郭 焰，李 巖，白羽嘉，黃文書，馮作山

（1.新疆輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830021；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052）

新疆玫瑰花中二十八烷醇測定分析與應(yīng)用研究

郭 焰1，李 巖1，白羽嘉2，黃文書2，馮作山2

（1.新疆輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830021；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052）

以新疆玫瑰花為研究對象，建立玫瑰花中二十八烷醇的GC-FID檢測方法。樣品經(jīng)提取、皂化和濃縮后進(jìn)行氣相色譜分析，采用氫火焰離子化檢測器測定二十八烷醇的含量。結(jié)果表明，在400～1 600 μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，該方法的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.987 0，精密度試驗RSD為0.85%，檢出限為1.5 μg/mL，提取的玫瑰花粗蠟質(zhì)中二十八烷醇含量為23.16%。

玫瑰花；二十八烷醇；氣相色譜法；應(yīng)用

隨著“一帶一路”特別是核心區(qū)的建設(shè)，新疆經(jīng)濟(jì)建設(shè)迎來了新機(jī)遇，需要調(diào)整優(yōu)化產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，培育新的增長點。因此，可以通過發(fā)展特色農(nóng)業(yè)，提升林果業(yè)發(fā)展水平來發(fā)揮新疆的優(yōu)勢。新疆南疆地區(qū)野生玫瑰資源豐富，這里的玫瑰花主要用于加工玫瑰精油、玫瑰醬、玫瑰花茶等，產(chǎn)品品種少、附加值低，未能充分利用玫瑰花較高的藥用價值和營養(yǎng)價值[1]。

玫瑰花中含有多種具有顯著生物活性的物質(zhì)是很好的功能食品原料，玫瑰花蠟質(zhì)中含有的活性物質(zhì)二十八烷醇就是其中較為重要的一種。二十八烷醇是被世界公認(rèn)的具有抗疲勞、增強(qiáng)體能、降低血脂、延緩衰老等作用的物質(zhì)，受到健康食品行業(yè)的推崇，已成為新型功能性食品添加劑和功能性食品的基料[2-5]。

試驗以新疆喀什玫瑰花為研究對象，采用氫火焰離子化檢測器（FID)，建立了GC-FID測定玫瑰花中二十八烷醇的方法。該方法樣品前處理簡單，具有快速、準(zhǔn)確的特點，為后期從玫瑰花中提取分離二十八烷醇和玫瑰花的進(jìn)一步開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新鮮玫瑰花，新疆喀什玫源公司提供，經(jīng)干燥、粉碎，過20目篩，制得玫瑰花粉；二十八烷醇（標(biāo)準(zhǔn)品），純度＞99.0%，Sigma公司提供；環(huán)己烷、丙酮、乙酸乙酯、聚丙二醇，為優(yōu)級純，天津市化學(xué)試劑三廠提供；超純水。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 6890N型氣相色譜儀、氫火焰離子化檢測器（FID），美國Agilent公司產(chǎn)品；N-1001型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海愛朗儀器有限公司產(chǎn)品；HH-4型數(shù)顯恒溫水浴鍋，江蘇省金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠產(chǎn)品；FW-100型高速萬能粉碎機(jī)，北京市永光明醫(yī)療儀器廠產(chǎn)品；TGL-16gR型高速冷凍離心機(jī)，湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司產(chǎn)品；BS224S型分析天平，北京賽多利斯儀器設(shè)備有限公司產(chǎn)品；超純水儀，艾柯公司產(chǎn)品；KQ-100E型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司產(chǎn)品；SHZ-C型循環(huán)水式多用真空泵，江蘇科興儀器廠產(chǎn)品。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品處理液制備

精確稱取10.00 g（準(zhǔn)確至0.001 g）玫瑰花粉于磨口的三角瓶中，加入乙酸乙酯（料液比1∶15），于60℃水浴均質(zhì)2 h，并經(jīng)常搖動。浸提后過濾，并向濾渣加入同等料液比的乙酸乙酯，進(jìn)行二次浸提，共提取5次；合并濾液后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于75℃條件下濃縮，于50℃條件下真空干燥至恒質(zhì)量，得玫瑰花粗蠟質(zhì)。

