文/王玉堂

魚類免疫增強(qiáng)劑的種類及研究進(jìn)展（一）

文/王玉堂

現(xiàn)有的研究結(jié)果已經(jīng)證明，能激活魚、蝦免疫系統(tǒng)的免疫增強(qiáng)劑有很多種。根據(jù)其來源，大致可以分為來自于細(xì)菌的肽聚糖和細(xì)菌脂多糖（LPS）；放線菌的短肽；酵母菌和海藻的β-1，β-葡聚糖、β-1，6-葡聚糖、來自甲殼動(dòng)物外殼的甲殼質(zhì)、殼多糖等。

將上述各種免疫增強(qiáng)劑投喂于魚類時(shí)，可以提高溶菌酶和補(bǔ)體的活性，增加機(jī)體中補(bǔ)體的C3成分；不僅可以增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和嗜中性細(xì)胞的吞噬活性，還可以提高這些細(xì)胞的殺菌活性；激活自然殺傷細(xì)胞（NK），增強(qiáng)其殺傷異物細(xì)胞的活性，促進(jìn)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-2（interleukin-2,IL-2）。除具有增強(qiáng)魚類的非特異性免疫功能外，還具有增強(qiáng)機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體的功能。對(duì)養(yǎng)殖蝦類投喂免疫增強(qiáng)劑，首先是能提高蝦體內(nèi)大、小顆粒細(xì)胞的吞噬和殺菌活性，促進(jìn)其血細(xì)胞趨化因子的釋放；提高工作效率proPO活化系統(tǒng)的活性，從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)各種傳染性病原的抵抗能力。

一、微生物多糖

1.革蘭氏陽(yáng)性菌與菌體肽聚糖

部分革蘭氏陽(yáng)性菌的滅活菌體具有激活動(dòng)物免疫功能的作用，其作用的主要成分是菌體細(xì)胞壁中的肽聚糖。并非所有的革蘭氏陽(yáng)性菌都具有這種功能，而只有特定的菌種和特定的菌株才具有這種免疫激活功能。

將屬于革蘭氏陽(yáng)性菌的嗜熱雙歧桿菌（Bifidobaacterium thermophilum）細(xì)胞壁中提取的肽聚糖投喂于魚類后，在提高魚體的巨噬細(xì)胞和嗜中性白細(xì)胞的吞噬能力與過氧化物酶活性的同時(shí)，還能增強(qiáng)溶菌酶的活性。對(duì)養(yǎng)殖早班類投喂后，可以提高其粒細(xì)胞的吞噬活性，并增加細(xì)胞中超氧化歧化酶的生成量，同時(shí)提高酚化酶的活性。由于這類免疫增強(qiáng)劑激活了水產(chǎn)動(dòng)物的免疫功能，已證明可以提高虹鱒對(duì)弧菌病、五條魚師對(duì)鏈球菌病和日本嚇對(duì)蝦對(duì)弧菌與病毒性血癥的抵抗力。

2.革蘭氏陰性菌與菌體LPS

將部分革蘭氏陰性菌及其細(xì)胞壁中的LPS投喂魚類后，可以增強(qiáng)魚類血液中白細(xì)胞的數(shù)量和提高其吞噬活性。增加日本鰻鱺對(duì)愛德華氏菌病的抵抗力。用殺滅對(duì)蝦弧菌（Vnguiolla japonica）的滅活菌體注射、浸泡和投喂日本嚇對(duì)蝦，可以促進(jìn)對(duì)蝦體內(nèi)產(chǎn)生血細(xì)胞趨化因子和提高血細(xì)胞的吞噬活性，增強(qiáng)日本對(duì)蝦對(duì)弧菌病的抵抗能力。

