胡新艷，劉雄軍，周幼楊，吳小平,2，歐陽(yáng)珊

(1.南昌大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，南昌 330031；2.南昌大學(xué)生命科學(xué)研究院流域生態(tài)研究所，南昌 330031)

基于微衛(wèi)星的胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體遺傳多樣性及人工放流監(jiān)測(cè)的分析

胡新艷1，劉雄軍1，周幼楊1，吳小平1,2，歐陽(yáng)珊1

(1.南昌大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，南昌 330031；2.南昌大學(xué)生命科學(xué)研究院流域生態(tài)研究所，南昌 330031)

利用13個(gè)微衛(wèi)星分子標(biāo)記研究了我國(guó)重慶、江西永豐、江西新干三個(gè)胭脂魚(yú)(Myxocyprinusasiaticus)繁殖基地子一代群體的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示，13個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)均呈現(xiàn)多態(tài)性，等位基因數(shù)目為8～17個(gè)，多態(tài)信息含量為0.35～0.84，Shannon多樣性指數(shù)為1.61～1.64，觀測(cè)雜合度為0.108 1～0.825 5，期望雜合度為0.384 6～0.856 8，Hard-Weinberg遺傳偏離指數(shù)(D)為-0.718 9～0.072 5，表明三個(gè)養(yǎng)殖群體遺傳多樣性均較高。從群體間的遺傳結(jié)構(gòu)看，三個(gè)養(yǎng)殖群體間存在遺傳分化，其中江西新干胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體內(nèi)具有顯著的遺傳分化。野外采自贛江的5尾胭脂魚(yú)的遺傳結(jié)構(gòu)分析推斷其可能來(lái)自永豐和新干胭脂魚(yú)繁殖基地的子一代個(gè)體，其結(jié)果對(duì)胭脂魚(yú)的人工放流監(jiān)測(cè)有指導(dǎo)意義。

微衛(wèi)星；胭脂魚(yú)(Myxocyprinusasiaticus)；遺傳多樣性；放流監(jiān)測(cè)

胭脂魚(yú)(Myxocyprinusasiaticus)，隸屬于鯉形目(Cypriniformes)亞口魚(yú)科(Catostomidae)胭脂魚(yú)屬(Myxocyprinus)，是亞洲大陸唯一分布的單型屬、種。主要分布于我國(guó)的長(zhǎng)江和閩江流域[1]。近年來(lái)，由于過(guò)度捕撈、水域污染，水利工程建設(shè)等影響，胭脂魚(yú)資源量急劇下降[2]。目前閩江胭脂魚(yú)已絕跡，長(zhǎng)江胭脂魚(yú)種群的資源也日趨枯竭，同時(shí)，長(zhǎng)江的胭脂魚(yú)可能是現(xiàn)存胭脂魚(yú)的唯一野生種群[3-4]。因此，胭脂魚(yú)被列入我國(guó)二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)動(dòng)物[5]。

隨著胭脂魚(yú)的保護(hù)和野生種群資源恢復(fù)關(guān)注度的提高，了解養(yǎng)殖和野生的種群資源狀況是必要的。人工增殖放流是維持胭脂魚(yú)種群資源的有效途徑，但目前胭脂魚(yú)增殖放流效果評(píng)估還沒(méi)有準(zhǔn)確的方法。此外, 增殖放流效果無(wú)法得到完整的評(píng)估結(jié)果, 同時(shí)缺乏增殖放流對(duì)野生群體遺傳多樣性和生態(tài)系統(tǒng)平衡的負(fù)面影響等的評(píng)價(jià)內(nèi)容[6]。微衛(wèi)星分子標(biāo)記符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律, 多態(tài)性高且為共顯性遺傳, 是一種極具應(yīng)用價(jià)值的遺傳分子標(biāo)記。在瀕危動(dòng)物種群特別是保護(hù)遺傳學(xué)上得到越來(lái)越多的應(yīng)用[7], 如微衛(wèi)星遺傳多樣性檢測(cè)[8]、個(gè)體/家系溯源[9]、遺傳圖譜構(gòu)建[10]等。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)對(duì)胭脂魚(yú)研究工作較多，但大多數(shù)是關(guān)于在形態(tài)解剖[11]、繁殖育種[12]、細(xì)胞遺傳學(xué)分析[13]等方面的研究。而利用微衛(wèi)星分子標(biāo)記分析胭脂魚(yú)種群遺傳特性以及評(píng)估人工放流檢測(cè)效果的研究較少[14-15]。本實(shí)驗(yàn)基于微衛(wèi)星分子標(biāo)記對(duì)長(zhǎng)江中下游主要胭脂魚(yú)繁殖基地及野生胭脂魚(yú)個(gè)體的遺傳多樣性及遺傳結(jié)構(gòu)，以期為監(jiān)測(cè)其群體遺傳資源的變動(dòng)水平及利用其優(yōu)良遺傳資源提供指導(dǎo)，為人工放流監(jiān)測(cè)提供有效方法。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

