劉文娥，張婉妮，周 意，王 劍

(1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科，長沙 41007;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)2008級七年制研究生班，長沙 410007; 3.湖南中醫(yī)藥大學(xué)2009級七年制研究生班，長沙 410007)

解脲支原體感染動物模型優(yōu)化方案研究

劉文娥1，張婉妮2，周 意3，王 劍1

(1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科，長沙 41007;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)2008級七年制研究生班，長沙 410007; 3.湖南中醫(yī)藥大學(xué)2009級七年制研究生班，長沙 410007)

目的探索不同造模方法的優(yōu)劣性，選擇最合適的解脲支原體感染動物模型方法。方法選擇SPF級BALB/c雌性小鼠、Wistar大鼠，分別以小劑量UU3菌液多次感染、大劑量UU3菌液一次感染、苯甲酸雌二醇預(yù)處理為干預(yù)措施，建立解脲支原體感染動物模型，分別于首次接種后14 d、28 d、42 d、56 d取實驗動物宮頸分泌物行解脲支原體培養(yǎng)，取生殖器做形態(tài)學(xué)分析。結(jié)果①BALB/c小鼠與Wistar大鼠相比，BALB/c小鼠總體一般情況較差，陰道分泌物增加，外陰潰爛明顯，而Wistar大鼠外陰無明顯變化。②大鼠各組陰道UU定植率比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);小劑量雌激素組與小劑量非雌激素組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);大劑量雌激素組與大劑量非雌激素組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);小劑量雌激素組與大劑量雌激素組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);小劑量非雌激素組與大劑量非雌激素組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。小鼠各組結(jié)果同大鼠。③同樣干預(yù)措施，在小劑量雌激素處理下，大、小鼠比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);在大劑量雌激素處理下，大、小鼠比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，說明同等處理措施下小鼠陰道UU定植率更高。④肉眼觀:小劑量雌激素組個別大鼠生殖道組織有水腫，其余各組大鼠生殖道組織柔軟，活動度好;空白組小鼠生殖道組織柔軟，活動度好;小劑量雌激素組小鼠生殖道組織充血明顯，輸卵管積水，增粗，僵硬，彈性差;大劑量雌激素組小鼠以疏松水腫為主;小劑量非雌激素組和大劑量非雌激素組僅見陰道、宮頸輕度充血水腫。⑤鏡下觀:大鼠各干預(yù)組陰道組織無明顯病理損傷，部分可見疏松組織水腫。小劑量雌激素組小鼠病理損傷嚴重;小劑量非雌激素小鼠組、大劑量雌激素小鼠組充血水腫程度較輕，腺體輕度擴張，炎性分泌物較多。結(jié)論BALB/c小鼠與Wistar大鼠相比，外陰損傷明顯;雌激素預(yù)處理能增加實驗動物解脲支原體的定植率;小劑量多次感染比大劑量一次感染更能增加UU定值率;UU在BALB/c小鼠陰道UU定植率更高;BALB/c小鼠病理損傷嚴重，對動物實驗研究價值更大。

解脲支原體;動物模型;大鼠;小鼠;優(yōu)化方案

解脲支原體(Ureaplasma urealyticum，UU)是女性生殖道常見的一種支原體，它既可以是寄生菌，也可以是致病菌。女性生殖道解脲支原 體可正常存在，不一定發(fā)病［1，2］，當女性生殖道免疫力下降或黏膜受損時，潛伏在生殖道的UU便可大量繁殖而致病。UU在性傳播疾病中發(fā)病率很高，不僅可引起前庭大腺炎、陰道炎［3，4］、宮頸炎［5］等下生殖道感染，也可引起子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎、輸卵管積水、卵巢囊腫等上生殖道感染［6，7］，導(dǎo)致不孕不育［8］、異位妊娠［9］及胎兒宮內(nèi)感染、流產(chǎn)等［10，11］，嚴重影響女性的生殖健康和生活質(zhì)量。本文通過對解脲支原體感染的不同造模方法進行優(yōu)劣比較，探索最合適的造模方法，為今后更深入的實驗研究打下基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物:BALB/c雌性小鼠40只，8周齡，體重(20±2)g，SPF級;購于湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，生產(chǎn)證號:SCXK(湘)2011-0003，Wistar雌性大鼠 20只，12～15周齡，體重(180～220)g，SPF級。購于湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，生產(chǎn)證號:SCXK(湘)2011-0003，使用許可證編號:SYXK(湘)2013-0005。陰道分泌物支原體培養(yǎng)陰性，排除既往感染。

