□ 潘明杰 陳曉艷 王明微 張雨桐 吉林省安信食品技術(shù)服務有限責任公司
食品生物毒素快速檢測方法
□ 潘明杰 陳曉艷 王明微 張雨桐 吉林省安信食品技術(shù)服務有限責任公司
畜禽食品中含有的微生物源毒素是微生物代謝的過程中產(chǎn)生的毒素,主要包括肽類毒素、脂多糖內(nèi)毒素、醛類化合物等各種類型的相關(guān)毒素?,F(xiàn)階段我國食品生物毒素檢測過程中各層面出現(xiàn)的問題的概率較高,筆者根據(jù)實際工作經(jīng)驗分析我國食品微生物源毒素檢測中使用到的方式方法和技術(shù),并提出應采用的技術(shù)和方法。
微生物代謝過程中產(chǎn)生的有毒化學物質(zhì)在進入人畜體內(nèi)后會對生物機能造成破壞,從而使人畜出現(xiàn)中毒現(xiàn)象。微生物源毒素是食品中一種危害程度較高的生物毒素?,F(xiàn)腹瀉等一系列的不適反應。
近年來,科學技術(shù)發(fā)展向前推進的過程中出現(xiàn)的生物傳感器技術(shù)具有分析速度快、所用的受檢物質(zhì)的數(shù)量較少等一系列的特點,在很多類型的相關(guān)物質(zhì)檢測的過程中都能使用。由現(xiàn)階段國內(nèi)對該項技術(shù)的使用情況可知,該技術(shù)的成本相對較高,因此應用的范圍較小。懸浮芯片技術(shù)具有操作簡易、靈敏度高、適用范圍廣等一系列的特點,在未來我國經(jīng)濟發(fā)展過程中,這種技術(shù)的發(fā)展前景比較廣闊。
肽類毒素主要包括是溶血素、腸毒素等各種類型的相關(guān)毒素,其中構(gòu)成溶血素的細菌主要有單核細胞增生李斯特菌、霍亂弧菌等。溶血素在進入人畜體內(nèi)后的主要致病原理與細胞膜相互作用,使細胞的具體構(gòu)成結(jié)構(gòu)和功能受到破壞,大量的細胞內(nèi)的成分排至細胞外,導致人畜體內(nèi)的細胞大量的死亡,構(gòu)成腸毒素的細菌主要有金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌等。腸毒素是一種在細胞外進行作用的毒素,通過外界吸收或在腸道中自然產(chǎn)生,與腸粘膜相互作用,導致人體出
ELiSA法是利用酶所標記的同抗原體復合物質(zhì)的免疫反應和酶進行的催化放大作用進行一定程度的相互融合,偶聯(lián)物和固相載體上的抗原或抗體相互反應,得到的產(chǎn)物就會被酶催化水解或者氧化還原從而呈現(xiàn)出顏色發(fā)生變化。反應后所形成的顏色的深淺和檢測樣品中肽類生物源毒素的含量間存在一定的關(guān)系,可分析出食品中所含的肽類生物源毒素的性質(zhì)和含量。ELiSA法是一種敏感度、和簡易程度都較高的食品生物源毒素檢測方法,在我國食品生物毒素檢測中得到較為廣泛的應用。但使用該方法檢測食品中的金黃色葡萄球菌腸毒素時,會受到假陽性或者假陰性的影響,以致于檢測的結(jié)果不是十分精確。
PCR技術(shù)
PCR技術(shù)是在生物體外模擬d NA復制過程,提高效用比較特殊的d NA片段的增殖速度。PCR技術(shù)與現(xiàn)階段我國食品生物源毒素檢測工作中的其他技術(shù)相比,具有靈敏程度高、檢測所需時間短等一系列的特點?,F(xiàn)階段我國食品生物源毒素檢測一般使用到的是熒光定量PCR。熒光定量PCR是將會發(fā)出熒光的基團加到傳統(tǒng)的PCR反應體系中,利用反應過程中形成的熒光信號的積累監(jiān)測整個PCR反應過程中產(chǎn)物的生成量,通過和標準曲線的對比,檢測中食品中的生物源毒素的數(shù)量。
在檢測食品中的生物源毒素過程中使用到的方法種類較多,且所使用到的方法的靈敏度、精確度、適用性不盡相同。近年來,在檢測食品中肽類生物毒素過程中主要使用到的檢測方法是熒光定量PCR和ELiSA法。