王章云 褚燕君(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 河南 鄭州 450000)

IL-33在炎癥性腸病患者血清和腸黏膜組織中的表達

王章云 褚燕君
(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 河南 鄭州 450000)

目的 研究IL-33在炎癥性腸病患者血清和腸黏膜組織中的表達情況。方法 選取2015年7月至2016年7月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的41例炎癥性腸病(IBD)患者作為研究組，同期41例健康體檢者作為對照組，觀察兩組患者血清和腸黏膜組織中IL-33的表達水平。結(jié)果 與對照組比較，潰瘍性結(jié)腸炎(UC)患者血清和腸黏膜組織中IL-33水平均有明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與對照組比較，克羅恩病(CD)患者血清和腸黏膜組織中IL-33水平有所增高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與輕度UC患者相比，中度和重度UC患者血清IL-33水平有明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 IL-33在IBD患者血清和腸黏膜組織中的表達對疾病的診斷和治療具有重要意義。

IL-33；炎癥性腸病；血清；腸黏膜組織

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease，IBD)是一種特發(fā)性腸道炎癥性疾病，可累及回腸、直腸、結(jié)腸，包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)和克羅恩病(Crohn’s disease，CD)，臨床上以腹瀉、腹痛為主要表現(xiàn)，反復(fù)發(fā)作，嚴重影響患者的生活質(zhì)量[1]。其發(fā)病機制尚未完全明確，目前認為腸道黏膜免疫系統(tǒng)異常在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。近年來，隨著研究的逐漸深入，白細胞介素-33(IL-33)及受體ST2被發(fā)現(xiàn)在IBD的發(fā)生發(fā)展中具有一定的作用[2]。本研究通過對比分析IL-33在IBD患者和健康人群血清、腸黏膜組織中的表達水平，進一步探究IL-33在IBD中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年7月至2016年7月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的41例IBD患者作為研究組，同期41例健康體檢者作為對照組。實驗組患者均符合炎癥性腸炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除不能確診的腸炎者，合并有嚴重心、肺、肝、腎疾病者，免疫性疾病者，不能配合研究者[3]。研究組中UC患者32例，CD患者9例；男25例，女16例；年齡26～54歲，平均年齡為(42.5±3.1)歲。對照組中男24例，女17例；年齡24～56歲，平均年齡為(43.1±2.8)歲。所有研究對象均同意加入本研究，并簽署知情同意書。兩組研究對象性別、年齡等基線資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 檢測方法

1.2.1 血清檢測 前1 d晚餐后禁食水，次日清晨采集肘靜脈血3 ml，采用2 300 r/min的速度離心20 min，取上清液裝于EP管，放入-80 ℃冰箱中儲存。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清IL-33水平。

1.2.2 腸黏膜組織檢測 采集靜脈血后服用聚乙二醇電解質(zhì)行腸道清潔準(zhǔn)備，以便于急性結(jié)腸鏡或小腸鏡檢查，在檢查過程中取病變組織3塊。1塊放于多聚甲醛溶液中，-20 ℃冰箱儲存，以便行免疫組化檢測，對腸黏膜組織細胞中的IL-33抗原進行定位定性測定；其余2塊分別裝于EP管中，-80 ℃冰箱儲存，用于實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT - PCR)、Western Blot實驗，對腸黏膜組織中目標(biāo)RNA進行定量分析，了解IL-33蛋白質(zhì)在腸黏膜組織中的表達情況。對照組在腸鏡檢查時隨機選取3塊正常腸黏膜組織，其余處理方式均與研究組相同。

1.3 觀察指標(biāo) 記錄血清和腸黏膜組織中IL-33的表達水平。

2 結(jié)果

2.1 IBD病情 41例IBD中，32例為UC(輕度11例、中度13例、重度8例)，9例為CD(中度6例、重度3例)。所有患者均接受美沙拉嗪、糖皮質(zhì)激素或硫唑嘌呤治療。

2.2 IL-33表達水平 與對照組比較，UC患者血清和腸黏膜組織中IL-33水平均有明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與對照組比較，CD患者血清和腸黏膜組織中IL-33水平有所增高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組血清和腸黏膜組織中IL-33的表達水平比較

