張鑫，王云霞

(西安市食品藥品檢驗所，西安 710054)

HPLC法測定百合固金顆粒中芍藥苷和甘草苷

張鑫，王云霞

(西安市食品藥品檢驗所，西安 710054)

建立同時測定百合固金顆粒中芍藥苷和甘草苷含量的高效液相色譜法。采用Welch UltimateXB–C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流動相為乙腈–0.1%磷酸（體積比為14∶86），流速為1.0 mL／min，柱溫為30℃，檢測波長為230 nm。百合固金顆粒中芍藥苷在14.91～149.12 ng，甘草苷在34.75～347.52 ng范圍內均有良好線性，線性相關系數分別為0.999 5，0.999 2，平均回收率分別為96.7%，95.9%，測定結果的相對標準偏差小于3%(n=6)。該方法操作簡單，專屬性強，準確度高，重復性好，可以有效地控制百合固金顆粒的質量。

百合固金顆粒；芍藥苷；甘草苷；含量測定；HPLC

百合固金顆粒源于處方百合固金湯［1–3］，是由百合、地黃、熟地黃、麥冬、玄參、白芍、甘草等十味藥加輔料而制成，具有養(yǎng)陰潤肺、化痰止咳作用。臨床主要用于治療肺腎陰虛、干咳少痰、咽干吼痛等癥狀。處方中的百合主要用于潤肺止咳，白芍用于柔肝止痛，甘草具有緩急止痛，調和諸藥等作用。國家標準中甘草和白芍的處方量是相同的，白芍主要是通過測定芍藥苷的含量來控制其藥品的質量［4–6］，甘草是以薄層色譜進行鑒別［7］。由于處方中中藥成分較多，單一成分的含量不能很好地反應藥品內在質量，因此筆者提出通過同時測定白芍中的芍藥苷和甘草中的甘草苷來有效控制藥品質量。

目前對芍藥苷和甘草苷的測定主要有高效液相色譜法［8–12］、近紅外光譜法［13］、高效液相串聯質譜法等［14］，尚未有同時測定百合固金顆粒中芍藥苷和甘草苷含量的報道。筆者采用HPLC法同時測定百合固金顆粒中芍藥苷和甘草苷的含量，比目前標準中通過單一測定來控制藥品質量更全面，該方法能夠更完善地反映藥品中的活性成分，為更好地控制藥品質量提供了依據。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

高效液相色譜儀；Agilent1260型，配有四元洗脫泵，全自動進樣器，美國安捷倫公司；

紫外可見分光光度計：UV2700型，日本島津儀器公司；

電子天平：BT124S型，德國賽多利斯公司；

雙頻數控超聲波清洗器：KQ–70VDB型，昆山市超聲儀器有限公司；

百合固金顆粒：批號為150905，151002，151106，威海迪沙藥業(yè)集團有限公司；

芍藥苷（批號110736–201136）甘草苷（批號111610–201106）：購于中國食品藥品鑒定研究院；

乙腈：色譜純，美國Merck公司；

純凈水：杭州娃哈哈集團有限公司；

實驗所用試劑均為分析純。

1.2 儀器工作條件

色譜柱：Welch UltimateXB–C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：乙腈–0.1%磷酸（體積比14∶86）；流速：1.0 mL／min；柱溫：30℃；檢測波長：230 nm；進樣量：10 μL。

在上述色譜條件下測定對照品、供試品溶液及陰性樣品溶液。理論塔板數以芍藥苷峰計算不低于2000，分離度大于1.5，色譜圖見圖1。

圖1 對照品、供試品和陰性樣品的液相色譜圖

1.3 對照品溶液的制備

精密稱取芍藥苷7.24 mg、甘草苷4.66 mg分別置于50 mL容量瓶中，加70%乙醇稀釋至標線，作為對照品儲備液。分別精密吸取芍藥苷儲備液3 mL、甘草苷儲備液2 mL置于25 mL容量瓶中，加如70%乙醇稀釋至標線。得對照品溶液，芍藥苷的質量濃度為17.376 μg／mL，甘草苷的質量濃度為7.457 μg／mL。