1.1.2 實驗藥物:苯甲酸雌二醇注射液:4 mg/mL，蘇州市蘇牧動物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號: (2012)100862511。

1.1.3 UU菌株:UU3型，由南華大學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室提供。

1.1.4 主要試劑:UU液體培養(yǎng)基:2 mL/支，由珠海銀科生物工程有限公司生產(chǎn)。

1.1.5 主要儀器:37℃恒溫箱、HB-100煮鍋、超凈工作臺、低溫冰箱、石蠟包埋機、石蠟切片機、生物組織攤片機、全封閉自動脫水機、電子分析天平、臺式高速離心機、移液器、光學(xué)顯微鏡、高清晰度彩色病理分析系統(tǒng)、燒杯、量桶、眼科剪、鑷子、組織剪、組織鉗、止血鉗等。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗分組:將實驗動物飼養(yǎng)于屏障設(shè)施中，適應(yīng)環(huán)境1周。將所有動物稱重，按隨機數(shù)字表法將大、小鼠分別隨機分為5組:空白組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組，小鼠每組8只，大鼠每組4只。

1.2.2 實驗動物預(yù)處理:將小劑量雌激素組、大劑量雌激素組于菌液接種前頸部皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.5 mg/只，每周1次，連續(xù)4周。其余各組動物頸部皮下注射無菌生理鹽水。

1.2.3 UU3菌液制備:將凍干 UU3標準株加入2 mL UU培養(yǎng)基內(nèi)，充分混勻。取3支高溫處理的無菌小試管，分別加入2 mL培養(yǎng)液和UU3標準混懸液2滴，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)增菌，當培養(yǎng)液顏色由黃色變?yōu)槊倒寮t色時取出，增菌產(chǎn)物予液體培養(yǎng)基稀釋配制成濃度為105CCU/mL、107CCU/ mL的菌液。

1.2.4 造模方法:于第2次預(yù)處理后第2天開始菌液接種。采用移液槍和一次性槍頭，暴露實驗動物陰道，將濃度為105CCU/mL的菌液50 μL注入小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組，每天1次，連續(xù)7 d;將濃度為107CCU/mL的菌液50 μL注入大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組，僅注入1次;空白組陰道內(nèi)注入等量無菌培養(yǎng)基。菌液接種后，將實驗動物倒立5～10 min，待菌液被陰道黏膜完全吸收后，放回籠內(nèi)。

1.2.5 檢測指標:

1.2.5.1 一般情況觀察:觀察及記錄各組動物的活動度、飲食、毛發(fā)、外陰、陰道分泌物、二便等情況。

1.2.5.2 陰道分泌物UU培養(yǎng)法:分別于首次接種后7、14、21、28、35、42、49、56 d取實驗動物陰道分泌物行解脲支原體培養(yǎng)。以無菌陰拭子取實驗動物陰道分泌物，將陰拭子插入動物陰道內(nèi)，輕輕旋轉(zhuǎn)蘸取陰道分泌物，然后將陰拭子置于2 mL UU無菌培養(yǎng)基內(nèi)，充分吹打混勻，蓋好橡皮塞，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h，觀察顏色變化，當培養(yǎng)基顏色由黃色變成紅色時，提示有UU生長。

1.2.5.3 組織形態(tài)學(xué)觀察:分別于首次接種后14、28、42、56 d分4批以頸椎脫臼法處死動物(小鼠每組每批處死2只，大鼠每組每批處死1只)，肉眼觀察實驗動物的陰道、宮頸、子宮、輸卵管等組織;取實驗動物陰道組織，甲醛固定，二甲苯透明浸臘，石蠟包埋，切片，HE染色后，光鏡下行形態(tài)學(xué)分析。