2.3 不同病情程度UC患者血清IL-33表達水平比較 輕度UC患者血清IL-33水平為(231.4±51.2)pg/ml，中度UC患者血清IL-33水平為(459.5±46.8)pg/ml，重度UC患者血清IL-33水平為(623.4±41.2)pg/ml。與輕度UC患者相比，中度和重度UC患者血清IL-33水平有明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

IL-33(白細胞介素-33)是白細胞介素-1家族中的一種細胞因子，受體為ST2。它是一種多功能細胞因子，具有雙重作用，既有促炎作用，又有抗炎作用，參與調(diào)節(jié)機體的TH2型免疫炎癥反應(yīng)，作用于多種靶細胞(肥大細胞、中性粒細胞及嗜酸性粒細胞等)，誘導(dǎo)靶細胞分泌細胞因子，參與疾病的發(fā)生發(fā)展[4]。IL-33主要作用是以前炎性細胞因子的形式參與TH2免疫應(yīng)答反應(yīng)，還可以核因子的形式調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄。其發(fā)揮作用需先與受體ST2及IL-1R輔助蛋白結(jié)合，ST2有可溶型(sST2)及跨膜型(ST2L)兩種，IL-33與前者結(jié)合，會使IL-33與ST2L的結(jié)合受到干擾，從而抑制IL-33發(fā)揮生物學(xué)作用；IL-33與ST2L結(jié)合后，會驅(qū)使TH2細胞到達炎癥部位，促進TH2細胞分泌IL-4、IL-5、IL-13等TH2型細胞因子，加重黏膜組織的病理性損傷。同時，IL-33可以通過促進嗜堿性粒細胞及CD3+、CD4+等肥大細胞前體成熟，誘導(dǎo)生成TH2型細胞因子及趨化因子，還可促使血管內(nèi)皮生長因子的分泌，促進TH2型細胞和肥大細胞介導(dǎo)的炎性反應(yīng)。IL-33具有促炎及抗炎的雙重功能[5]。

IBD是一種腸道慢性炎癥性疾病，分為UC和CD兩種，促炎細胞因子與抗炎細胞因子在疾病的發(fā)展中起到一定的作用。本研究分別選取41例IBD患者和41例健康人，檢測血液及腸黏膜組織中IL-33的表達水平并進行對比分析。上述實驗結(jié)果顯示，與健康人比較，UC患者血液及腸黏膜組織中IL-33表達水平要明顯升高，而CD患者升高幅度則較小，在UC患者中隨著病情的加重，血液及腸黏膜組織中IL-33的表達水平逐漸升高。

綜上所述，檢測血清和腸黏膜組織中IL-33的表達對IBD的診斷和治療具有重要的作用。

[1] 余世界,董衛(wèi)國.炎癥性腸病發(fā)病機制的研究新進展[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2014,23(2):124-126.

[2] 張艷麗,劉新風(fēng),于秀娟,等.炎癥性腸病患者腸道菌群變化及其與炎性因子的相關(guān)性[J].山東醫(yī)藥,2015,55(10):79-80.

[3] 宋允娜,鄭萍.IL-33在炎癥性腸病中的研究進展[J].國際消化病雜志,2014,34(3):184-187.

[4] 張青森,楊慶帆,陳白莉,等.IL-33基因單核苷酸多態(tài)性與中國南方漢人炎癥性腸病臨床表型相關(guān)[J].中國病理生理雜志,2014,30(5):902-908.

[5] 劉天聰,王大南,呂昌龍. IL-33及其受體ST2在炎癥性腸病中免疫調(diào)節(jié)作用的研究新進展[J].國際免疫學(xué)雜志,2012,35(4):269-272.

褚燕君，E-mail：junchu003@163.com。

R 733.4

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.01.017

2016-09-01)