邱其周，程貴輝，陳虹余，熊 偉，黃月嬌，肖 毅

(廣州醫(yī)科大學附屬深圳沙井醫(yī)院新生兒科，廣東 深圳 518104)

孕婦孕期被動吸煙對母體血漿P-LAP、IL-6及IL-10的影響

邱其周，程貴輝，陳虹余，熊 偉，黃月嬌，肖 毅

(廣州醫(yī)科大學附屬深圳沙井醫(yī)院新生兒科，廣東 深圳 518104)

目的 探討孕期被動吸煙母體胎盤亮氨酸氨基肽酶(P-LAP)、白介素(IL-6)及IL-10在正常孕婦和早產(chǎn)孕婦血漿中的變化趨勢，并分析其對早產(chǎn)的影響。方法 選取175例早產(chǎn)孕婦(28～36+6周)為研究組(早產(chǎn)組)，根據(jù)有無被動吸煙分為早產(chǎn)被動吸煙組(n=96)和早產(chǎn)非被動吸煙組(n=79)；同時選取177例足月孕婦為對照組(足月組)，同樣根據(jù)妊娠期被動吸煙情況，分為足月被動吸煙組(n=78)和足月非被動吸煙組(n=99)。采用酶聯(lián)免疫吸附法，測定以上各組孕婦在相應孕周時的血漿P-LAP、IL-6和IL-10濃度。結果 早產(chǎn)被動吸煙組孕婦血漿P-LAP、IL-6和IL-10濃度與足月被動吸煙組比較差異有統(tǒng)計學意義(tP-LAP=3.678、tIL-6=3.865、tIL-10=2.114，均P<0.05)，早產(chǎn)被動吸煙組孕婦血漿P-LAP、IL-6及IL-10濃度與早產(chǎn)非被動吸煙組比較差異有統(tǒng)計學意義(tP-LAP=4.479、tIL-6=4.556、tIL-10=2.202，均P<0.05)；而足月被動吸煙組孕婦血漿P-LAP、IL-6及IL-10濃度與足月非被動吸煙組比較差異無統(tǒng)計學意義(tP-LAP=1.170、tIL-6=1.722、tIL-10=1.423，均P>0.05)。結論 孕期被動吸煙可致孕婦P-LAP和IL-10水平降低，IL-6水平升高，引起早產(chǎn)分娩啟動，可能是引起孕期被動吸煙孕婦早產(chǎn)發(fā)生的關鍵因素。

被動吸煙；胎盤亮氨酸氨基肽酶；白細胞介素-6；白細胞介素-10；早產(chǎn)

近年來，我國早產(chǎn)兒發(fā)生率有逐年上升趨勢，據(jù)2005年中華兒科學分會的調(diào)查，我國早產(chǎn)兒發(fā)生率為8.1%。越來越多的證據(jù)顯示，早產(chǎn)是一種免疫調(diào)節(jié)偏移過程，其中炎癥因子在早產(chǎn)和正常分娩過程中均發(fā)揮了非常重要的作用。催產(chǎn)素酶即胎盤亮氨酸氨肽酶(placental leucine aminopeptidase，P-LAP)，是唯一能降低催產(chǎn)素的膜氨基肽酶，是母胎之間相互制約的屏障。有研究顯示，孕期被動吸煙是導致早產(chǎn)的重要原因之一[1]。本研究通過監(jiān)測孕期被動吸煙的不同孕周的孕婦血漿中的P-LAP 、白細胞介素-6(interleukin 6，IL-6)和白細胞介素-10(interleukin 10，IL-10)的濃度，了解孕期被動吸煙孕婦血漿中P-LAP 、IL-6和IL-10的變化趨勢，探討孕婦孕期被動吸煙可能發(fā)生的炎癥變化以及對P-LAP的影響，進而分析孕期被動吸煙與早產(chǎn)的病因關系。