胭脂魚(yú)幼魚(yú)于2015年12月采自重慶萬(wàn)州胭脂魚(yú)原種場(chǎng)和江西新干胭脂魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)子一代各50尾；仔魚(yú)于2014年4月采自江西永豐胭脂魚(yú)良種場(chǎng)子一代，47尾。2015年7月至10月，采自江西贛江胭脂魚(yú)樣本5尾。所有標(biāo)本取鰭條保存于-80 ℃冰箱中備用。

1.2 方法

1.2.1 基因組DNA提取

取鰭條組織50 mg剪碎，用試劑盒(北京天根生化科技有限公司)提取基因組DNA，分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度。

1.2.2 PCR反應(yīng)及產(chǎn)物的檢測(cè)

PCR反應(yīng)體系參照成為為等[15，16]，并做了優(yōu)化 。利用13對(duì)多態(tài)性微衛(wèi)星標(biāo)記[16-17]，合成熒光引物(HEX和FAM以及TAMRA)，在合適的退火溫度下進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR引物和熒光引物均由上海生物工程有限公司合成。

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，并在紫外凝膠成像系統(tǒng)觀察和拍照。具有目的條帶的PCR產(chǎn)物送上海生物工程公司進(jìn)行STR檢測(cè)，STR分型結(jié)果用GeneMapper v4.0軟件分析。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析

微衛(wèi)星位點(diǎn)的等位基因數(shù)目(Na)、有效等位基因數(shù)目(Ne)、Shannon 多樣性指數(shù)(I)、觀測(cè)雜合度(Ho)、期望雜合度(He)和Nei’s遺傳距離用POPGENE 1.32軟件計(jì)算[18]； PIC-CALC 0.6軟件計(jì)算多態(tài)信息含量(PIC)，Cervus3.0軟件計(jì)算無(wú)效等位基因頻率(F)及檢驗(yàn)哈迪-溫伯格平衡(HWE)。Hardy-Weinberg 平衡偏離指數(shù)(D)按公式: D=(Ho -He)/He計(jì)算[19]。Structure2.3.4軟件計(jì)算種群間的遺傳結(jié)構(gòu)并聚類(lèi)分析[20]。

2 結(jié)果

2.1 微衛(wèi)星位點(diǎn)多態(tài)性分析

對(duì)三個(gè)養(yǎng)殖群體和江西贛江野生胭脂魚(yú)的13個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記分析檢測(cè)得到154個(gè)等位基因，其中等位基因數(shù)目范圍為8～17個(gè)，平均等位基因數(shù)目為12個(gè)。等位基因數(shù)目最少的位點(diǎn)為Mas16、 Mas18和Mas34，均為8個(gè)；最多的位點(diǎn)為Mas11，檢測(cè)到17個(gè)；其中Mas6和Mas16的微衛(wèi)星測(cè)序圖如圖1。期望雜合度范圍為0.384 6～0.856 8，平均期望雜合度為0.764 1。觀測(cè)雜合度范圍為0.108 1～0.825 5，平均觀測(cè)雜合度為0.637 8。多態(tài)信息含量(PIC)范圍為0.35～0.84，平均多態(tài)信息含量為0.74。通過(guò)Hardy-Weinberg平衡檢測(cè)，位點(diǎn)Mas5、Mas13偏離Hardy-Weinberg平衡，位點(diǎn)Mas34、Mas18、Mas43顯著偏離Hardy-Weinberg平衡，其余位點(diǎn)均處于平衡狀態(tài)(表1)。