3.細(xì)菌多糖

細(xì)菌細(xì)胞壁中的肽聚糖也是魚類很好的免疫增強(qiáng)物質(zhì)。在飼料中添加肽聚糖能提高大黃魚的生長(zhǎng)性能、非特異性免疫能力和抗病力，可作為一種安全高效的口服免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用于大黃魚的養(yǎng)殖。得知聚糖與疫苗聯(lián)合使用，可以顯著提高鯽魚體表粘液和血清溶菌酶活性、白細(xì)胞的吞噬活性、抗體效價(jià)及活菌攻毒后的免疫保護(hù)率，是疫苗的良好佐劑，能增強(qiáng)魚類的疫苗的應(yīng)答反應(yīng)。脂多糖存在于所有革蘭氏陰性菌外膜中，當(dāng)脂多糖免疫魚后，一方面是魚體可以產(chǎn)生對(duì)該種病原微生物的特異性免疫保護(hù)；另一方面是可以增強(qiáng)魚體單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的活性及其它抗菌因子的活性。如柱狀嗜纖維菌的脂多糖免疫注射鯉魚后，鯉魚血清中的凝集抗體效價(jià)迅速上升，并使其血清白細(xì)胞吞噬指數(shù)和吞噬百分比顯著提高。

4.放線菌中提取的短肽

從屬于放線菌的橄欖灰鏈霉菌（Streptomyces olivogriseus）的培養(yǎng)液中提取的短肽類物質(zhì)投喂魚類后，可以提高供試魚巨噬細(xì)胞活性和殺菌能力，能增強(qiáng)虹鱒對(duì)腎臟病等傳染性疾病的抗病力。

5、酵母菌與菌體多糖

酵母菌聚糖能選擇性地作用于巨噬細(xì)胞、顆粒細(xì)胞等細(xì)胞的特異性受體，并激活這些細(xì)胞，通過細(xì)胞的吞噬作用，吸收、破壞、清除動(dòng)物體內(nèi)的病原微生物，同時(shí)還能產(chǎn)生細(xì)胞因子，如白細(xì)胞介素1（L-1），提高魚類的免疫能力。

酵母菌的細(xì)胞壁中存在大量的β-1，3-葡聚糖、β-1，6-葡聚糖和甘露聚糖等多糖類物質(zhì)，尤其是含有較多的β-1，3-葡聚糖。將從酵母蘇打中提取的β-1，3-葡聚糖投喂魚類后，可以提高魚體內(nèi)巨噬細(xì)胞及其他白細(xì)胞的吞噬活性，同時(shí)還能提高IL-2和補(bǔ)體的活性。將啤酒酵母菌細(xì)胞壁成分投喂對(duì)蝦，也可以提高血細(xì)胞的吞噬活性、酚化酶和超氧化歧化酶的產(chǎn)生能力。通過激活免疫功能，可以增強(qiáng)斑點(diǎn)叉尾魚回對(duì)遲緩愛德華氏菌及鮭科魚類對(duì)腎臟病和弧菌病的抵抗能力。

二、甲殼素和殼聚糖

甲殼素又稱幾丁質(zhì)，廣泛存在于昆蟲、甲殼動(dòng)物等的外殼及真菌的細(xì)胞壁中。甲素脫去乙?；蔀闅ぞ厶牵址Q殼多糖。殼聚糖可生物降解，其代謝產(chǎn)物無毒，具有抗微生物活性、激活淋巴細(xì)胞、提高免疫力、調(diào)節(jié)脂肪代謝和降低血脂、膽固醇等多種生理功能。在飼料中添加殼聚糖可以提高花鱸、異育銀鯽、真鯛、野鯪和吞噬細(xì)胞活性，增強(qiáng)其非特異性免疫功能。研究結(jié)果證實(shí)，在飼料中添加適量的殼聚糖，能使鯽魚各種組織溶菌酶活性和白細(xì)胞吞噬活性增高，表明殼聚糖能激活水解酶的活性，增強(qiáng)機(jī)體抗感染能力。美洲紅點(diǎn)鮭和虹鱒經(jīng)殼聚糖溶液注射或浸泡后，血液中的一些免疫指標(biāo)，如殺菌活力、過氧化酶活性和IgM濃度均顯著提高，對(duì)殺鮭氣單胞菌感染的抵抗力也顯著增強(qiáng)?？诜讱に乜梢燥@著提高金頭鯛的巨噬細(xì)胞活性、細(xì)胞毒活性和血清補(bǔ)體活性等。