1對象與方法

1.1研究對象

隨機選取2014年1月至2016年1月在廣州醫(yī)科大學附屬深圳沙井醫(yī)院接受產(chǎn)前檢查，在產(chǎn)科住院、分娩的產(chǎn)婦作為研究對象，用橫斷面調(diào)查方法，對其進行問卷調(diào)查，收集孕婦在懷孕期間的被動吸煙情況，以及妊娠史、疾病史、職業(yè)、工作環(huán)境等。接受調(diào)查的孕婦最終分為4組，分娩胎齡在28～36+6周的孕婦為早產(chǎn)組(n=175)，同時根據(jù)妊娠期間是否存在被動吸煙，分為早產(chǎn)被動吸煙組(n=96)和早產(chǎn)非被動吸煙組(n=79)；以分娩胎齡≥37周的孕婦為足月組(n=177)，根據(jù)妊娠期間是否存在被動吸煙，分為足月被動吸煙組(n=78)和足月非被動吸煙組(n=99)。研究對象的排除標準：除入選標準的條件外，出現(xiàn)以下任何1種情況者即從研究對象中排除：以任何理由拒絕調(diào)查及檢查者；有主動吸煙史；發(fā)現(xiàn)說謊或者故意隱瞞實情者；有明顯的精神或神經(jīng)性疾病，不能準確回答問題者；以及出生時存在宮內(nèi)感染、胎膜早破、新生兒窒息、人工引產(chǎn)或意外引起的早產(chǎn)。本研究遵循的程序符合廣州醫(yī)科大學附屬深圳沙井醫(yī)院人體試驗委員會制定的倫理學標準，得到該委員會批準，征得受試對象知情同意，并與之簽署臨床研究知情同意書。

1.2被動吸煙診斷標準

被動吸煙也被稱為“二手煙”、“強迫吸煙”或“環(huán)境香煙煙霧(environmental tobacco smoke，ETS)”。世界衛(wèi)生組織提出的被動吸煙定義為：被動吸煙者為不吸煙者每周至少有1天以上被動吸入吸煙者呼出的煙霧超過15min。

1.3研究方法

1.3.1標本的采集及處理

對早產(chǎn)孕婦于產(chǎn)前抽取肘靜脈血5mL，對足月孕婦則于產(chǎn)檢時在相應孕周(28～36+6周)抽取肘靜脈血5mL，以上標本分別置于乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝管混勻后存于4℃冰箱內(nèi)，2h內(nèi)進行離心(1 000r/min×30min)去除顆粒，然后將血漿迅速小心分離置 EP管后存放于-70℃～80℃冰箱內(nèi)統(tǒng)一保存待測。

1.3.2檢測方法

主要試劑為P-LAP 酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA) 試劑盒和IL-6、IL-10 ELISA試劑盒。采用ELISA法(嚴格按試劑盒說明進行操作)檢測母體血漿P-LAP、IL-6及IL-10。

1.4統(tǒng)計學方法

應用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件，對各組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。各組數(shù)據(jù)用均值±標準差表示，采用t檢驗、方差分析或卡方檢驗。以P<0.05作為有統(tǒng)計學意義的標準，P<0.01作為有顯著統(tǒng)計學意義的標準(均為雙側P值)。

2結果

2.1孕婦的一般情況比較及孕期被動吸煙的情況

早產(chǎn)的孕婦175例，其中存在被動吸煙孕婦96例，而足月產(chǎn)的孕婦有177例，其中被動吸煙孕婦78例。在早產(chǎn)孕婦中被動吸煙的孕婦中學及以下教育水平比例為40.6%，大專及以上教育水平的比例為28.1%，與非被動吸煙者比較，其差異有統(tǒng)計學意義(P=0.041)，各組中被動吸煙孕婦與非被動吸煙孕婦的教育水平具有顯著差異性(P<0.05)，提示被動吸煙情況與孕婦的文化程度有一定關系。各組孕婦的平均年齡、孕周、家庭平均收入等比較無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)，見表1。

表1 各組孕婦的一般情況比較

(轉下表)

(續(xù)上表)

項目早產(chǎn)組(n=175)足月組(n=177)被動吸煙(n=174)非被動吸煙(n=178)F1/χ21P1F2/χ22P2孕前BMI(kg/m2)0．3660．8330．2160．899 營養(yǎng)不良(<18．5)34(19．43)30(16．95)32(18．39)32(17．98) 正常(18．5～23．9)124(70．86)129(72．88)126(72．41)127(71．35) 超重/肥胖(≥24)17(9．71)18(10．17)16(9．20)19(10．67)孕期飲酒0．0010．9830．0010．983 無168(96．00)170(96．05)167(95．98)171(96．07) 有7(4．00)7(3．95)7(4．02)7(3．93)新生兒性別0．0120．9980．0000．914 男86(49．14)88(49．72)86(49．43)88(49．44) 女89(50．86)89(50．28)88(50．57)90(50．56)