精確稱取上述提取的玫瑰花蠟質(zhì)1.00 g（準(zhǔn)確至0.001 g）于磨口三角瓶中，加熱使蠟質(zhì)熔化，準(zhǔn)確加入5.17 mL的0.5 mol/L KOH溶液和0.05 g聚丙二醇，在90℃下回流4 h，對蠟質(zhì)進(jìn)行皂化[2]。

皂化產(chǎn)物經(jīng)丙酮抽提、真空干燥后得到白色片狀物質(zhì)，即為含二十八烷醇的高級脂肪醇混合物。將此混合物溶于5 mL環(huán)己烷中，超聲波振蕩溶解后全部轉(zhuǎn)入10 mL容量瓶中，用環(huán)己烷定容至刻度，進(jìn)行GC分析。

1.3.2 二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液制備

精確稱取二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)樣品0.050 0 g于25 mL容量瓶中，加入15 mL環(huán)己烷在40℃超聲波下溶解，用環(huán)己烷定容稀釋至刻度，作為二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液。于4℃條件下避光保存。分別吸取1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液置于5 mL容量瓶中，用環(huán)己烷定容至刻度，配成0.40，0.80，1.20，1.60，2.00 mg/mL二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)使用液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.3.3 氣相色譜條件

色譜柱：毛細(xì)管柱，HP-5型（30 m×0.32 mm，膜厚0.25 μm）；載氣：高純氮，純度≥99.999%；恒流50 mL/min；柱溫（程序升溫）：于240℃條件下保持1 min，以20℃/min的速度升至300℃，于300℃條件下保持10 min；進(jìn)樣口溫度：300℃；檢測器溫度：330℃；氫氣（H2）流速：50 mL/min；助燃?xì)猓╝ir） 流速：450 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣1 min后開閥；進(jìn)樣方式：自動進(jìn)樣。1.3.4 二十八烷醇含量的測定

準(zhǔn)確吸取二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)液和樣品處理液各1 μL，按照上述氣相色譜條件，采用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定玫瑰花中二十八烷醇的含量[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 定性試驗

將二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)品和樣品進(jìn)行氣相色譜檢測，得到二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間為15.853 min。

2.2 線性范圍

分別吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液各1.00 μL，測定其色譜峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程：Y=401.718 57X-55.929 22，二十八烷醇在400～1 600 μg/mL范圍內(nèi)，其質(zhì)量濃度和峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.987 0[6-7]。

2.3 測定結(jié)果

樣品溶液經(jīng)氣相色譜測定，得到樣品溶液中二十八烷醇的峰面積值。將峰面積值代入回歸方程得樣品溶液中二十八烷醇質(zhì)量濃度0.989 0 mg/mL，皂化后經(jīng)丙酮抽提得到的混合高級醇中二十八烷醇含量為23.16%[6]。

2.4 精密度與檢出限

精密度是指在相同條件下多次重復(fù)測定結(jié)果之間相符合的程度。在上述色譜條件下對同一樣品進(jìn)行6次平行測定，得到精密度試驗RSD為0.85%，GC-FID方法精密度較好。

取接近噪音（信噪比S/N＞3）濃度的樣液按上述色譜條件進(jìn)行測定，目標(biāo)物的最低檢出質(zhì)量濃度為1.5 μg/mL。對照《蜂蠟中二十八烷醇、三十烷醇的測定-氣相色譜法》編制說明的征求意見稿中，其方法檢出限為5 mg/L，因此該方法檢出限合理。

3 討論與應(yīng)用

美國依利諾依大學(xué)運(yùn)動健康研究所最先從小麥胚芽油中提取出二十八烷醇，經(jīng)過分析與測試研究，結(jié)果表明二十八烷醇具有多種生理功能。主要表現(xiàn)在能增強(qiáng)體力、精力、耐力；提高應(yīng)激能力與反應(yīng)靈敏性；改善機(jī)體氧利用率與心肌營養(yǎng)；降低甘油三酯、血清膽固醇含量等方面。目前，美國和日本已將二十八烷醇廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、功能性食品、化妝品等中。尤其日本的二十八烷醇應(yīng)用開發(fā)及其商品化趨勢非常迅猛，相關(guān)產(chǎn)品產(chǎn)值突破10億日元?，F(xiàn)在，我國對二十八烷醇的研究及其在新原料、新技術(shù)、新產(chǎn)品的開發(fā)與用途等方面也逐漸加以重視[8-9]。

