霍雯蒲大力吳明娟王云鵬李強(qiáng)吳玨蓉陳林汪霞張建武

(1.川北醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心；2.川北醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系；3.川北醫(yī)學(xué)院藥理教研室，四川 南充 637100)

法半夏對離體蟾蜍心功能的研究

霍雯蒲大力2吳明娟2王云鵬2李強(qiáng)2吳玨蓉2陳林2汪霞2張建武3△

(1.川北醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心；2.川北醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系；3.川北醫(yī)學(xué)院藥理教研室，四川 南充 637100)

目的：觀察法半夏懸濁液對離體蟾蜍心臟的心率和心肌收縮力的影響。方法：根據(jù)斯氏蛙心插管的方法，用0.033 g·ml-1、0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心臟灌流，采用BL-420生物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄心率和心肌收縮力的變化。結(jié)果：灌注0.033 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心的收縮力和心率影響不大；分別灌注0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的法半夏懸濁液，離體蟾蜍心收縮力明顯增強(qiáng)，心率減慢(P<0.05)。結(jié)論：法半夏可以增強(qiáng)離體蟾蜍心的收縮力，對其心率影響不大。

法半夏；離體蟾蜍心；心率；心肌收縮力

半夏的原植物為天南星科植物半夏Pinellia ternate (Thunb.) Berit，以塊莖入藥，性溫、味辛，由于生半夏具有一定的毒性，臨床上多以炮制品入藥。具有降逆止嘔、燥濕化痰、消痞散節(jié)的功效，用于痰飲喘咳、胸脘痞悶、惡心嘔吐、眩暈[1,2]。但目前未見有關(guān)半夏對兩棲類動(dòng)物心功能影響的研究報(bào)道，故本實(shí)驗(yàn)研究法半夏對離體蛙心心率和心肌收縮力的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

蟾蜍50只，雌、雄兼?zhèn)?，體重80-100 g(川北醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。

1.1.2 藥品

市售已炮制好的法半夏、任氏液。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

蛙類通用實(shí)驗(yàn)器械，肌張力換能器(四川成都泰盟公司)，電子天平(上海醫(yī)用激光儀器廠)，BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(四川成都泰盟公司)。

1.2 方法

1.2.1 法半夏溶液的配制

取法半夏80 g，加入蒸餾水，水煎60 min，過濾，取其懸濁液。再加入蒸餾水配制成80 g·200ml-1的溶液。再用任氏液與80 g·200ml-1的溶液分別配制出0.033 g·ml-1、0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的溶液。

1.2.2 離體蟾蜍心標(biāo)本的制備[3]

取一只蟾蜍，破壞腦和脊髓，背位固定于蛙板上暴露心臟，在左主動(dòng)脈下穿一線，距動(dòng)脈圓錐2～3 mm處結(jié)扎，再從左、右兩主動(dòng)脈下方穿一線打一活結(jié)留作固定插管用。持眼科剪在動(dòng)脈圓錐前端處向心臟剪一斜口，將盛有任氏液的蛙心插管由此口插人心室腔內(nèi)，連同近旁血管一起結(jié)扎固定，將心臟離體，用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)的余血至插管內(nèi)灌流液完全澄清無色，然后保持插管內(nèi)的液面高度約2 cm，劃線作標(biāo)記。

1.2.3 離體蛙心的心活動(dòng)記錄[4]

將插好離體心臟的插管固定在支架上，用蛙心夾夾住心肌尖部肌肉。再將蛙心夾的絲線繞過滑輪然后與張力換能器相連，通過BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄心搏曲線。

1.2.4 分組及加藥

空白對照組：先在蛙心套管內(nèi)加入任氏液，待搏動(dòng)穩(wěn)定后，記錄收縮曲線，以此作為空白對照組；法半夏不同劑量組：分別以0.033 g·ml-1、0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的CDI灌流心臟；維拉帕米組：滴加100 μL的維拉帕米。觀察加藥前后心肌收縮力和心率的變化。每組8只，每次加藥前后插管內(nèi)的總液面高度保持一致于2 cm處。

