□ 李 鳳 李秀娟 熱孜萬(wàn)古麗 吐魯番市質(zhì)量與計(jì)量檢測(cè)所

高效液相色譜法測(cè)定葡萄干中羥甲基糠醛含量

□ 李 鳳 李秀娟 熱孜萬(wàn)古麗 吐魯番市質(zhì)量與計(jì)量檢測(cè)所

葡萄干含有大量的糖和酸類物質(zhì)，在其存貯和加工過(guò)程中不可避免地會(huì)發(fā)生美拉德反應(yīng)和糖水解反應(yīng)，產(chǎn)生糠醛類物質(zhì)。測(cè)定葡萄干中羥甲基糠醛含量有助于對(duì)葡萄干的藥用價(jià)值的體現(xiàn)，并評(píng)價(jià)其存貯、加工條件。但目前仍未見(jiàn)葡萄干中羥甲基糠醛含量檢測(cè)方法的報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)建立測(cè)定葡萄干中羥甲基糠醛含量的固相萃取、反相高效液相色譜法。葡萄干樣品粉碎后用水溶解提取，過(guò)0.45μm濾膜，用高效液相色譜儀在285n m測(cè)定。本方法線性范圍為0.5～30m g/L，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.99997；回收率在8 5.1%～9 4.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.9%～3.4%，方法檢出限為0.1 m g/k g。是一種穩(wěn)定、靈敏度高、適應(yīng)性好的葡萄干中羥甲基糠醛含量的測(cè)定方法。

材料與方法

儀器與試劑

高效液相色譜儀；9 8.0%羥甲基糠醛標(biāo)準(zhǔn)品；甲醇（色譜純）；1 0%甲醇水溶液（10m L甲醇和90m L水混合）；實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品，用去離子水配制成0.5 m g/m L的儲(chǔ)備液。分析前用流動(dòng)相配制成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

樣品處理

稱取10g試樣，精確到0.001 g，置于100 m L容量瓶中，加入50m L水于40℃水浴浸泡30mi n。取出冷卻后，用水定容至刻度，搖勻，靜置10mi n過(guò)濾，取上清液0.45μm濾膜過(guò)濾后，上高效液相色譜儀測(cè)定。

液相色譜條件

色譜柱：AGi leh tteeh noloGi eSC18（4.6 m m×1 50m m，5 μm），流動(dòng)相：超純水+甲醇（9 0+1 0）%；流速1.0 m L/mi n；檢測(cè)波長(zhǎng)285n m；柱溫30℃；進(jìn)樣量10μL。

結(jié)果與分析

前處理的選擇

因葡萄干的成分為葡萄糖、果糖和少量的蛋白質(zhì)和酸性物質(zhì)，經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，加沉淀劑和不加沉淀劑的檢驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有區(qū)別，為減少損失影響最終結(jié)果選擇不加，而葡萄干的成分并不復(fù)雜，預(yù)處理凈化柱的主要作用是凈化樣品保護(hù)柱子，為降低損耗，不用預(yù)處理凈化柱，使前處理簡(jiǎn)單方便并能獲得很好的提取回收率。

液相色譜柱的選擇

分別選用S y m metr yCn（4.6 m m×250m m，5 μm），diAmonSi lC18（4.6 m m×250m m，5 μm），WAterSNovA-PAkCl 8。（3.9 m m×1 50m m，5 μm），|l B∞d ApAlCl 8（4.0 m m ×300 m m，10μm）四種色譜柱對(duì)葡萄干中羥甲基糠醛進(jìn)行色譜條件的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，這四種色譜柱都可以用于對(duì)羥甲基糠醛含量的分析，只有保留時(shí)間和靈敏度有所不同，AGi leh tteeh noloGi eSC18柱靈敏度和峰型均很好，所以我們選用AGi leh tteeh noloGi eSC18（4.6 m m×1 50m m，5 μm）色譜柱進(jìn)行羥甲基糠醛的測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)圖譜與實(shí)際樣品分離圖譜如圖1所示。

線性關(guān)系和檢出限用羥甲基糠醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液分別配制濃度為0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、1 0.0、20.0 μm/m L和3 0.0 μm/m L標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的色譜條件下測(cè)定，進(jìn)樣量10μL，用峰高與標(biāo)準(zhǔn)濃度作圖，線性方程為Y=6 6.73X+5.12，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.99997。當(dāng)檢測(cè)0.10m g／L標(biāo)準(zhǔn)濃度時(shí)，所測(cè)譜圖的信噪比大于1 0。根據(jù)最終樣液所代表的試樣量、定容體積和進(jìn)樣量計(jì)算，確定本方法檢出限為0.1 m g/k g。

圖1 實(shí)際樣品（B）測(cè)定圖譜

結(jié)語(yǔ)

葡萄干樣品基質(zhì)簡(jiǎn)單，含少量蛋白質(zhì)、微量元素等物質(zhì)，富含碳水化合物。本實(shí)驗(yàn)采用簡(jiǎn)單有效的方法，稱取均勻粉碎后樣品，加水于40℃水浴溶解，用0.45μm濾膜過(guò)濾，有效地降低被測(cè)組分的損失。方法回收率在8 5.1%～9 4.1%，該方法具有方便、準(zhǔn)確、靈敏度高、精密度好等優(yōu)點(diǎn)，是一種測(cè)定葡萄干中羥甲基糠醛的有效方法。

李鳳（1980-），女，檢驗(yàn)員。研究方向：食品檢驗(yàn)。

李秀娟（1980-），女，工程師。研究方向：食品檢驗(yàn)。

熱孜萬(wàn)古麗（1981-），女，工程師。研究方向：食品檢驗(yàn)。