1.2.6 統(tǒng)計學(xué)方法:采用 SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件，組間數(shù)據(jù)比較采用卡方檢驗。

2 結(jié)果

2.1 實驗動物一般情況觀察

Wistar大鼠各組外陰情況:正常組大鼠:毛發(fā)白，毛色光滑，無豎毛，外陰正常，陰道口無明顯擴張，陰道分泌物無明顯增加。大、小劑量非雌激素組大鼠:毛發(fā)白，毛色光滑，無豎毛，外陰正常，陰道口無明顯擴張，陰道分泌物無明顯增加。大、小劑量雌激素組大鼠:毛發(fā)白，毛色光滑，無豎毛，外陰無紅腫潰爛，陰道口稍擴張，陰道分泌物增加(圖1)。

BALB/c小鼠各組外陰情況:正常組小鼠:毛發(fā)白，毛色光滑，無豎毛，外陰正常，陰道口無明顯擴張，陰道分泌物無明顯增加。大、小劑量非雌激素組小鼠:毛發(fā)稍發(fā)黃，無豎毛，外陰紅腫，部分潰爛，面積較小，陰道口稍擴張，陰道分泌物增加。大、小劑量雌激素組小鼠:毛發(fā)發(fā)黃，豎毛，外陰紅腫，外陰潰爛明顯，潰爛面積大，陰道分泌物明顯增加(圖2)。

圖1 各組大鼠外陰的外觀。由左至右分別是正常組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組。Fig.1 Gross appearance of the vulva of Wistar rats in each group.From left to right:the normal group，low-dose estrogen group，low-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

圖2 各組BALB/c小鼠外陰的外觀。由左至右分別是:正常組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組。Fig.2 Gross appearance of the vulva of the BALB/c mice in each group.From left to right:the normal group，low-dose estrogen group，low-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

根據(jù)實驗動物一般情況分析，雌激素預(yù)處理可以使實驗動物陰道擴張，陰道分泌物增加，加重損傷程度;Wistar大鼠與 BALB/c小鼠相比，BALB/c小鼠一般情況較差，陰道分泌物增加，外陰潰爛明顯，而Wistar大鼠外陰無明顯變化。

2.2 解脲支原體感染檢測結(jié)果

分別于首次接種后7、14、21、28、35、42、49、56 d取實驗動物陰道分泌物行解脲支原體培養(yǎng)。將每次檢測數(shù)據(jù)累加后，采用卡方檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。

采用卡方檢驗進行數(shù)據(jù)分析，各組比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.01)。小劑量雌激素組與小劑量非雌激素組比較，P=0.006＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;大劑量雌激素組與大劑量非雌激素組比較，P=0.000＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明雌激素預(yù)處理能增加大鼠陰道定植率。小劑量雌激素組與大劑量雌激素組比較，P=0.006＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;小劑量非雌激素組與大劑量非雌激素組比較，P=0.006＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明小劑量多次感染比大劑量一次感染更能增加大鼠UU定值(表1)。

采用卡方檢驗進行數(shù)據(jù)分析，各組比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.01)。小劑量雌激素組與小劑量非雌激素組比較，P=0.000＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;大劑量雌激素組與大劑量非雌激素組比較，P=0.000＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明雌激素預(yù)處理能增加小鼠陰道定植率。小劑量雌激素組與大劑量雌激素組比較，P=0.106＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義;小劑量非雌激素組與大劑量非雌激素組比較，P=0.182＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明小劑量多次感染與大劑量一次感染對小鼠UU定值無影響。

同樣干預(yù)措施下，對大鼠、小鼠進行統(tǒng)計學(xué)分析。小劑量雌激素處理下，大鼠、小鼠比較，P= 0.018＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;大劑量雌激素處理下，大小鼠比較，P=0.000＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明同等處理小鼠陰道UU定植率更高(表2)。

