何 敏，廉國(guó)利，吳紅艷，黃燕萍

(西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科，陜西 西安 710061)

MEFV基因突變與兒童過(guò)敏性紫癜遺傳易感性的Meta分析

何 敏，廉國(guó)利，吳紅艷，黃燕萍

(西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科，陜西 西安 710061)

目的 探討MEFV基因突變與過(guò)敏性紫癜(HSP)的相關(guān)性。方法 計(jì)算機(jī)檢索PubMed、Web of Science、Medline、Cochrane Library、中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)(CNKI)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)，檢索從建庫(kù)至2015年12月31日公開(kāi)發(fā)表的關(guān)于MEFV基因突變與HSP相關(guān)性的文獻(xiàn)，使用Rev Man 5.0軟件進(jìn)行Meta分析。結(jié)果 最終納入6篇英文文獻(xiàn)，累計(jì)總病例數(shù)433例，其中MEFV基因突變136例，Meta分析結(jié)果顯示合并的MEFV基因突變率為0.3(95%CI：0.23，0.37)；3個(gè)亞組(關(guān)節(jié)炎組、消化道癥狀組、腎臟損害組)每組中MEFV基因突變與非突變比較均P>0.05，提示MEFV基因突變與臨床癥狀無(wú)顯著性差異。結(jié)論 MEFV基因突變可能是兒童HSP遺傳易感因素，但在臨床表現(xiàn)方面MEFV基因突變與非突變無(wú)明顯的區(qū)別。

兒童；MEFV基因突變；過(guò)敏性紫癜；Meta分析

過(guò)敏性紫癜(henoch-sch?nlein purpura，HSP)是一種lgA介導(dǎo)的全身性小血管炎，主要臨床表現(xiàn)為特征性皮膚紫癜、腹痛、消化道出血、關(guān)節(jié)腫痛及腎臟損害等，其發(fā)病率約為(12.9～15.0)/10萬(wàn)[1]。近些年研究發(fā)現(xiàn)，患有家族性地中海熱(familial mediterranean fever，F(xiàn)MF)的患兒并發(fā)HSP幾率較普通人較高[2]。FMF是一種常染色體隱性遺傳性疾病，屬于單基因自身炎癥性疾病，臨床表現(xiàn)以反復(fù)發(fā)作性發(fā)熱、腹膜炎、胸膜炎、關(guān)節(jié)炎、皮膚病變和心包炎等，長(zhǎng)期反復(fù)發(fā)作的炎性反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致腎臟淀粉樣變。MEFV基因是FMF的致病基因，編碼的蛋白質(zhì)在炎癥初期的白細(xì)胞促炎-抗炎機(jī)制中起負(fù)調(diào)節(jié)作用。MEFV基因突變導(dǎo)致蛋白表達(dá)減少或功能異常，引起自身炎癥性損傷。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，MEFV基因突變的HSP患兒臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查更嚴(yán)重[3]。目前有關(guān)HSP患兒MEFV基因突變率的報(bào)道都以小樣本為主，不足以全面了解HSP患兒的MEFV基因突變概況，因此本文通過(guò)Meta分析對(duì)HSP的MEFV基因突變率進(jìn)行分析，為HSP的發(fā)病遺傳學(xué)研究提供循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。

1材料與方法

1.1文獻(xiàn)檢索

1.1.1數(shù)據(jù)庫(kù)

檢索PubMed、Web of Science、Medline和Cochrane Library，中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)(CNKI)和萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)查找文獻(xiàn)，檢索時(shí)間均為建庫(kù)時(shí)間開(kāi)始至2015年12月31日。

中文檢索詞：過(guò)敏性紫癜、MEFV基因突變、家族性地中海熱；英文檢索詞：Henoch-Sch?nlein purpura/HSP or allergic purpura、MEFV gene mutations、Familial Mediterranean fever(FMF)。

1.1.3文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)

1.1.3.1研究?jī)?nèi)容 研究HSP患兒MEFV基因突變，基因突變檢測(cè)需涉及MEFV基因的所有外顯子，各文獻(xiàn)研究方法相似，文中報(bào)告數(shù)據(jù)完整，能直接或間接提供統(tǒng)計(jì)指標(biāo)計(jì)算基因突變率。

1.1.3.2研究對(duì)象 年齡0～16歲，性別、種族和教育程度不限，符合HSP診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]的患者。排除患有明顯心肺疾病、結(jié)締組織病、內(nèi)分泌代謝異常、原發(fā)性血小板減少性紫癜、凝血功能異常等出血性疾病。

