鄧 麗，張新霞，張立平，樸文花

·實(shí)驗(yàn)研究·

血流感染病原菌分布及耐藥性分析單中心研究

鄧 麗1，2，張新霞1，2，張立平1，2，樸文花1，2

目的 探討血流感染的病原菌臨床分布和耐藥性。方法 收集臨床分離血流感染病原菌，細(xì)菌鑒定使用VITEK-2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀，用紙片擴(kuò)散法檢測(cè)細(xì)菌耐藥性，應(yīng)用Whonet 5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 臨床引起血流感染前5位病原菌，依次為凝固酶陰性葡萄球菌(33.9%)、大腸埃希菌(25.6%)、肺炎克雷伯菌(8.9%)、腸球菌屬(6.1%)和金黃色葡萄球菌(5.4%)，主要以40歲以上患者多見；未檢測(cè)到耐萬古霉素的葡萄球菌和腸球菌，大腸埃希菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)抗菌藥物耐藥率均高于40.0%，肺炎克雷伯菌和銅綠假單胞菌對(duì)抗菌藥物耐藥率都低于30.0%。結(jié)論 血流感染病原菌對(duì)各類抗菌藥物呈現(xiàn)不同程度的耐藥，定期監(jiān)測(cè)可為臨床醫(yī)生提供診療依據(jù)。

血流感染；病原菌；耐藥性

隨著各種抗菌藥物、激素和免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用，以及外科手術(shù)等侵襲性操作、免疫功能低下人群的增多，臨床血流感染已成為臨床上常見的重癥疾病之一，具有較高的發(fā)病率及死亡率[1]。本文回顧性分析我院臨床血流感染病原菌的分布和耐藥趨勢(shì)，為臨床進(jìn)行合理有效的抗菌治療提供依據(jù)，以縮短患者病程、改善預(yù)后并減輕患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

1 材料與方法

1.1 菌株來源:2012年1月-2014年12月本院送檢血培養(yǎng)標(biāo)本中陽性菌株共767株，剔除同一患者同一次發(fā)作中所獲重復(fù)菌株。質(zhì)控菌株有金黃色葡萄球菌 ATCC25923、大腸埃希菌 ATCC25922 和銅綠假單胞菌 ATCC27853，由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.2 標(biāo)本采集及培養(yǎng):在使用抗菌藥物前采集靜脈血，兒童采血量為1～5 mL，成人采集(雙瓶)血量10～16 mL。血培養(yǎng)標(biāo)本的采集、運(yùn)送和細(xì)菌分離培養(yǎng)參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[2]。

1.3 菌株鑒定和藥敏試驗(yàn):使用法國生物梅里埃公司全自動(dòng)微生物分析儀(VITEK2 Compact)，將細(xì)菌鑒定到種。哥倫比亞瓊脂、M-H培養(yǎng)基和藥敏紙片為英國OXOID公司產(chǎn)品。體外藥物敏感敏試驗(yàn)采用紙片擴(kuò)散法，操作及結(jié)果判斷以CLSI 2014年標(biāo)準(zhǔn)為標(biāo)準(zhǔn)[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用Whonet 5.6統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血流感染病原菌構(gòu)成:在757 株血流感染病原菌中，380 株(50.2%)為革蘭氏陰性菌，其中大腸埃希菌194株(25.6%)，其次為肺炎克雷伯菌 67 株(8.9%)、布魯菌屬30株(4.0%)；革蘭氏陽性菌368株(48.6%)，主要有凝固酶陰性葡萄球菌257株(33.9%)、腸球菌屬 46 株(6.1%)、金黃色葡萄球菌41株(5.4%)，見表1。

表1 血流感染病原菌的構(gòu)成比

2.2 主要病原菌感染患者的年齡分布:凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌屬和金黃色葡萄球菌，在0～10歲和60歲2個(gè)人群中檢出率較高；大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌，在60 歲以上人群中檢出率較高；布魯菌屬在21～40歲和41～60歲2個(gè)人群中檢出較多，在0～10歲未檢出；各種病原菌在11～20歲人群中均最少，見表2。