表1 胭脂魚(yú)微衛(wèi)星位點(diǎn)特征Tab.1 Characteristics of microsatellite loci in M.asiaticus

續(xù)表1

注: NS 表示未顯著偏離Hardy-Weinberg 平衡(P>0.05)；*表示顯著偏離Hardy-Weinberg 平衡(P<0.05)；**表示極顯著偏離Hardy-Weinberg 平衡(P<0.01)

圖1 多態(tài)微衛(wèi)星位點(diǎn)Mas6(上)和Mas16(下)Fig.1 Analysis pattern of STR typing for polymorphic SSR locus Mas6 and Mas16 PCR product

2.2 三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體的遺傳多樣性分析

三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體遺傳多樣性分析結(jié)果顯示，新干養(yǎng)殖群體多態(tài)信息含量、平均期望雜合度、Shannon 多樣性指數(shù)以及平均有效等位基因數(shù)最高(PIC=0.73, He=0.77, I=1.64, Ne=4.5)，重慶養(yǎng)殖群體居于中間水平(PIC=0.69, He=0.73, I=1.62, Ne=4.49)，永豐養(yǎng)殖群體最低(PIC=0.62, He=0.66, I=1.41, Ne=3.58)。由此可見(jiàn)，三個(gè)養(yǎng)殖群體的平均PIC值具有高度多態(tài)性(PIC>0.5)，遺傳多樣性較豐富，群體的遺傳多樣性水平?jīng)]有明顯差異(表2)。

表2 三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體的遺傳多樣性信息Tab.2 Genetic diversity of three M.asiaticus populations

2.3 三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體遺傳分化

從三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體遺傳分化系數(shù)(Fst)和基因流(Nm)來(lái)看：Mas6、Mas4、Mas13、Mas34、Mas43和Mas11共6個(gè)位點(diǎn)的遺傳分化系數(shù)大于0.05，其余位點(diǎn)的遺傳分化系數(shù)均小于0.05，各位點(diǎn)的遺傳分化均值為0.075(表3)。

表3 三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體在13個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的遺傳分化系數(shù)與基因流Tab.3 Genetic differentiation coefficient and gene flow of 13 microsatellite loci in the three populations of M.asiaticus

通過(guò)Popgene1.32軟件計(jì)算3個(gè)養(yǎng)殖群體的Nei氏遺傳距離和遺傳相似指數(shù)，結(jié)果顯示，永豐和重慶的胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體相似度最高(0.803 4)，遺傳距離最近(0.218 9)，重慶和新干的胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體相似度最低(0.690 5)，遺傳距離最遠(yuǎn)(0.370 3)(表4)。上述結(jié)果表明，永豐和重慶群體遺傳分化小，新干和重慶群體遺傳分化大。

表4 三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體的遺傳距離和遺傳相似度指數(shù)Tab.4 Genetic distance and genetic similar index in the three populations of M. asiaticus

注：表中右上角區(qū)為群體間的相似度，左下角區(qū)為群體間的遺傳距離

2.4 微衛(wèi)星標(biāo)記在胭脂魚(yú)人工放流中的應(yīng)用

利用Structure軟件對(duì)三個(gè)養(yǎng)殖群體和采自贛江的胭脂魚(yú)的13個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)遺傳信息進(jìn)行分析，結(jié)果顯示所有個(gè)體分為4 個(gè)簇。新干胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體Cluster1和Cluster4占了大部分；重慶胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體Cluster2占了大部分，永豐胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體Cluster3占大部分。表明三個(gè)養(yǎng)殖群體的遺傳結(jié)構(gòu)相對(duì)獨(dú)立，存在較小程度的混雜現(xiàn)象，同時(shí)，新干養(yǎng)殖群體內(nèi)遺傳結(jié)構(gòu)分化明顯。野外采集胭脂魚(yú)YSC1、YSC2和YH1個(gè)體Cluster1和Cluster4占大部分，顯示出與新干養(yǎng)殖群體具有很大相似性，表明遺傳關(guān)系較其它兩個(gè)種群關(guān)系近；YXJ1和YH2個(gè)體大部分為Cluster3，遺傳信息與重慶胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體表現(xiàn)出相似性(圖2)。