1.1.4文獻(xiàn)排除標(biāo)準(zhǔn)

①包括成人MEFV基因突變的文獻(xiàn)；②綜述和重復(fù)收錄的文獻(xiàn)；③研究?jī)?nèi)容僅涉及MEFV基因的某些多態(tài)性位點(diǎn)，而非所有的MEFV基因外顯子；④數(shù)據(jù)不完整無(wú)法提取相關(guān)內(nèi)容。

1.2方法

每年可給牦牛進(jìn)行1次定期驅(qū)蟲(chóng)，流行嚴(yán)重的地方可進(jìn)行2次驅(qū)蟲(chóng)。第1次最好在秋末冬初，由夏季草場(chǎng)轉(zhuǎn)場(chǎng)到冬季草場(chǎng)前進(jìn)行。第2次可在春末夏初，在由冬季草場(chǎng)轉(zhuǎn)場(chǎng)到夏季草場(chǎng)前進(jìn)行。驅(qū)蟲(chóng)應(yīng)集中時(shí)間和地點(diǎn)，對(duì)驅(qū)蟲(chóng)后的家畜糞便進(jìn)行集中處理，防止二次污染。驅(qū)蟲(chóng)藥品可選用肝蛭凈（牦牛10 mg/kg體重）、丙硫咪唑（牦牛10 mg/kg體重）、蛭得凈（牦牛12 mg/kg體重，綿羊16 mg/kg體重）及吡喹酮等。由于西藏政府每年均為農(nóng)牧民群眾免費(fèi)配發(fā)一定量的丙硫咪唑和吡喹酮等驅(qū)蟲(chóng)藥品，因此只要做好組織和示范，定期驅(qū)蟲(chóng)工作并不難開(kāi)展。

1.2.1資料提取

由2名研究者獨(dú)立提取資料，交叉核對(duì)，有不一致觀(guān)點(diǎn)通過(guò)討論解決。所提取資料包括：①文獻(xiàn)的基本特征，包括文題、年份、出處、研究者姓名等；②納入文獻(xiàn)研究對(duì)象的基本特征、研究方法和結(jié)局指標(biāo)等。

1.2.2文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)

對(duì)觀(guān)察性研究采用紐卡斯?fàn)?渥太華量表(The Newcastle-Ottawa Scale，NOS)進(jìn)行評(píng)價(jià)[5]。量表總分共9分，根據(jù)量表的條目文獻(xiàn)質(zhì)量可分為3個(gè)等級(jí)，7～9分屬于高質(zhì)量文獻(xiàn)，4～6分屬于中質(zhì)量文獻(xiàn)，1～3分屬于低質(zhì)量文獻(xiàn)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，采用Rev Man 5.0進(jìn)行率的Meta分析，繪制森林圖進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，選擇模型計(jì)算合并統(tǒng)計(jì)量，同時(shí)進(jìn)行敏感性分析，利用漏斗圖分析發(fā)表偏倚。

2結(jié)果

2.1文獻(xiàn)檢索及流程圖

按制定的檢索策略，檢索出相關(guān)文獻(xiàn)共36篇，經(jīng)閱讀標(biāo)題、摘要或全文，最后篩選出符合納入標(biāo)準(zhǔn)的有6篇文獻(xiàn)，均為英文文獻(xiàn)，文獻(xiàn)檢索納入排除流程具體見(jiàn)圖1。

圖1 文獻(xiàn)檢索流程圖

Fig.1 Flow chart of the procedure for literature search

2.2納入文獻(xiàn)的基本情況

本研究納入Meta分析文獻(xiàn)共6篇，均為隊(duì)列研究。研究對(duì)象為HSP患兒，年齡為1～16歲，總病例數(shù)為433例，其中男性244例，女性189例，來(lái)自于土耳其、伊朗及以色列，其中突變?nèi)藬?shù)共136例。納入基本特征見(jiàn)表1。

表1 納入文獻(xiàn)的基本特征

2.3Meta分析結(jié)果

P及SE數(shù)據(jù)用Rev Man 5.0軟件計(jì)算所得結(jié)果如圖2所示，從圖中可知該研究結(jié)果間存在異質(zhì)性(I2=59%，P=0.03)，采用隨機(jī)效應(yīng)模型，合并的MEFV基因突變率為0.3(95%CI：0.23，0.37)。

2.4發(fā)表偏倚

MEFV基因突變率的漏斗圖顯示散點(diǎn)不太對(duì)稱(chēng)，說(shuō)明存在一定的發(fā)表偏倚，見(jiàn)圖3。

表2 MEFV基因突變率(P)及標(biāo)準(zhǔn)誤(SE)