在我國，醫(yī)藥工業(yè)的應(yīng)用是以二十八烷醇開發(fā)藥品為主，如護(hù)肝、降血脂、預(yù)防骨質(zhì)疏松等藥物的研究開發(fā)。浙江醫(yī)學(xué)院研制的“力源膠囊”一藥，具有增加血清蛋白、增強(qiáng)體能、降低肝臟脂質(zhì)的作用，已進(jìn)行動物試驗且通過[10]。

在保健品產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用，主要是針對運(yùn)動員，利用二十八烷醇能增強(qiáng)人體的精力與耐力、有助于減輕體重、補(bǔ)充能量消耗等功效開發(fā)體育運(yùn)動保健系列功能性食品。利用二十八烷醇能夠減少血液中的過多鈣質(zhì)、降低甘油三酯和血清膽固醇含量的效用，開發(fā)有助于治療骨質(zhì)疏松癥、高膽固醇及預(yù)防心腦血管疾病的保健系列功能性食品[11-12]。白樹民等人[13]在食品中添加二十八烷醇，研究其對尾吊大鼠部分生理指標(biāo)的影響，得出添加二十八烷醇的食物使尾吊大鼠胸腺質(zhì)量增加明顯，對紅血細(xì)胞膜的流動性有一定改善，且顯著改善股骨生物學(xué)性能。未來，二十八烷醇可能會成為航天員保健系列功能食品中的重要組分之一。曹志然等人[14]在杏仁露飲品中添加二十八烷醇，研究其對機(jī)體免疫能力、運(yùn)動耐力的影響，已取得一些較好的成果。

4 結(jié)論

通過建立新疆玫瑰花中二十八烷醇的GC-FID測定法，以乙酸乙酯為提取劑，用KOH和聚丙二醇對玫瑰花蠟質(zhì)進(jìn)行皂化，皂化產(chǎn)物經(jīng)丙酮抽提后采用FID測定二十八烷醇的含量。結(jié)果表明，玫瑰花中二十八烷醇質(zhì)量濃度400～1 600 μg/mL時，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.987 0，精密度試驗RSD為0.85%，檢出限為0.5 μg/mL，提取的玫瑰花粗蠟質(zhì)中二十八烷醇含量為23.16%。該方法檢測靈敏度高、定量準(zhǔn)確性高。

[1]郭焰，豆一玲，白羽嘉，等.不同提取條件對玫瑰花中總黃酮品質(zhì)的影響 [J].食品研究與開發(fā)，2016，37（3）：95-99.

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[3]毛佳，陳建華，黃少烈.二十八烷醇的研究進(jìn)展 [J].廣東化工，2007，34（3）：56-57，60.

[4]黃文書，廖曉惠，王辰曦，等.氣相色譜法測定番茄皮蠟中二十八烷醇的含量 [J].中國食品添加劑，2010（5）：220-222.

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[13]白樹民，謝力勤，劉成林，等.在食品中添加二十八烷醇對尾吊大鼠部分生理指標(biāo)影響的觀察 [J].航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程，1997，10（6）：450-452.

[14]曹志然，李利平，徐月清，等.二十八烷醇對實驗動物免疫功能及游泳耐力的影響 [J].食品科學(xué)，2004，25（7）：158-160.◇

Determination and Analysis of Octacosanol in Xinjiang Rose

GUO Yan1，LI Yan1，BAI Yujia2，HUANG Wenshu2，F(xiàn)ENG Zuoshan2
（1.Xinjiang Institute of Ling Industry Vocational and Technical，Urumqi，Xinjiang 830021，China；2.College of Food Scicnce and Medicine，Xinjiang Agricultural University，Urumqi，Xinjiang 830052，China）

Taking Xinjiang Rose as the subject of research，a determination method about content of octacosanol of rose is established with GC-FID.The method consists of extraction，saponification，concentration and GC analysis.The GC analysis is carried out by using hydrogen flame ionization detector.The results show that there is a good linear relationship（R2=0.987 0）in the range of 400～1 600 μg/mL，with the relative standard deviation of precision（RSD）is 0.85%and the limit of detection（LOD）is 1.5 μg/mL.Octacosanol content is 23.16%in the crude wax.

rose；octacosanol；gas chromatography；application

TS201.2

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2017.01.048

1671-9646（2017）01b-0037-03

2016-12-08

郭 焰（1967— ），女，碩士，教授，研究方向為食品加工與檢測技術(shù)。