三、植物多糖

用于魚類的植物性免疫多糖主要有黃芪多糖、云芝多糖、牛蒡寡糖、枸杞多糖等。黃芪多糖具有提高動(dòng)物機(jī)體免疫力、阻止病毒復(fù)制、殺滅細(xì)菌、排出毒素等功效，并有用量少、作用快、效果好等特點(diǎn)。在飼料中添加黃芪多糖可使鯉魚白細(xì)胞的吞噬率顯著提高，還可顯著提高吞噬指數(shù)，對(duì)白細(xì)胞活性的促進(jìn)作用較為明顯。云芝多糖添加0.5g/k～1.0g/kg時(shí)，對(duì)銀鯽的非特異免疫功能有增強(qiáng)作用，其投喂周期為14天～21天。牛蒡寡糖是有效的雙歧桿菌促生長(zhǎng)因子，能顯著促進(jìn)機(jī)體胃腸道內(nèi)有益菌群的生長(zhǎng)和增殖，對(duì)大菱鲆表現(xiàn)出良好的促生長(zhǎng)作用，還能夠顯著提高飼料利用率；其飼料中的添加量為4.0g/kg。鯽魚飼料中添加微45mg/kg枸杞多糖能夠顯著提高魚體血清溶菌酶活力，增強(qiáng)免疫力。

冬寶是用黃芪、干姜、陳皮等組成的中草藥復(fù)合制劑。據(jù)喬峰（2000）試驗(yàn)表明，在鯉魚飼料中添加0.1%的冬寶，在越冬期間，鯉魚成活率比對(duì)照組提高43.7%，增重率提高8.3%。說明冬寶是養(yǎng)殖水生動(dòng)物抗寒冷應(yīng)激良好的飼料添加劑。

四、動(dòng)植物提取物

1.?；撬?/p>

牛磺酸（Taurine）又稱牛膽堿、牛膽素、牛膽酸，是動(dòng)物體內(nèi)一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的含硫必須氨基酸，是調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)滲透壓、穩(wěn)定細(xì)胞膜、維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和清除自由基等正常生理功能的重要物質(zhì)，廣泛分布于動(dòng)物組織和細(xì)胞內(nèi)。近年來，伴隨著植物蛋白代替魚粉蛋白研究工作的深入，?；撬嶙鳛樾碌娘暳咸砑觿┑难芯咳找媸艿綕O業(yè)科技工作者的關(guān)注。因?yàn)椋；撬崾且环N功能性物質(zhì)，用牛磺酸作為飼料添加劑劑，具有誘食、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、抗細(xì)胞氧化、抗自由基損傷及抗病毒、抗應(yīng)激和增強(qiáng)免疫力等的作用，可以提高鯉魚的溶菌酶活力、SOD活力，作為免疫增強(qiáng)劑可以增強(qiáng)魚類對(duì)多種傳染性病原的非特異性免疫反應(yīng)，提高魚體的抗病力。牛磺酸的抗動(dòng)物應(yīng)激機(jī)理是：?；撬峥稍黾尤羌谞钕僭彼幔═3）分泌量，提高機(jī)體的抗應(yīng)激水平。海洋動(dòng)物的滲透壓主要靠?；撬醽碚{(diào)節(jié)和維持。據(jù)Martin（1996）研究表明，在淡水魚類飼料中添加適量的?；撬?，可提高淡水魚類對(duì)水體中鹽度影響滲透壓的應(yīng)激反應(yīng)，有效提高淡水魚類在咸水中的成活率。

近年來和一些試驗(yàn)證實(shí)，缺乏牛磺酸的植物源性蛋白飼料會(huì)導(dǎo)致魚體出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢及一些病理現(xiàn)象，如綠色肝臟綜合癥和溶血性貧血等，這些病理現(xiàn)象通過添加?；撬崮軌虻玫礁纳啤Ｓ纱丝梢?，?；撬釋?duì)維持魚類正常生長(zhǎng)具有重要作用。