3 討論

3.1 三個(gè)胭脂魚(yú)繁殖基地群體間的遺傳多樣性

雜合度(H)和多態(tài)信息含量(PIC)分別是衡量種群變異程度和位點(diǎn)多態(tài)性的重要指標(biāo)[21-22]。本研究的三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體中，平均等位基因數(shù)目和雜合度分別為4.80和0.70，同時(shí)，每個(gè)基因位點(diǎn)多態(tài)信息含量(PIC)范圍為0.35-0.84，其中12個(gè)位點(diǎn)是高度多態(tài)的(PIC>0.5)，位點(diǎn)Mas34則是中度多態(tài)水平(0.25

圖2 基于微衛(wèi)星數(shù)據(jù)的胭脂魚(yú)養(yǎng)殖種群遺傳結(jié)構(gòu)圖Fig.2 Population genetic structure of M.asiaticus sampled based on microsatellite analysis.1.新干胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體，2.重慶胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體，3.永豐胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體，4.野外采集胭脂魚(yú)YSC1，5.野外采集胭脂魚(yú)YSC2，6.野外采集胭脂魚(yú)YXJ1，7.野外采集胭脂魚(yú)YH1，8.野外采集胭脂魚(yú)YH2。

依據(jù)Hardy-Weinberg平衡檢測(cè)顯示，5個(gè)位點(diǎn)(Mas5、Mas13、Mas34、Mas18、Mas43)偏離HWE平衡，其他位點(diǎn)均符合HWE平衡。由于本次試驗(yàn)中選擇的樣本主要為人工繁殖子一代群體，并非自然種群，親代的人工選擇可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致雜合子過(guò)?；蛉笔?，從而偏離HWE平衡。Hard-Weinberg 遺傳偏離指數(shù)(D)反映了He和Ho二者之間的平衡關(guān)系，D值越接近0，表明基因型分布越接近于平衡狀態(tài)，當(dāng)D為正時(shí)，表明雜合子過(guò)剩；反之，雜合子缺失，數(shù)值大小反映過(guò)剩或缺失的程度[24]。本研究D值分析顯示，只有Mas11位點(diǎn)為雜合子過(guò)剩，其他位點(diǎn)均為雜合子缺失。雜合子過(guò)?，F(xiàn)象一般出現(xiàn)在研究對(duì)象為相對(duì)較小群體，如有限的親本繁殖子代會(huì)導(dǎo)致連鎖不平衡現(xiàn)象，從而導(dǎo)致雜合子過(guò)剩[25]。雜合子缺失現(xiàn)象主要是由無(wú)效等位基因引起的，也可能是由非隨機(jī)交配、自然選擇或小種群中的一個(gè)或多個(gè)因素造成[26]。研究結(jié)果顯示，在胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體中，為了防止近交衰退現(xiàn)象，應(yīng)盡量控制家系的遺傳背景。

3.2 三個(gè)胭脂魚(yú)繁殖群體間遺傳結(jié)構(gòu)

種群間的遺傳變異與基因流是研究物種種群歷史和動(dòng)態(tài)的重要手段[27]。遺傳分化指數(shù)是衡量群體間遺傳分化程度的重要參數(shù)。Wright[28]認(rèn)為Fst在0～0.05時(shí)，群體間無(wú)分化；在0.05～0.15時(shí)，群體間中度遺傳分化；在0.15～0.25時(shí)，高度遺傳分化；當(dāng)大于0.25時(shí)，表示遺傳分化極大。本研究中，三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體間的遺傳分化系數(shù)(Fst)均值為0.075，具有中度遺傳分化，其中7.5%的遺傳分化來(lái)自種群間，92.5%的遺傳分化來(lái)自種群內(nèi)。說(shuō)明群體間遺傳分化微弱。這可能由于群體分化程度對(duì)所在的生態(tài)條件相適應(yīng)的結(jié)果，環(huán)境作用強(qiáng)度及方向大體相同，則會(huì)造成各分布區(qū)的種群遺傳分化不顯著；其次是由于重慶和永豐的親本存在部分相互引種現(xiàn)象，導(dǎo)致遺傳分化程度低；同時(shí)，胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體間地理隔離的時(shí)間較短，并未發(fā)生顯著遺傳分化。本研究中，三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體的基因流(Nm)范圍0.634 5～11.102 7，均值為4.982 5。從Nm值來(lái)看，通常Nm大于1，表明群體間的基因流水平高；當(dāng)Nm小于1時(shí)，說(shuō)明群體可能由于遺傳漂變而發(fā)生分化[29]。由此可見(jiàn)，三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體間基因交流充分，而Structure分析結(jié)果顯示三個(gè)地理種群存在分化，因此歷史上的基因交流沒(méi)有制約地理種群間的遺傳分化。