Table 2 MEFV gene mutations rate and standard error

作者年份突變數(shù)/病例數(shù)(n)PSEGershoni等[2]200314/520．2690．061Ozcakar等[6]200827/800．3340．053Bayram等[7]201147/1070．4390．048Nikibakhsh等[8]201212/500．2400．060Dogan等[9]201318/760．2360．049Altug等[10]201318/680．2650．054

圖2 HSP患兒MEFV基因突變率的森林圖

Fig.2 Forest plot of MEFV gene mutation rate in HSP patients

圖3 HSP患兒MEVF基因突變率的漏斗圖

Fig.3 Funnel plot of MEFV gene mutation rate in HSP patients

2.5亞組分析

在6篇文獻(xiàn)中，有4篇提供了MEFV基因突變與臨床癥狀的數(shù)據(jù)，根據(jù)臨床癥狀劃分進(jìn)行亞組分析，分為關(guān)節(jié)炎組、消化道癥狀組、腎臟損害組，分析結(jié)果顯示P值均大于0.05，提示MEFV基因突變組與非突變組比較差異無(wú)顯著性，見(jiàn)圖4。

圖4 HSP患兒臨床癥狀關(guān)節(jié)炎、消化道癥狀及腎臟損害與MEFV

基因突變關(guān)系的森林圖

Fig.4 Forest plot of the association between clinical manifestations including arthritis, gastrointestinal symptoms and renal involvement and MEFV gene mutation

3討論

3.1過(guò)敏性紫癜的特征及發(fā)病機(jī)制

HSP是在兒童中最常見(jiàn)的系統(tǒng)性血管炎之一，其基本病變是彌漫性小血管炎伴有免疫球蛋白IgA免疫復(fù)合物沉積在皮膚、關(guān)節(jié)、腎臟、胃腸道等所致?lián)p害的多系統(tǒng)疾病。IgA免疫復(fù)合物沉積在腎臟組織而導(dǎo)致腎臟損害，即為紫癜性腎炎(henoch-sch?nlein purpura nephritis，HSPN)，是HSP最嚴(yán)重的遠(yuǎn)期并發(fā)癥。HSP的發(fā)病機(jī)制尚不完全明確，目前研究發(fā)現(xiàn)與IgAl異常糖基化密切相關(guān)[13]，而與IgA1異常糖基化密切相關(guān)的C1GALTl(β1，3半乳糖基轉(zhuǎn)移酶，C1β-3-GalT)基因、IL基因、血管舒縮和內(nèi)皮功能調(diào)節(jié)基因、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶基因、血管緊張素原基因、MEFV基因等與HSP的發(fā)病、病程進(jìn)展及疾病嚴(yán)重程度有一定的相關(guān)性[14-15]。

3.2 MEFV基因突變與過(guò)敏性紫癜的關(guān)系

MEFV是FMF的致病基因，由10個(gè)外顯子組成，全長(zhǎng)約10kb，mRNA為3.7kb，編碼產(chǎn)物由781個(gè)氨基酸組成，分子量為86kD的蛋白pyrin。Pyrin蛋白主要在人的多形核白細(xì)胞和單核細(xì)胞中表達(dá)，促炎細(xì)胞因子如干擾素λ(interferon，IFN-λ)和腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)可刺激pyrin的合成。Pyrin蛋白可能在炎癥反應(yīng)中對(duì)白介素1β(interleukin-1 beta，IL-1β)和核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear transcription factor-kappa B，NF-κB)的激活起負(fù)調(diào)節(jié)作用，而與疾病相關(guān)的突變可能會(huì)導(dǎo)致起始反應(yīng)細(xì)胞處于異常的持續(xù)激活狀態(tài)，使機(jī)體對(duì)有害刺激的反應(yīng)不斷放大，引起自身炎癥性病理?yè)p傷。因此，許多研究認(rèn)為MEFV基因突變導(dǎo)致其編碼的蛋白pyrin功能異常可能是引起自身炎癥反應(yīng)的重要原因[9，16]。