2.3 肉眼組織形態(tài)學(xué)觀察

Wistar大鼠生殖道組織肉眼觀:正常組大鼠:生殖道組織柔軟，活動度好。大、小劑量非雌激素組大鼠:生殖道組織柔軟，活動度好。大劑量雌激素組大鼠:生殖道組織柔軟，活動度好。小劑量雌激素組大鼠:個別大鼠生殖道組織有水腫，活動度欠佳(圖3)。

BALB/c小鼠生殖道組織肉眼觀:正常組小鼠:生殖道組織柔軟，活動度好。大、小劑量非雌激素組小鼠:生殖道組織僅見陰道、宮頸輕度充血水腫。小劑量雌激素組小鼠:生殖道組織充血明顯，輸卵管積水，增粗，僵硬，彈性差。大劑量雌激素組小鼠:生殖道組織以疏松水腫為主(圖4)。

2.4 鏡下組織形態(tài)學(xué)觀察

2.4.1 HE染色下Wistar大鼠陰道組織鏡下觀:空白組Wistar大鼠組、小劑量非雌激素 Wistar大鼠組、大劑量非雌激素 Wistar大鼠組、大劑量雌激素Wistar大鼠組陰道組織鏡下觀:陰道組織結(jié)構(gòu)清晰，有少量炎癥細胞浸潤，上皮細胞角化部分脫落。小劑量雌激素組Wistar大鼠陰道組織鏡下觀:部分組織輕微病理損傷，炎性細胞浸潤，部分可見疏松組織水腫(圖5)。

表1 大鼠陰道分泌物解脲支原體感染情況Tab.1 Cases ofUreaplasma urealyticuminfection from the rat vaginal secretions

表2 小鼠陰道分泌物解脲支原體感染情況Tab.2 Cases ofUreaplasma urealyticuminfection from mouse vaginal secretions

2.4.2 HE染色下 BALB/c小鼠陰道組織鏡下觀:空白組BALB/c小鼠組:陰道組織結(jié)構(gòu)清晰，有少量炎癥細胞浸潤，上皮細胞角化脫落不全。小劑量雌激素組BALB/c小鼠組:陰道組織充血水腫程度嚴重，炎性分泌物多，可見大量泡沫細胞浸潤，可見大量脫落細胞及組織。小劑量非雌激素組BALB/c小鼠組:充血水腫程度較重，炎性分泌物較多，可見大量泡沫細胞浸潤，可見大量脫落細胞及組織。大劑量雌激素BALB/c小鼠組:充血水腫程度較重，炎性分泌物較多，可見大量泡沫細胞浸潤，可見大量脫落細胞及組織。大劑量非雌激素組BALB/c小鼠組:部分輕微病理損傷，炎性細胞浸潤，部分可見疏松組織水腫(圖6)。

2.4.3 HE染色下Wistar大鼠子宮組織鏡下觀:空白組Wistar大鼠組、小劑量非雌激素 Wistar大鼠組、大劑量非雌激素 Wistar大鼠組、大劑量雌激素Wistar大鼠組子宮組織鏡下觀:組織結(jié)構(gòu)清晰，有少量炎癥細胞浸潤，腺體內(nèi)可見均勻粉染的分泌物，上皮細胞角化不全或過度。小劑量雌激素組Wistar大鼠子宮組織鏡下觀:部分組織輕微病理損傷，炎性細胞浸潤，部分可見疏松組織水腫(圖7)。

圖3 各組大鼠陰道、子宮、輸卵管的外觀。由左至右分別是:大鼠正常組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組。Fig.3 Gross appearance of the vagina，uterus and fallopian tube of Wistar rats in each group.From left to right: the normal group，low-dose estrogen group，low-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

圖4 BALB/c小鼠各組生殖器官肉眼觀(由左至右分別是小鼠正常組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組)Fig.4 Gross appearance of the vagina，uterus and fallopian tube of the BALB/c mice in each group.From left to right: the normal group，low-dose estrogen group，low-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

圖5 HE染色下Wistar大鼠陰道組織鏡下觀(由左至右分別是大鼠正常組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組)放大倍數(shù)10×20Fig.5 Histology of the vagina of Wistar rats.From left to right:the normal group，low-dose estrogen group，low-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