1.4 供試品溶液的制備

取樣品10袋，混勻，研細，精密稱取1.0 g，置于具塞錐形瓶中。精密加入70%乙醇25 mL，密塞，稱量。超聲處理30 min，放冷，再稱量，用70%乙醇補足減失的質量，搖勻，用0.45 μm的濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

1.5 陰性樣品溶液的制備

按照處方工藝和處方量，取缺白芍和甘草的藥材作為陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。分別吸取對照品和供試品溶液及陰性樣品溶液各10 μL，進樣分析，結果表明所制備的陰性樣品溶液對芍藥苷和甘草苷的測定無干擾。

2 結果與討論

2.1 提取方法的選擇

試驗了不同提取時間(0.5 ，1.0 ，2.0 h)時甲醇和不同濃度的乙醇(30%，50%，70%乙醇)的提取效果，并比較了相同條件下，索氏、回流與超聲3種方法的提取效果。結果發(fā)現3種方法提取效果差異不大，用70%乙醇提取0.5 h時效果最佳。由于超聲提取方法操作簡單，故實驗采用70%乙醇超聲0.5 h對樣品進行提取。

2.2 流動相的選擇

測定條件的選擇主要參考2015版中國藥典［15］白芍、甘草含量測定條件，并對甲醇–水、甲醇–磷酸、乙腈–水及乙腈–0.1%磷酸流動相進行了試驗考察。結果發(fā)現以乙腈–0.1%磷酸為流動相時，供試品溶液色譜圖基線平穩(wěn)，理論塔板數高，峰形較好，分離度高，因此實驗選擇以乙腈–0.1%磷酸（14∶84）為流動相。

2.3 檢測波長的選擇

在190～500 nm處，對芍藥苷和甘草苷對照品溶液進行掃描，結果發(fā)現230 nm波長下兩者具有較好的吸收且峰形相對尖銳，干擾較小，故確定檢測波長為230 nm。

2.4 標準工作曲線方程及檢出限

分別精密吸取1.3中對照品溶液2，4，8，12，20 μL注入液相色譜儀，按照1.2色譜條件進行測定，以待測組分的量(X，ng)為橫坐標，相對應的色譜峰面積(Y)為縱坐標進行線性回歸，線性方程、相關系數見表1。

精密吸取1.4中供試品溶液，用70%乙醇逐步稀釋，按照1.2的色譜條件進樣，當S／N=3時，測得芍藥苷和甘草苷的檢出限分別為2.58，2.23 μg／g，見表1。

表1 線性方程、相關系數及檢出限

2.5 精密度試驗

移取1.4中供試品溶液，連續(xù)進樣6次，進行測定。結果表明，供試品溶液中芍藥苷色譜峰面積測定結果為257.6，258.3，256.0，257.5，254.6，251.0 mAU·s，相對標準偏差為1.06%；甘草苷峰色譜面積測定結果為75.6，73.9，75.4，73.2，75.5，74.2 mAU·s，相對標準偏差為1.35%，均小于3%，說明該法精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗

取1.4中供試品溶液，分別在0，1，2，4，8，12，24 h測定，連續(xù)考察24 h，記錄色譜峰面積。結果芍藥苷色譜峰面積分別為258.2，258.9，257.1，256.2，254.1，248.2 mAU·s，相對標準偏差為1.42%；甘草苷色譜峰面積分別為74.9，74.3，72.8，71.9，73.2，72.6，70.9 mAU*s，相對標準偏差為1.87%，表明供試品溶液在24 h內穩(wěn)定性良好。

2.7 重復性試驗

取批號為150905的百合固金顆粒樣品，按照1.4方法制備6份供試品溶液，然后分別注入液相色譜儀進行測定。結果每袋含芍藥苷為4.12，4.19，4.10，4.13，4.17，4.13 mg，相對標準偏差為0.81%；甘草苷含量為0.69，0.68，0.70，0.72，0.70，0.71 mg，相對標準偏差為2.02%，表明本方法的重復性良好。