表2 主要病原菌感染患者的年齡分布(%)

2.3 血流感染主要病原菌耐藥情況：凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和腸球菌屬，對(duì)替考拉寧、萬古霉素和利奈唑胺均敏感，前兩者對(duì)青霉素G和氨芐西林的耐藥率均在95.0%以上；屎腸球菌糞腸球菌和對(duì)高濃度慶大霉素的敏感性為63.0%和37.5%，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南、美洛培南和厄他培南的耐藥率都很低；鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)米諾環(huán)素、頭孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐藥率較低，分別為4.0%、32.0%和32.0%；銅綠假單胞菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率都在30%以下，見表3-表4。

表3 血流感染主要革蘭氏陽性球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率(%)

表4 血流感染主要革蘭氏陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率(%)

抗菌藥物大腸埃希菌肺炎克雷伯菌鮑曼不動(dòng)桿菌銅綠假單胞菌氨曲南50．026．2-12．5亞胺培南0．01．552．46．2美洛培南0．51．648．06．2厄他培南0．51．7--慶大霉素45．015．652．06．2阿米卡星3．11．532．06．2環(huán)丙沙星58．212．952．06．2左旋氧氟沙星56．710．652．06．2多黏菌素B---0．0復(fù)方新諾明68．828．148．0-米諾環(huán)素18．421．34．0-

3 討論

對(duì)血流感染的病原菌分布及耐藥性分析國內(nèi)外各地區(qū)均有報(bào)道，近30年來，革蘭氏陽性球菌血流感染發(fā)生率逐年上升，李光復(fù)等[4]報(bào)道革蘭氏陽性球菌占61.9%，革蘭氏陰性桿菌占38.1%。本次研究顯示，我院2012年1月-2014年12月在血培養(yǎng)標(biāo)本中共分離出757株病原菌，其中革蘭氏陰性菌380株(50.2%)，革蘭氏陽性菌368株(48.6%)，真菌9株(1.2%)。

凝固酶陰性葡萄球菌是條件致病菌，其中表皮葡萄球菌致病率較高，在兒科和重癥監(jiān)護(hù)病房的標(biāo)本中檢出率較高，可能與廣譜抗生素的使用、靜脈內(nèi)裝置和靜脈營養(yǎng)的應(yīng)用有著密切關(guān)系。有研究發(fā)現(xiàn)凝固酶陰性葡萄球菌是新生兒敗血癥的主要病原菌，其分離率占葡萄球菌屬的64.5%[5]。金黃色葡萄球菌依然是細(xì)菌性血流感染的主要病原菌，從2008-2010年全國Mohnarin年度報(bào)告顯示，金黃色葡萄球菌的分離率為5.8%～9%[6]。從年齡結(jié)構(gòu)上看，在10歲以下的兒童中凝固酶陰性葡萄球菌檢出較多，而在60歲以上的老年人群中金黃色葡萄球菌較多。所有葡萄球菌對(duì)青霉素類和紅霉素類藥物的耐藥率高，對(duì)糖肽類抗生素均敏感，不同的是凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)頭孢第一和第二代耐藥率達(dá)80%，金黃色葡萄球菌對(duì)其耐藥率在40%左右。

本研究中糞腸球菌和屎腸球菌占血流感染病原菌的6.1%，分別為28株和18株。屎腸球菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌，二者均對(duì)萬古霉素、替考拉寧和利奈唑胺有較高敏感性，與我區(qū)其他醫(yī)院相關(guān)研究結(jié)果相近[7]。因此，對(duì)糞腸球菌和屎腸球菌感染者應(yīng)選用萬古霉素、替考拉寧和利奈唑胺。

本研究中大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在革蘭氏陰性桿菌中居第一、第二位，檢出率分別為25.6%和8.9%，好發(fā)年齡基本在40歲以上，大部分為免疫功能較差、有基礎(chǔ)疾病的患者。藥敏結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)碳青酶烯類抗生素都極其敏感，但也開始出現(xiàn)耐藥株。大腸埃希菌對(duì)頭孢類、喹諾酮類的耐藥率都在50%以上，對(duì)β-內(nèi)酰胺類加酶抑制劑類及氨基糖苷類的阿米卡星耐藥率低。肺炎克雷伯菌對(duì)大部分藥物的耐藥性均在30%左右。對(duì)于懷疑革蘭氏陰性桿菌血流感染的患者，可經(jīng)驗(yàn)性選用β-內(nèi)酰胺類加酶抑制劑及阿米卡星。