?；撬崾且环N非蛋白含硫的β氨基酸，分子式為H2NCH2CH2SO3H,分子量125.15，因1827年首次從公牛膽汁中分離而得名。牛磺酸純品是無色或白色斜晶狀體，熔點(diǎn)310℃，無毒，無臭。味微酸，對(duì)熱穩(wěn)定，可溶于水（在水中12℃時(shí)的溶解度為0.5%），在乙醇、乙醚或丙酮中不溶。化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在避光、密閉、干燥的室溫條件下可長(zhǎng)期保存。

?；撬嵋杂坞x態(tài)廣泛存在于動(dòng)物有機(jī)體中，在腦、內(nèi)臟、肌肉、骨骼、血液中含量豐富，如在黃魚青、紅魚、章魚、太平洋斯氏魷魚、海螺、雜色鮑中的含量都較為豐富，且在動(dòng)物視網(wǎng)膜中?；撬岷枯^其它組織中要高，但在植物組織中?；撬岬暮可跎?。?；撬嵩诓煌~類的不同組織中含量也不相同。一般而言，在白肉魚的各個(gè)組織中?；撬岬暮繜o明顯不同，而在紅肉魚的血和肉中的含量要比普通肉高。對(duì)于同一種魚類，其內(nèi)臟中的?；撬岷恳黠@高于肌肉組織。

?；撬崾莿?dòng)物體內(nèi)唯一的含硫游離氨基酸，不參與蛋白質(zhì)的生物合成，除直接從膳食中攝取外，在動(dòng)物體內(nèi)還可以由胱氨酸、蛋氨酸和關(guān)胱氨酸等含硫氨基酸經(jīng)一系列酶促反應(yīng)合成。?；撬岬暮铣芍饕性趧?dòng)物的肝臟、腎臟、腦和骨骼等組織器官，其中肝臟是合成?；撬岬淖钪饕鞴?。

?；撬嵩趧?dòng)物體內(nèi)合成有五條途徑，其中，蛋氨酸→半胱氨酸→半胱亞磺酸→亞?；撬帷；撬?，是最主要的合成途徑，其中半胱氨酸脫脫羧酶（CSAD）被認(rèn)為關(guān)鍵酶，是哺乳動(dòng)物?；撬岷铣傻南匏倜?。

牛磺酸是一種條件性必需氨基酸，雖然不參與蛋白質(zhì)的組成，卻對(duì)調(diào)節(jié)機(jī)體正常生理機(jī)能具有重要生物學(xué)效應(yīng)，如?；撬崮軌虼碳~類攝食，常用作誘食劑；?；撬崮軈⑴c膽酸的合成和脂肪的代謝，促進(jìn)脂肪的乳化作用和維生素類物質(zhì)（如脂溶性維生素）的消化吸收；牛磺酸能增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)缺氧的耐受性，提高水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力和抗氧化能力；?；撬崮芫S持和調(diào)節(jié)滲透壓，保護(hù)細(xì)胞膜；此外，補(bǔ)充?；撬徇€能預(yù)防機(jī)體綠色肝臟綜合癥和溶血性貧血等病理現(xiàn)象。

作為誘食劑：牛磺酸對(duì)魚類攝食具有良好的刺激作用，常被用作蝦類的誘食劑。邱高峰等研究報(bào)道了?；撬崾俏r蟹很好的誘食劑，其誘食效果比天冬酰胺、脯氨酸和甘氨酸更強(qiáng)。常青在飼料中添加不同的誘食劑飼養(yǎng)對(duì)蝦，發(fā)現(xiàn)牛磺酸對(duì)對(duì)蝦的誘食效果強(qiáng)于目前水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的甜菜堿和大蒜素。邱小琮等的研究證實(shí)了牛磺酸對(duì)鯉魚具有明顯的誘食效果，其中添加0.4%的牛磺酸時(shí)，其誘食效果最佳，極顯著高于對(duì)照組。國(guó)外已有報(bào)道指出，牛磺酸對(duì)歐洲鰻（Anguilla anguilla）、北極紅點(diǎn)鮭（Salveli-mus alpinus）、河鱒（Thymallus thymallus）等有很好的誘食作用。