遺傳距離是研究物種遺傳多樣性的基礎(chǔ)，Crawford等[30]指出由微衛(wèi)星得出的遺傳距離更能反映分化時(shí)間的長(zhǎng)短，能客觀反映品種間的遺傳變異和分化。本研究中，永豐和重慶胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體遺傳距離最小為0.218 9。表明重慶與永豐胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體具有較近的親緣關(guān)系，這可能與永豐一部分胭脂魚(yú)親本是引進(jìn)重慶胭脂魚(yú)親本有關(guān)，由此可見(jiàn)，對(duì)于今后的育種，可以考慮將新干胭脂魚(yú)繁殖基地的親本與重慶和永豐的親本進(jìn)行進(jìn)一步雜交育種，增加群體基因交流，防止近交衰退現(xiàn)象。

Structure聚類(lèi)分析結(jié)果顯示，三個(gè)胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體間存在遺傳分化以及少量基因交叉和滲透，推測(cè)可能為早期生活的胭脂魚(yú)在群體間的自然游動(dòng)、繁殖所致的基因交流。新干胭脂魚(yú)養(yǎng)殖群體遺傳分化最大，可能與新干養(yǎng)殖群體親本的遺傳結(jié)構(gòu)有關(guān)，由于地理的隔離及人工繁殖的影響，從而在新干養(yǎng)殖群體內(nèi)形成兩種相對(duì)獨(dú)立的遺傳結(jié)構(gòu)。

3.3 人工放流監(jiān)測(cè)

五尾野生胭脂魚(yú)個(gè)體Structure聚類(lèi)分析顯示，YSC1、YSC2和YH1可能來(lái)自于新干胭脂魚(yú)繁殖基地群體；YXJ1和YH2雖然與重慶胭脂魚(yú)繁殖基地群體具有很大相似性，但因部分永豐胭脂魚(yú)親本是由重慶親本引種而來(lái)，存在基因交流，同時(shí)胭脂魚(yú)采集地點(diǎn)和人工放流地點(diǎn)均在贛江，距離較近，而距離重慶放流地點(diǎn)較遠(yuǎn)，并且在贛江人工放流工作開(kāi)展前，歷年文獻(xiàn)中并未在贛江發(fā)現(xiàn)胭脂魚(yú)記錄種。因此，推斷YXJ1和YH2個(gè)體出自于重慶胭脂魚(yú)繁殖基地群體的可能性不大，更可能出自于永豐胭脂魚(yú)繁殖基地群體。然而胭脂魚(yú)人工放流增殖效果的更有效評(píng)估，需要對(duì)野外采集個(gè)體更加準(zhǔn)確追溯其是野生種群還是人工放流群體，對(duì)于Structure遺傳結(jié)構(gòu)分析，具有一定局限性，因此，在接下來(lái)的人工放流評(píng)估工作中，利用微衛(wèi)星分子標(biāo)記位點(diǎn)的多態(tài)性，構(gòu)建胭脂魚(yú)人工養(yǎng)殖群體家系指紋圖譜，依據(jù)親本基因型進(jìn)行親子鑒定和譜系鑒定識(shí)別出該家系的后代，可為今后野外采集到的胭脂魚(yú)判斷其母系信息，同時(shí)為人工放流的胭脂魚(yú)個(gè)體追溯到親本提供依據(jù)，對(duì)人工放流群體與自然群體進(jìn)行評(píng)價(jià)。

