈣素原的前身，作為一種非固醇類的抗炎物質(zhì)，該元素在對人體內(nèi)的細胞因子進行調(diào)控過程中發(fā)揮著非常重要的作用。在正常情況下，人體內(nèi)的PCT含量很低，一個健康成年人的血清中的PCT含量通常為0.1 μg/L，很難檢測到。本次研究結(jié)果表明，入院時觀察組患兒的PCT水平為(15.74±4.28) ng/mL，顯著高于對照組的(0.23±0.12) ng/mL(P<0.05)，恢復(fù)期時患兒的PCT水平為(0.31±0.12) ng/mL，顯著低于治療前(P<0.05)。可見PCT在感染急性期和治療后的恢復(fù)期均有較明顯的特性變化，可用于診斷細菌感染，監(jiān)測病情轉(zhuǎn)歸[10]。

臍血中的T淋巴細胞群同樣也是一種非常重要的參考指標(biāo)。臨床上常用T淋巴細胞亞群對相關(guān)的機體細胞免疫類疾病進行檢測。對于該細胞亞群的檢測方法常用的有免疫熒光法、SPA花環(huán)法等。對比新生兒體內(nèi)的T淋巴細胞亞群變化值可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)新生兒發(fā)生某些炎性疾病時，其體內(nèi)的CD4淋巴細胞會減少，而CD8淋巴細胞則會增多，這樣CD4/CD8的比值發(fā)生異常。不過需要注意的一點是在檢測過程中，需要在前散射與側(cè)散射中對于患兒體內(nèi)的二維Dot-plot區(qū)域劃分出專門的淋巴細胞區(qū)[11]。然后對該區(qū)域的淋巴細胞進行FITC熒光檢測。本研究結(jié)果顯示，新生兒敗血癥者外周血CD4、CD8較對照組降低，說明T細胞功能不完善，不能有效輔助免疫細胞，導(dǎo)致重癥感染時患兒細胞免疫功能低下，與邱麗影等[12]研究結(jié)果一致，說明重癥感染患兒細胞免疫功能受到抑制，同時細胞免疫功能低下亦是新生兒發(fā)生重癥感染的重要原因之一。

臍血中的內(nèi)毒素也是在對EONS進行診斷時的一種非常重要的指標(biāo)，是革蘭陰性菌中的一種成分，主要的構(gòu)成成分是類脂質(zhì)A。該類物質(zhì)變化受到機體內(nèi)炎癥的影響非常突出。通過對我院ENOS新生兒患者的臨床研究結(jié)果顯示，觀察組患兒的內(nèi)毒素水平顯著高于對照組(P<0.05)，恢復(fù)期時的水平顯著低于治療前(P<0.05)，與李正浩等[13]的研究結(jié)果一致。需要關(guān)注的是，內(nèi)毒素的靈敏度與特異度不如PCT，但PCT只可反映是否受細菌感染，而內(nèi)毒素能夠進一步表明是否為革蘭陰性菌感染，對抗生素的選取具有重要指導(dǎo)價值[14-16]。

綜上所述，通過對我院ENOS新生兒患者進行臨床研究，對于早發(fā)型新生兒敗血癥這種疾病有了進一步的認識。由于該病癥具有較高的致死率，且目前在臨床上并沒有統(tǒng)一的診斷標(biāo)準(zhǔn)，所以臨床上對于該疾病的確診一直存在難度。標(biāo)志物的選擇是對ENOS進行準(zhǔn)確診斷的關(guān)鍵因素。本次研究發(fā)現(xiàn)，早發(fā)型新生兒敗血癥患者臍血中的降鈣素原、內(nèi)毒素以及T淋巴細胞群的變化比較明顯，可以作為診斷該疾病的重要參考指標(biāo)，試驗結(jié)果與國內(nèi)外研究結(jié)果相吻合，所以可以在臨床上將臍血中降鈣素原、內(nèi)毒素以及T淋巴細胞亞群的含量變化作為診斷早發(fā)型新生兒敗血癥疾病的重要參考指標(biāo)。

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(本文編輯：張紅)

Role in early-onset neonatal sepsis detection in cord blood

ZHONG Xiaomei，WU Cheng

(People′s Hospital of Ganzhou，Ganzhou 341000，China)

Objective：To explore the role of cord blood test in the diagnosis of early-onset neonatal sepsis.Methods：Eighty newborns with neonatal sepsis who were born in January 2014 to May 2015，who had been diagnosed within 72 h after the onset of blood culture，were selected as the observation group.Eighty newborns without signs of infection were selected as the control group.In the observation group，fasting venous blood was collected before and during the initial period of hospitalization，CD4，CD8，procalcitonin (PCT) and endotoxin were detected，and the above indexes were detected in the control group.Results：There were statistically significant differences in CD4，CD8，PCT and endotoxin between the two groups on admission (P<0.05).There were statistically significant differences in CD4，CD8，PCT and endotoxin between the two groups before treatment (P<0.05).The umbilical cord blood and venous blood of procalcitonin，endotoxin，tlymphocyte subsets were detected，cord blood procalcitonin，endotoxin，tlymphocyte subsets were significantly increased，especially calcitonin was the highest diagnostic value.Conclusion：Umbilical cord blood can be used as the earliest blood sample in neonatal，which shows great superiority in clinical application.The umbilical cord blood index such as procalcitonin，endotoxin and tlymphocyte subsets can be extremely improve diagnosis accuracy of neonatal sepsis by earth.

early-onset neonatal sepsis；cord blood test；clinical role

張振芳(1982— )，男，河北省廊坊市人，學(xué)士學(xué)位，主治醫(yī)師。研究方向：腦血管疾病。

1671-8631(2017)02-0093-04

R722

B

2016-09-14

〔1〕本課題為江西省衛(wèi)生計生委科技計劃項目(項目編號：20167222)