注：P1值為早產(chǎn)組與足月組的比較，孕周的▲P<0.01；P2值為被動吸煙組與非被動吸煙組的比較，文化程度的﹡P<0.05。

2.2早產(chǎn)孕婦或足月產(chǎn)孕婦與被動吸煙的關系

早產(chǎn)組175例，其中被動吸煙孕婦96例(54.86%)，足月組177例，被動吸煙有78例(44.07%)，兩組間差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.09，P<0.05)；由此可見，孕期被動吸煙可增加早產(chǎn)的發(fā)生風險，OR=1.54，95%CI：1.01～2.35，見表2。

表2 孕期被動吸煙對早產(chǎn)的影響[n(%)]

Table 2 Influence of passive smoking during pregnancy on preterm birth[n(%)]

2.3早產(chǎn)與足月孕婦血漿P-LAP、IL-6及IL-10水平比較

組間比較：早產(chǎn)被動吸煙組孕婦血漿P-LAP及IL-10含量較足月被動吸煙組孕婦低，而IL-6的含量則較足月被動吸煙組孕婦高，且差異均有統(tǒng)計學意義(tP-LAP=3.678、tIL-6=3.865、tIL-10=2.114，均P<0.05)；早產(chǎn)非被動吸煙組孕婦血漿IL-6含量較足月非被動吸煙組稍高，但其差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，且在P-LAP及IL-10的含量比較中，差異同樣無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。組內(nèi)比較：早產(chǎn)被動吸煙組孕婦血漿P-LAP及IL-10含量較早產(chǎn)非被動吸煙組的低，而IL-6的含量則較早產(chǎn)非被動吸煙組的高，且差異均有統(tǒng)計學意義(tP-LAP=4.479、tIL-6=4.556、tIL-10=2.202，均P<0.05)；足月被動吸煙組孕婦血漿IL-6含量較足月非被動吸煙組孕婦高，但其差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，足月被動吸煙組與足月非被動吸煙組血漿P-LAP及IL-10含量比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 早產(chǎn)與足月孕婦血漿P-LAP、IL-6及IL-10水平比較

注：①早產(chǎn)被動吸煙組孕婦血漿P-LAP、IL-6、IL-10含量與早產(chǎn)非被動吸煙組比較：t=4.479，P=0.000；t=4.556，P=0.000；t=2.202，P=0.029。②足月被動吸煙組孕婦血漿P-LAP、IL-6、IL-10含量與足月非被動吸煙組比較：t=1.170，P=0.244；t=1.722，P=0.087；t=1.423，P=0.157。

3討論

3.1被動吸煙對妊娠結局的影響

吸煙的危害不僅僅對于吸煙者本身，而且二手煙暴露人群受煙草危害嚴重，婦女、兒童受煙草的危害尤為嚴重。早產(chǎn)的病因是多方面的，目前可明確的早產(chǎn)原因有：吸煙、感染、胎膜早破、營養(yǎng)不良、酗酒、多胎妊娠、凝血異常、胎盤早剝等[2-3]。有研究表明，香煙中含有的尼古丁會增加早產(chǎn)的風險，不過其影響早產(chǎn)風險的機制尚不明確[4]。本研究結果顯示，在早產(chǎn)孕婦中被動吸煙的孕婦中學及以下教育水平比例為40.6%，大專及以上教育水平的比例為28.1%，與非被動吸煙組比較的差異有統(tǒng)計學意義(P=0.041)，同時在所有調(diào)查的孕婦中被動吸煙與非被動吸煙教育水平比較差異也有統(tǒng)計學意義(P=0.017)，這說明文化程度與被動吸煙存在一定關系。本研究發(fā)現(xiàn)早產(chǎn)孕婦存在被動吸煙率為54.86%(96/175)，而足月產(chǎn)孕婦存在被動吸煙率為44.07%(78/177)，通過比較顯示孕期被動吸煙可增加早產(chǎn)的發(fā)生率(P=0.043)，風險增高(OR=1.54)，研究結果與上述既往報道基本一致。