由于胭脂魚(yú)野生資源日益下降，人工放流工作是恢復(fù)和保護(hù)野生瀕危物種的有效途徑，因此對(duì)其種質(zhì)遺傳資源監(jiān)測(cè)，選擇對(duì)多變環(huán)境具有更強(qiáng)的適應(yīng)性和生存能力的遺傳多樣性高的群體進(jìn)行人工放流尤為重要。本次實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，三個(gè)養(yǎng)殖群體的遺傳多樣性豐富，對(duì)選育優(yōu)質(zhì)苗種進(jìn)行人工放流的工作具有理論的指導(dǎo)意義。人工放流效果的評(píng)估一般采用傳統(tǒng)的標(biāo)志重捕法，但此方法只限制于數(shù)量少的群體。自2013至2015年漁政局向贛江干流共人工放流15.13萬(wàn)尾胭脂魚(yú)冬片魚(yú)種，每年胭脂魚(yú)放流量較大，標(biāo)志重捕法是無(wú)法滿(mǎn)足的。分子標(biāo)記逐漸成為人工增值放流評(píng)估的有效手段，微衛(wèi)星能提供精確的遺傳信息，為動(dòng)物保護(hù)管理以及為動(dòng)物行為生態(tài)學(xué)提供依據(jù)。本次研究通過(guò)野外采集的胭脂魚(yú)個(gè)體與三個(gè)養(yǎng)殖群體遺傳結(jié)構(gòu)的聚類(lèi)分析，對(duì)人工放流進(jìn)行了初步監(jiān)測(cè)。因此，在未來(lái)的胭脂魚(yú)保護(hù)工作中應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)其分子水平監(jiān)測(cè)，同時(shí)結(jié)合人工傳統(tǒng)方法監(jiān)測(cè)，這對(duì)胭脂魚(yú)人工增殖放流效果評(píng)估起到關(guān)鍵作用。

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(責(zé)任編輯：張瀟峮)

Genetic diversity of Myxocyprinus asiaticus cultured population based on microsatellite molecular marker and analysis of the artificial release monitoring

HU Xin-yan1, LIU Xiong-jun1, ZHOU You-yang1, WU Xiao-ping1,2, OUYANG Shan1

( 1.SchoolofLifeSciences,NanchangUniversity，Nanchang330031,China; 2.CenterforWatershedEcologyInstituteofLifeScience,NanchangUniversity,Nanchang330031,China)

Study was conducted on genetic diversity and genetic structure of first filial generation based on microsatellite molecular marker for Chongqing, Yongfeng and Xingan breeding bases, China. The results showed that 13 microsatellite loci was polymorphism and the number of allele was 8～16. The range of PIC, Shannon diversity index, observed heterozygosity, expected heterozygosity, Hard-Weinberg genetic deviation index were 0.35～0.84, 1.61～1.64, 0.108 1～0.825 5, 0.384 6～0.856 8, 0.718 9～0.072 5, respectively. The results indicated three cultured population had higher genetic diversity. Genetic structure of population analysis showed that the three populations had genetic divergence, and cultured population in the Xingan city was conspicuous. Analysis of genetic structure of 5 samples collected from the Ganjiang River inferred that they come from the first filial generation in Yongfeng and Xingan breeding base, and the result provided basis for artificial releasing monitoring.

microsatellite;Myxocyprinusasiaticus; genetic diversity; releasing monitoring

2016-06-04；

2016-09-08

江西省科技重點(diǎn)項(xiàng)目(12003890)；贛鄱英才“555”工程領(lǐng)軍人才培養(yǎng)計(jì)劃(18000041)；科技基礎(chǔ)性工作專(zhuān)項(xiàng)“羅霄山脈地區(qū)生物多樣性綜合科學(xué)考察”(2013FY111500)

胡新艷, (1991- ),女,碩士,專(zhuān)業(yè)方向?yàn)樗飳W(xué)。E-mail: huxinyan1234@163.com

歐陽(yáng)珊。E-mail: ouys1963@qq.com

S917.4

A

1000-6907-(2017)01-0035-07