2.4.4 HE染色下 BALB/c小鼠子宮組織鏡下觀:空白組小鼠組:組織結(jié)構(gòu)清晰，有少量炎癥細胞浸潤，腺體內(nèi)可見均勻粉染的分泌物，上皮細胞角化不全或過度。小劑量雌激素組小鼠:粘膜、間質(zhì)層不同程度中性粒細胞浸潤，粘膜層、間質(zhì)明顯疏松水腫，子宮腺體擴張或增生，宮腔粘膜及粘膜下組織可見嗜酸性粒細胞及漿細胞浸潤。小劑量非雌激素小鼠組:組織充血水腫程度較輕，腺體輕度擴張，炎性分泌物較多。大劑量非雌激素小鼠組:部分輕微病理損傷，炎性細胞浸潤，部分可見疏松組織水腫。大劑量雌激素小鼠組:充血水腫程度較輕，腺體輕度擴張，炎性分泌物較多(圖8)。

圖6 HE染色下BALB/c小鼠陰道組織鏡下觀(由左至右分別是小鼠正常組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組)放大倍數(shù)10×20Fig.6 Histology of the BALB/c mouse vagina.HE staining.From left to right:the normal group，low-dose estrogen group，low-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

圖7 各組大鼠子宮的鏡下形態(tài)。HE染色。自左至右:正常組、低劑量雌激素組、低劑量非雌激素組、高劑量雌激素組、高劑量非雌激素組。放大倍數(shù)10×20Fig.7 Histology of the rat uterus.HE staining.From left to right:the normal group，low-dose estrogen group，slow-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

圖8 HE染色下BALB/c小鼠子宮組織鏡下觀(由左至右分別是小鼠正常組、小劑量雌激素組、小劑量非雌激素組、大劑量雌激素組、大劑量非雌激素組)放大倍數(shù)10×20Fig.8 Histology of the BALB/c mouse uterus.HE staining.From left to right:the normal group，ow-dose estrogen group，low-dose non-estrogen group，high-dose estrogen group，high-dose non-estrogen group.

3 討論

支原體是一類大小介于細菌和病毒之間、無細胞壁、呈多形性、能在無生命培養(yǎng)基中繁殖的原核微生物，常寄居在人體呼吸道和泌尿生殖道黏膜的表面，是引起女性泌尿生殖系統(tǒng)感染的常見病原體。寄居于人體泌尿生殖道粘膜的支原體以解脲支原體、人型支原體(Mycoplasma homonis，Mh)及生殖支原體(Mycoplasma genitalum，Mg)最常見，這3種支原體可正常存在于人體內(nèi)，并不都致病，致病性支原體為特定血清型的支原體。UU是一類沒有細胞壁的原核細胞微生物，界于細菌和病毒之間，歸屬柔膜體綱支原體目，是目前發(fā)現(xiàn)的能夠在無生命體培養(yǎng)基中生長繁殖的最小微生物，是泌尿生殖道常見的條件致病菌。解脲支原體大小為125～250 μm，分子量為 4.5×108，能通過0.45 μm的微孔濾膜，沒有細胞壁，因此在形態(tài)上呈高度多形性，在-70℃凍干狀態(tài)下可以保存數(shù)年之久。

近年來，UU感染的發(fā)病率越來越高，臨床上對宮頸分泌物檢測UU陽性的患者，常常盲目使用抗生素，導(dǎo)致耐藥現(xiàn)象嚴重，給UU感染的徹底治療帶來了很大的困難［12］。目前有許多學(xué)者從 UU的致病性、藥物及治療機理等方面進行研究，這些研究都需要建立良好的解脲支原體感染動物模型，模型的順利建立將為以后的各種研究奠定良好的基礎(chǔ)。國外曾有學(xué)者用解脲脲支原體接種多種哺乳動物未獲成功，因此曾一度認為由人體分離出來的解脲脲支原體只能在人體內(nèi)生存。直至1989年Furr與Taylor-Robinson［13］在接種前給予小鼠皮下注射0.5 mg的雌二醇，隔周1次，共4次。并于第2次注射后用吸液管取50 μL解脲脲支原體懸液注入陰道。實驗結(jié)果顯示雌二醇處理的小鼠，其陰道粘膜的多核白細胞減少或消失，解脲脲支原體能夠定植于經(jīng)激素處理的小鼠生殖道，并且能夠上行播散至卵巢、肝、脾。而沒有接受激素處理的小鼠，解脲支原體無法在其生殖道定植。在此基礎(chǔ)上，國內(nèi)外很多研究者［14-16］已成功建立UU感染動物模型，實驗動物多以大小鼠及新西蘭白兔為主。