1.3 統(tǒng)計(jì)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

2 結(jié)果

由表1可知，離體蛙心加入維拉帕米后，心率減慢、心肌收縮力降低(P<0.05)，表明維拉帕米的負(fù)性心肌作用；灌注0.033 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心的收縮力和心率影響不大；分別灌注0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的法半夏懸濁液，離體蟾蜍心收縮力明顯增強(qiáng)，心率減慢(P<0.05)。

表1 法半夏對離體蟾蜍心心率和心肌收縮力的影響( ±SD，n=12)

注：與任氏液比較，*P<0.05。

3 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：灌注0.033 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心的收縮力和心率影響不大；分別灌注0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的半夏懸濁液，離體蟾蜍心收縮力明顯增強(qiáng)，心率減慢，說明0.067～0.267 g·ml-1濃度范圍內(nèi)的法半夏對離體蛙心心率有負(fù)性作用、對心肌有正性肌力作用。

此外，維拉帕米可使心率和心肌收縮力降低，表現(xiàn)為負(fù)性心肌作用[5]，但是加入維拉帕米后再加入0.05 mg·ml-1的CDI，雖然心率變化不明顯，但是由于收縮幅度增高，說明心肌收縮力增強(qiáng)，表明CDI可以拮抗維拉帕米的負(fù)性作用。由此可證明CDI可能通過促進(jìn)鈣離子通道開放，增加鈣離子內(nèi)流而使心肌收縮力增強(qiáng)[6]。然而0.5 mg·ml-1的CDI降低心肌收縮力甚至使心臟停止搏動(dòng)可能與其對離體蛙心心肌有一定的損傷作用有關(guān)。

1 肖培根. 半夏. 新編中藥志[M]. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2002, 372-378.

2 冉懋雄. 名貴中藥材綠色栽培技術(shù)[M]. 北京: 科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社, 2002, 12-13.

3 鄭倩,曹弟勇,劉紅,等. 醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2009, 127-131.

4 沈裕,楊琨,易蓓,等.生魚膽汁對離體蟾蜍心臟功能的影響[J]. 四川生理科學(xué)雜志, 2013 35(1):14-15.

5 楊俊卿,凌保東,劉毅,等. 藥理學(xué)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2009, 61-62.

6 馬滿玲,劉艷,王玲,等. 膽堿對大鼠和家兔心臟M3受體作用實(shí)驗(yàn)研究[J]. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2003, 37(4): 302-304.

Effects of rhizoma pinellinae praeparata on isolated frog hearts

Huo Wen1, Pu Da-li2, Wu Ming-juan2, Wang Yun-peng2,Li Qiang2, Wu Jue-rong2, Chen Lin2, Wang Xia2, Zhang Jian-wu3△

(1.Functional Experiment Center, North Sichuan Medical College;2.Department of Clinical Medicine, North Sichuan Medical College;3.Department of Pharmacology, North Sichuan Medical College, Sichuan Nanchong 637100)

Objective：To observe the effect of rhizoma pinellinae praeparata on heart rate and myocardial contractility of isolated frog heart. Methods: The Steinmann′s frog heart perfusion method was used to perfuse the isolated frog heart with different concentrations (0.033 g·ml-1, 0.067 g·ml-1, 0.133 g·ml-1and 0.267 g·ml-1) of rhizoma pinellinae praeparata, then the changes of heart rate and myocardial contractility were recorded by the BL-420E biological function experiment system. Results: Perfusion with 0.033 g·ml-1rhizoma pinellinae praeparata suspension had little effect on isolated toad heart contractility and heart rate. But perfusion with 0.067 g·ml-1, 0.133 g·ml-1and 0.267 g·ml-1rhizoma pinellinae praeparata suspension significantly increased cardiac contractility, and decreased heart rate, respectively. Conclusion: Rhizoma pinellinae praeparata can enhance the isolated toad heart contractility, has little effect on heart rate.

Rhizoma pinellinae praeparata; Isolated toad heart; Heart; Myocardial contractility

霍雯，女，助教，主要從事機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)和科研工作，Email：274423454@qq.com。

△通訊作者：張建武，男，副教授，主要從事心腦血管疾病和抗腫瘤方面研究，Email：546815404@qq.com。

2016-9-20)