3.2孕期被動吸煙對母體炎癥反應的影響

ETS是一種混合物，其內(nèi)含有近5 000種已知的化學物質(zhì)，如顆粒物(焦油)、尼古丁酸、一氧化碳、氰化物、酚類苯蒽等。吸煙可影響免疫系統(tǒng)的各個方面，孕期被動吸煙可產(chǎn)生大量的有害物質(zhì)，激活單核巨噬細胞系統(tǒng)，對T淋巴細胞的促增殖作用加強，T淋巴細胞分泌促炎因子增多，而抑炎因子分泌減少。據(jù)2004年Hebisch等研究發(fā)現(xiàn)，妊娠期母體血清白介素始終保持在較低水平，無明顯改變，而啟動分娩的炎癥反應使白介素水平在分娩時都升高。妊娠期間，子宮蛻膜、羊膜、絨毛膜和胎盤滋養(yǎng)層細胞都具有合成IL-6的能力，IL-6在母胎界面的過渡及異常生成對妊娠有害，適量的IL-6在妊娠中主要起免疫調(diào)節(jié)作用， IL-6分泌過多，則會導致其它細胞因子分泌紊亂，各細胞因子之間比例失衡，易使母體對胎兒產(chǎn)生類似于器官移植急性排斥反應樣的免疫學反應，而出現(xiàn)早產(chǎn)等病理情況。IL-10則可以抑制其他細胞產(chǎn)生各種促炎癥細胞因子，是強有力的免疫和炎癥抑制因子，參與人體的免疫、胚胎生長發(fā)育等一系列生理過程，IL-10可以通過關閉IL-6合成的啟動基因, 抑制IL-6 mRNA的表達及 IL-6的產(chǎn)生，抑制單核細胞前列腺素(PGs)的合成從而抑制早產(chǎn)發(fā)生。孕期被動吸煙可致孕婦血漿IL-6濃度升高，而IL-10濃度下降。

當催產(chǎn)素合成增多時會誘發(fā)子宮肌層的收縮和分娩的發(fā)動，P-LAP被認為在降解催產(chǎn)素的合成和保持妊娠的動態(tài)平衡方面起到重要作用，因此，通過連續(xù)監(jiān)測母體血P-LAP的活性可用于監(jiān)測妊娠特有疾病，P-LAP水平下降是早產(chǎn)和正常分娩發(fā)動的關鍵因素之一[5]。孕妊期間有很多因素可能導致炎癥變化及細胞因子平衡紊亂，其中ETS可能就起到不小作用，其中的有害物質(zhì)還可通過內(nèi)皮細胞及單核細胞分泌IL-6、TNF-α等，參與機體免疫反應和炎癥反應，它們的作用與組織中的含量有關，正常水平對機體有利，產(chǎn)生過多則會引起機體一系列炎癥損傷，使胎兒失去免疫保護并引起被母體內(nèi)源性免疫破壞的結果。

因此，本研究根據(jù)孕期被動吸煙導致早產(chǎn)發(fā)生率升高，對其進行炎癥因子分析顯示，早產(chǎn)被動吸煙組孕婦血漿P-LAP及IL-10含量較足月被動吸煙組孕婦低，而IL-6的含量則較足月被動吸煙組孕婦高，且差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)；早產(chǎn)非被動吸煙組孕婦血漿IL-6含量較足月非被動吸煙組稍高，但其差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，且在P-LAP及IL-10的含量比較中，差異同樣無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。早產(chǎn)被動吸煙組孕婦血漿P-LAP及IL-10含量較早產(chǎn)非被動吸煙組的低，而IL-6的含量則較早產(chǎn)非被動吸煙組的高，且差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)；足月被動吸煙組孕婦血漿IL-6含量較足月非被動吸煙組孕婦高，但其差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，足月被動吸煙組與足月非被動吸煙組血漿P-LAP及IL-10含量比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結果的比較結果說明孕期被動吸煙可致早產(chǎn)孕婦P-LAP濃度的下降，則會導致催產(chǎn)素的降解受阻，隨即觸發(fā)催產(chǎn)素/催產(chǎn)素受體系統(tǒng)，根據(jù)母體P-LAP濃度水平的變化，提示其中的免疫細胞因子有抑制催產(chǎn)素酶表達的可能性，從而使催產(chǎn)素酶水平降低；并且孕期被動吸煙導致孕婦體內(nèi)炎癥因子IL-6、IL-10發(fā)生變化，從而誘發(fā)早產(chǎn)的啟動。