本文在其他學(xué)者的研究基礎(chǔ)上對解脲支原體感染的不同造模方法進行優(yōu)劣比較，探索最優(yōu)良的造模方法。采用陰道接種菌液的方法給 Wistar大鼠、BALB/c小鼠同時造模，并給出不同的干預(yù)措施，觀察各自的造模結(jié)果。從本實驗的觀察結(jié)果可得出結(jié)論，BALB/c小鼠較 Wistar大鼠陰道接種解脲支原體造模成功率更高。此外，研究發(fā)現(xiàn)雌激素預(yù)處理及多次陰道菌液接種均能增加解脲支原體的定植率。本研究探討的以BALB/c小鼠為對象，雌激素預(yù)處理、多次陰道菌液接種的造模方法較為優(yōu)良，可供學(xué)者選擇，并為今后更深入的實驗研究提供理論基礎(chǔ)。

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Optimization of animal models of Ureaplasma urealyticum infection

LIU Wen-e1，ZHANG Wan-Ni2，ZHOU Yi3，WANG Jian1
(1.Department of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)irst Affiliated Hospital，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410007，China;2.The 2008 Seven-year Graduate Class;3.The 2009 Seven-year Graduate Class of Hunan University of Traditional Chinese Medicine，Changsha 410007)

ObjectiveTo explore different methods for establishing animal models ofUreaplasma urealyticum(UU)infection and to select the best method of establishment of this disease.MethodsSPF female BALB/c mice and Wistar rats were multiple-infected with small dose of UU liquid or single-infected with high-dose UU liquid，pretreated withestradiol benzoate，to establish models ofUreaplasma urealyticuminfection.Cervical secretion was taken for UU culture at 14，28，42 and 56 days after the first time UU treatment，and the reproductive organs were taken for histopathological examination.ResultsGross examination of the UU-infected rats showed generally less serious lesions than the mice.The low-dose estrogen group was worst，showing hyperemia and edema，cervical hypertrophy，hydrosalpinx，enlargement，and more rigid with poor elasticity.Significant differences were observed in the vaginal UU colonization rates between the lowdose estrogen and low-dose non-estrogen groups，high-dose estrogen and non-estrogen groups，low-dose estrogen and highdose estrogen groups，low-dose estrogen and non-estrogen groups，in both the mice and rats(P＜0.05 for all).The same dose estrogen treatment caused a higher UU colonization rate in the mice than rats(P＜0.05).Histological examination showed that the low-dose estrogen treated rats had no obvious pathological changes，except loose tissue edema in some rats，but apparent pathological changes were observed in the low-dose estrogen treated mice.ConclusionsThe vulvar lesions in the mice are worse than in the rats.Estrogen pre-treatment can increase theUreaplasma urealyticumcolonization rate in the animals.The UU colonization rate in the vagina of mice is higher than in the rats，and multiple low-dose UU treatment produces a higher UU colonization rate than a single high-dose UU treatment.Therefore，BALB/c mice are more susceptible toUreaplasma urealyticuminfection，with more serious pathological changes，and are more suitable for experimental studies of related diseases.

Ureaplasma urealytium，infection;Model，animal;Rats;Mice;Optimization research

R-33

A

1671-7856(2016)12-0038-07

10.3969.j.issn.1671-7856.2016.12.008

2016-07-01

湖南省科技廳課題，編號:2012TT2024。

劉文娥(1972-)，女，副主任醫(yī)師，碩士，研究方向:婦科炎性疾病中醫(yī)藥防治研究，E-mail:liuwene@163.com。