作為促生長(zhǎng)劑：關(guān)于牛磺酸對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物促生長(zhǎng)研究已有很多報(bào)道。Shin-Kwon KIM等研究發(fā)現(xiàn)，在日本牙鲆幼魚日糧中添加0.5%和1%?；撬崮茱@著改善牙鲆幼魚的生長(zhǎng)性能。T·Gaylord等研究證明，在植物蛋白飼料中添加?；撬崮茱@著促進(jìn)虹鱒的生長(zhǎng)，其中?；撬岬奶砑恿繛?g/kg和10g/kg，且未添加蛋氨酸時(shí)，虹鱒的生長(zhǎng)效果最好。Angela N·Lunger等對(duì)軍曹魚幼魚的研究表明，在以高濃度植物蛋白為基礎(chǔ)飼料的日糧中添加?；撬岷螅姴荇~的增重率和飼料效率均有明顯提高。Hiroyuki Matsunari等對(duì)黃尾魚的試驗(yàn)表明，在飼料中添加?；撬岷螅~體的生長(zhǎng)性能在前三周顯著提高，肌肉中牛磺酸的含量也隨日糧中?；撬崴降脑黾佣黾印㈡碌妊芯堪l(fā)現(xiàn)，在餌料中添加0.4%～0.8%的?；撬?，日本沼蝦的增重率顯著增加，但過量的添加?；撬釋?duì)日本沼蝦的生長(zhǎng)有抑制作用。邱小琮等試驗(yàn)表明，飼料中牛磺酸的添加量為0.4%時(shí)，鯉魚的生長(zhǎng)效果最好，繼續(xù)添加時(shí)，增重率反而會(huì)下降。說明?；撬岬奶砑恿坑幸欢ǚ秶哂袟l件毒性，攝入過量的牛磺酸可能會(huì)抑制魚類的消化吸收及生長(zhǎng)。?；撬釋?duì)魚類的促生長(zhǎng)作用和提高其對(duì)飼料利用率的作用，可能與適量添加?；撬岷笤鰪?qiáng)了魚類消化系統(tǒng)酶的活性有關(guān)，促進(jìn)了魚類對(duì)脂肪、淀粉、蛋白質(zhì)的消化利用率。

作為提高機(jī)體免疫力制劑：?；撬崾呛孔钬S富的游離氨基酸，在中性粒細(xì)胞中?；撬岷空?6%，在淋巴細(xì)胞中?；撬嵴?0%，說明?；撬崤c免疫功能密切相關(guān)，牛磺酸缺乏或含量不足時(shí)，可引起機(jī)體免疫功能異常，如白細(xì)胞數(shù)量下降、多核白細(xì)胞與單核細(xì)胞比值降低等。邱小琮等研究報(bào)道，餌料中添加適量的?；撬?，能顯著提高鯉魚肝臟和血清中溶菌酶和超氧化物歧化酶的活性，增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫功能。劉緩等研究發(fā)現(xiàn)，在日本對(duì)蝦餌料中添加0.4%的?；撬釙r(shí)，其肌肉中酶氧化的活性顯著提高。

作為提高機(jī)體抗缺氧劑：具研究表明，?；撬峥蓽p緩神經(jīng)組織、心肌細(xì)胞的缺氧損傷，可提高心肌細(xì)胞活力，從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)缺氧的忍耐能力。談?dòng)榔嫉热藞?bào)道，0.1%和0.3%的?；撬崛芤悍謩e對(duì)提高體魚旁魚皮抗缺氧能力有極顯著作用。魏華等研究指出，不同濃度?；撬岵煌潭鹊靥岣卟萁痿~的抗缺氧能力，其中以0.5%和1%的?；撬峥娠@著改善草金魚的抗缺氧能力。魏智清等報(bào)道，不同濃度的?；撬峋裳娱L(zhǎng)泥鰍和麥穗魚在缺氧環(huán)境的存活時(shí)間，泥鰍以0.7%的?；撬岬目谷毖踝饔蔑@著，麥穗魚在0.5%、1.0%?；撬岬男Ч罴?。邱小琮等報(bào)道，?；撬針O顯著提高鯽魚的密閉缺氧存活時(shí)間，以0.5%?；撬岬奶砑恿康男Ч顬轱@著。

（未完待續(xù)）