國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，在兒童血管炎性和風(fēng)濕性疾病中存在MEFV基因突變，例如HSP和幼年類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，與MEFV基因突變導(dǎo)致炎癥反應(yīng)擴(kuò)大有關(guān)[17]。目前已發(fā)現(xiàn)MEFV基因有90多個(gè)突變位點(diǎn)，最常見(jiàn)的突變有5種：M694V、V726A、M680I、M694I和E148Q。Nikibakhsh等[8]對(duì)50例伊朗HSP患兒檢測(cè)發(fā)現(xiàn)MEFV基因突變率達(dá)24%，其中M694V占22%。Mandana等[18]研究發(fā)現(xiàn)，土耳其兒童在臨床特征方面MEFV基因突變組與非突變組無(wú)區(qū)別，但其中M680I突變率較高，可能是誘發(fā)HSP的易感因素。Salah等[19]檢測(cè)埃及HSP患兒MEFV基因突變率高達(dá)61.7%，其中V726A等位基因頻率最高，并認(rèn)為MEFV基因突變與HSP易感性相關(guān)。韓麗芳等[20]對(duì)57例中國(guó)志愿者的研究發(fā)現(xiàn)，MEFV基因突變率達(dá)54%，其中E148Q突變率較高；He等[16]發(fā)現(xiàn)E148Q多態(tài)性可能與兒童HSP的發(fā)病有關(guān)，與同為亞洲人群日本的報(bào)道相似，也是以E148Q突變多見(jiàn)(約40%)[21]。各項(xiàng)研究中突變率的差異與不同的種族、地區(qū)、研究人群的選擇及研究設(shè)計(jì)不同有關(guān)。本研究通過(guò)Meta分析，對(duì)HSP患兒MEFV基因突變與患者特征進(jìn)行綜合分析，在433例患者中，136例有MEFV基因突變合并的MEFV基因總突變率為30%，突變率較高，提示MEFV基因突變可能是HSP發(fā)病的遺傳學(xué)因素之一。MEFV基因突變亞組分析中，提示突變組與非突變組在關(guān)節(jié)炎、消化道癥狀及腎臟損害等臨床表現(xiàn)方面無(wú)相關(guān)性，與Mandana等[18]的研究一致。

3.3本文局限性

本研究中，從MEFV基因突變率森林圖中可以看出各研究存在一定異質(zhì)性，同時(shí)漏斗圖不完全對(duì)稱(chēng)提示有發(fā)表偏倚，考慮其原因：納入文獻(xiàn)較少，研究涉及人種單一，僅為高加索人種，研究數(shù)量及樣本量相對(duì)小，缺乏對(duì)照組，影響Meta分析的結(jié)果；納入研究均為公開(kāi)發(fā)表的文獻(xiàn)，可能會(huì)導(dǎo)致發(fā)表偏倚；不同年齡段兒童HSP的發(fā)生率差異較大，但部分納入文獻(xiàn)中未提及患兒準(zhǔn)確年齡范圍；關(guān)于各突變位點(diǎn)的原始數(shù)據(jù)不完整，無(wú)法進(jìn)行進(jìn)一步的討論。因此需開(kāi)展更多設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)、大樣本、多中心的前瞻性隨機(jī)病例對(duì)照研究，進(jìn)一步明確MEFV基因突變與HSP的相關(guān)性。

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[專(zhuān)業(yè)責(zé)任編輯：孫曉勉]

Meta-analysis of the association between MEFV gene mutations and susceptibility to children with Henoch-Sch?nlein purpura

HE Min, LIAN Guo-li, WU Hong-yan, HUANG Yan-ping

(DepartmentofPediatrics,FirstAffliatedHospitalofMedicalCollege,Xi’anJiaotongUniversity,ShaanxiXi’an710061,China)

Objective To explore the association between MEFV gene mutations and susceptibility to Henoch-Sch?nlein purpura (HSP). Methods A comprehensive literature search of PubMed, Web of Science, Medline, Cochrane Library, National Knowledge Infrastructure of China (CNKI) and Wanfang Database was conducted to collect relevant studies till December 31, 2015, and the extracted data were statistically analyzed by using Rev Man version 5.0. Results A total of 433 cases from 6 English articles were enrolled in this study, in which 136 cases had MEFV gene mutations. The results of Meta-analysis showed that the pooled MEFV gene mutation rate was 0.3 (95%CI:0.23, 0.37). In three subgroups (arthritis group, gastrointestinal symptoms group and renal involvement group),Pvalue was greater than 0.05 when comparing MEFV gene mutations adn non-mutation, which indicated that MEFV gene mutation was not significantly correlated with clinical manifestation. Conclusion MEFV gene mutation may be a susceptible factor for children with HSP. There is no difference in the clinical manifestations between patients with and without MEFV mutation.

children; MEFV gene mutations; Henoch-Sch?nlein purpura (HSP); Meta-analysis

2016-08-07

何 敏(1979-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事小兒腎臟及免疫學(xué)疾病的臨床診治及研究。

黃燕萍，教授。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.01.014

R725.4

A

1673-5293(2017)01-0038-04