2.8 加樣回收試驗

精密稱取已知含量的百合固金顆粒樣品（批號為150905）6份，按1.4方法配制樣品溶液。分別精密加入芍藥苷儲備液3 mL、甘草苷儲備液1 mL于樣品溶液中。按照方法進行測定，分別計算芍藥苷、甘草苷的平均回收率，結果見表2。由表2 可知，芍藥苷和甘草苷的回收率分別為96.73%，95.85%，相對標準偏差小于3%，因此該方法具有較好的準確性。

2.9 樣品測定

取百合固金顆粒樣品，按照1.4方法制備樣品溶液，每批樣品平行制備2份，按照1.2色譜條件進行測定，以外標法分別計算樣品中芍藥苷和甘草苷的含量，結果見表3。由表3可知，芍藥苷的含量為每袋4.15 mg，符合百合固金顆粒標準中每袋2.1 mg的要求；甘草苷的含量為每袋0.69 mg，雖然含量較低，但用本方法可以測定，由此可見該方法具有一定的適用性。

表2 加樣回收率試驗結果(n=6)

表3 百合固金顆粒樣品測定結果(n=2)

3 結語

隨著中成藥處方中藥味的增加，只通過測定其中某一種藥物的活性成分來控制其質量，具有很大的缺陷，多組分含量的同時測定能更好地反映中成藥的整體質量。采用高效液相色譜法同時測定百合固金顆粒中芍藥苷和甘草苷的含量來控制藥品質量，比現行標準中單一測定白芍中芍藥苷的成分更為有效，方法操作簡單，專屬性強，可以為更好地評價百合固金顆粒的質量提供參考。

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采用碳納米管調控生活垃圾堆肥重金屬釋放量的方法

申請公布號：CN106179198A申請公布日：2016.12.07

申請人：天津師范大學

摘要本發(fā)明公開了一種采用碳納米管調控生活垃圾堆肥重金屬釋放量的方法，淋溶管為高25 cm，內徑3 cm的PVC管，管底用紗布封底，每個柱內，底層填充河沙20 g高度1～2 cm，上層填充150 g生活垃圾堆肥和1%(質量分數)的碳納米材料形成混合基質。模擬夏季暴雨的淋洗，淋溶管靜置熟化30天，每天給管內加入適量的蒸餾水，管內土壤含水量為田間持水量，期間，室內溫度18～25 ℃，相對濕度35%～65%，光照為透入室內的自然光，第30天，進行淋溶實驗，淋溶液用原子吸收分光光度計TAS-990測定其中重金屬Cu，Pb，Cd的濃度。實驗結果顯示：采用碳納米管調控生活垃圾堆肥重金屬釋放量的方法可以幫助重金屬的原位固定，減少酸雨淋溶量。

一種液相色譜檢測三單體的方法

申請公布號：CN106198830A申請公布日：2016.12.07

申請人：泰山醫(yī)學院

摘要本發(fā)明提供一種液相色譜檢測三單體的方法，使用FL2200液相色譜儀，N2000色譜工作站，色譜柱Kromstar C18規(guī)格為150 mm×4.6 mm，5 μm；流動相a與流動相b的體積比為80～90∶10～20；檢測波長：220 nm；流速：0.8 mL/min；進樣體積：20 μL；柱溫：30℃。使用本發(fā)明的檢測方法，檢測時間小于10 min；分析精度可達0.01 ng；重現性好，相對誤差為0.2%；操作簡易、分析全部自動化；達到對間苯二甲酸二甲酯-5-磺酸鈉的質量進行有效控制的目的。