但因本研究中混雜因素多，難以控制，且樣本量仍不足，研究觀察時間較短，可能影響結果的客觀性，因此需進一步進行多中心研究并結合動物實驗，為今后預防和治療早產(chǎn)提供更充足的依據(jù)及更好地落實國家控煙政策。

[1]丁鵬.被動吸煙及母親CYP1A1、GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性與早產(chǎn)關系的病例對照研究[D].廣州:中山大學,2010.

[2]Ko T J,Tsai L Y,Chu L C,etal.Parental smoking during pregnancy and its association with low birth weight, small for gestational age, and preterm birth offspring: a birth cohort study[J].Pediatr Neonatol,2014,55(1):20-27.

[3]張小松,趙更力,楊慧霞,等.15家城市醫(yī)療機構早產(chǎn)發(fā)生情況及影響因素分析[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學雜志,2016,19(6):456-461.

[4]Wikstrom A K,Cnattingius S,Galanti M R,etal.Effect of Swedish snuff (snus) on preterm birth[J]. BJOG,2010,117(8):1005-1010.

[5]熊瑛,楊祖菁.母血漿P-LAP與早產(chǎn)發(fā)動關系的相關性臨床研究[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展,2011,20(9):722-725.

[專業(yè)責任編輯： 于學文]

Influence of maternal passive smoking during pregnancy on maternal plasma P-LAP, IL-6 and IL-10

QIU Qi-zhou, CHENG Gui-hui, CHEN Hong-yu, XIONG Wei, HUANG Yue-jiao, XIAO Yi

(NeonatalDepartment,ShenzhenShajingHospitalAffiliatedtoGuangzhouMedicalUniversity,GuangdongShenzhen518104,China)

Objective To study the changes of placental leucine aminopeptidase (P-LAP), interleukin 6 (IL-6) and interleukin 10 (IL-10) in mothers with passive smoking during pregnancy in full term pregnant women and pregnant women with preterm labor and to analyze their impact on preterm birth. Methods Altogether 175 cases of pregnant women with preterm labor (28-36+6weeks) were selected in observation group (preterm group) and further divided into preterm group with passive smoking (n=96) and preterm group without passive smoking (n=79) based on whether passive smoking existed during pregnancy. At the same time, 177 cases of full term pregnant women were chosen in control group (full term group) and further divided into full term group with passive smoking (n=78) and full term group without passive smoking (n=99) according to situation of passive smoking during pregnancy. Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 of above pregnant women in corresponding gestational weeks were detected using enzyme linked immunosorbent assay. Results Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 in preterm group with passive smoking were significantly different from those in full term group with passive smoking (tP-LAP=3.678,tIL-6=3.865,tIL-10=2.114, allP<0.05). Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 in preterm group with passive smoking were significantly different from those in preterm group without passive smoking (tP-LAP=4.479,tIL-6=4.556,tIL-10=2.202, allP<0.05). Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 in full term group with passive smoking were not significantly different from those in full term group without passive smoking (tP-LAP=1.170, tIL-6=1.722,tIL-10=1.423, allP>0.05). Conclusion Passive smoking during pregnancy can cause drop of P-LAP and IL-10 levels and increase of IL-6 level, leading to start of preterm delivery, which is likely the key factor causing preterm delivery in pregnant women with passive smoking.

passive smoking;placenta leucine aminopepticlase(P-LAP);Interleukin 6(IL-6);Interleukin 10(IL-10);Preterm birth

2016-09-20

邱其周(1980-)，男，副主任醫(yī)師，碩士，主要從事新生兒危重癥醫(yī)學研究。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.01.016

R714.1

A

1673-5293(2017)01-0044-04