本研究中其他革蘭氏陰性桿菌，主要為布魯菌屬、鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌，分離率分別為4.0%、3.4%和 2.1%。鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌是條件致病菌，其血流感染常發(fā)生在有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病或免疫缺陷患者中。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥嚴(yán)重，對(duì)米諾環(huán)素、慶大霉素和頭孢哌酮/舒巴坦較敏感，對(duì)其他藥物的耐藥率均在50%以上。銅綠假單胞菌對(duì)藥物的敏感性較高，尤其對(duì)多黏菌素B無耐藥株。值得注意的是，布魯菌屬在本研究中的檢出率較高，可能與本地區(qū)畜牧業(yè)發(fā)達(dá)有關(guān)[8]。

目前，細(xì)菌性血流感染逐年增多，了解病原菌的流行分布特點(diǎn)和耐藥情況，可以預(yù)防和降低細(xì)菌性血流感染的發(fā)生，同時(shí)也有助于診斷和合理使用抗菌藥物，而且對(duì)預(yù)后改善亦有十分重要的意義。

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Analysis of bacterial distribution and antimicrobial resistance in bloodstream infection :a retrospective single center study

DENGLi1，ZHANGXinxia1，ZHANGLiping1，PIAOWenhua1.

DepartmentofLaboratoryMedicine,ThePeople'sHospitalofNingxia，Yinchuan,750002,China；2.TheFirstAffiliatedHospitalofNorthwestUniversityforNationalitiesYinchuan750004,China

Correspondingauthor:PIAOWenhua，Email:wenhuapiao@163.com

Objective To investigate the distribution and resistance of bacterial isolates in order to provide evidence for clinical diagnosis and treatment.Methods The bacterial isolates were collected and identified by the VITEK-2 Compact automatic microorganism analyzer and susceptibility testing by the disk diffusion method (K-B).The software whonet 5.6 was used for statistical analysis.Results Totally 757 strains of pathogenic bacteria were isolated,the highest department detection rate of the intensive care units (ICUs)was 20.5%，followed by the pediatric department (19.3%)and respiratory department (6.5%).The top five pathogenic bacteria were coagulase-negative staphylococcus (33.9%)，Escherichia coli (25.6%)，Klebsiella pneumoniae (8.9%)，Enterococcus spp.(6.1%)and Staphylococcus aureus (5.4%).Coagulase-negative staphylococcus bloodstream infections mainly occurred in the pediatric department.Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae bloodstream infections mainly occurred in the ICU and the hematology department，patients over age 40 years were the majority.Vancomycin-resistant Staphylococcus and Enterococcus was not detected.The resistance rates of escherichia coli to a variety of antibacterials were all above 40.0%.The resistance rates of Klebsiella pneumoniae to a variety of antimicrobial were less than 30.0%.The resistance rate of acinetobacter Baumannii to minocycline was lower (4.0%).The resistance rate of Pseudomonas aeruginosa to antibacterials were less than 30.0%.Conclusion Bloodstream infection mainly occurred in the ICUs，pediatric and respiratory medicine，topped with coagulase-negative staphylococci.The status of bacterial resistance showed different kinds,so regular surveillance of bacterial resistance can provide scientific basis for clinical diagnosis and treatment.

Bloodstreaminfection;Pathogens;Resistance

10.13621/j.1001-5949.2017.01.0053

寧夏自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(NZ16195)

1.寧夏人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，寧夏 銀川 750002 2.西北民族大學(xué)第一附屬醫(yī)院，寧夏 銀川 750002

樸文花，Email:wenhuapiao@163.com

http://www.cnki.net/kcms/detail/64.1008.R.20170116.1122.008.html

R515.3

A

2015-11-30 [責(zé)任編輯]馬興忠