一種輝光放電質譜法檢測金屬中痕量雜質元素含量的方法

申請公布號：CN106198712A申請公布日：2016.12.07

申請人：錦州市國家光伏材料質量監(jiān)督檢驗中心

摘要本發(fā)明提供了一種輝光放電質譜法檢測金屬中痕量雜質元素含量的方法。該方法包括以下步驟：(1)將金屬樣品加工成片狀或針狀，置于硝酸溶液中進行超聲清洗，烘干；(2)將輝光放電質譜儀的樣品倉抽真空，打開球閥，將金屬樣品推入離子源腔內，打開高壓和輝光，通入工作氣體，調節(jié)放電電壓和放電電流，通過離子源調諧將分辨率調到3 000～4 800，基體峰強度為0.05～0.25 V，預濺射30～80 min；(3)選擇金屬基體和需測定的雜質元素，進行直流輝光放電質譜分析，得到金屬痕量雜質元素的濃度。本發(fā)明無需研磨以及拋光按規(guī)格切割好的樣品，只需清洗樣品，預處理簡單，能有效避免污染；固體直接進樣，操作簡單易行；對離子源進行有效調諧，靈敏度高，檢測限低，分辨率高，可一次性分析主含量元素至1×10–12級的元素。

一種超臨界流體色譜–氣相色譜–質譜測定卷煙主流煙氣中苯并[a]芘的方法

申請公布號：CN106198796A申請公布日：2016.12.07

申請人：云南中煙工業(yè)有限責任公司

摘要本發(fā)明公開了一種超臨界流體色譜(SFC)–氣相色譜–質譜(GC–MS)測定卷煙主流煙氣中苯并[a]芘的方法。本方法是在抽吸卷煙后，向捕集卷煙主流煙氣總粒相物的濾片中加入內標物及環(huán)己烷溶液，超聲提取后，萃取液用超臨界流體色譜進行分離凈化，切割含有苯并[a]芘的餾分再用GC–MS分析，根據目標物峰和同位素內標物峰的面積比定量。本發(fā)明能實現復雜基體中痕量待測成分與干擾物質的分離，排除了其它物質的干擾，提高了檢測的精確性，具有前處理簡單、分離速度快，定量準確、檢出限低等優(yōu)點。

鋰電池電解液的分析方法

申請公布號：CN106198813A申請公布日：2016.12.07

申請人：凱思普科技有限責任公司

摘要本發(fā)明涉及鋰電池電解液的分析方法，鋰電池電解液至少包括鋰鹽，鋰鹽包括至少一種含硼鋰鹽，該分析方法包括以下步驟：將待分析的電解液與甲醇水溶液混合，得到混合液；加熱混合液至40～80℃，攪拌并保持8～24 h；停止攪拌，靜置分層，分離出有機層；使用氣相色譜儀分析有機層中硼酸酯化物的含量；計算得到電解液中硼元素的含量。本發(fā)明能夠快捷方便地得到電解液中含硼鋰鹽的定性定量數據。

Determination of Paeoniforin and Liquoritin in Baiheguji Granules by HPLC

Zhang Xin， Wang Yunxia
(Xi’an Institute for Food and Drug Control， Xi’an 710054， China)

A method was established for the simultaneous determination of paeoniflorin and liquoritin content in Baiheguji granules by HPLC. Welch UltimateXB–C18colum (250 mm×4.6 mm，5 μm) was adopted with acetonitrile–0.1% phosphoric acid (14∶86) as the mobile phase at fow rate of 1.0 mL／min. Detection wave length was 230 nm，colum temperature was 30℃. The content of Paeoniforin and Liquoritin was linear with the peak area in the range of 14.91–149.12 ng and 34.75–347.52 ng, respectively, and the correlation coeffcient was 0.999 5, 0.999 2, respectively. The average recovery were 96.7%，95.9%, respectivly, and the relative standard deviation of detection results was less than with 3%(n=6). The method has advantages of simple operation，high accuracy stability and good reproducibility. It can be used for quality control of Baiheguji granules effectively.

Baiheguji; granules; paeoniforin liquoritin; content determination; HPLC

O657.7

：A

：1008–6145(2017)01–0088–04

10.3969／j.issn.1008–6145.2017.01.023

聯系人：張鑫；E-mail：awoshizx@126.com

2016–10–20