原歡歡,唐 清,張飛燕,何 然,徐曉玉,3

(1. 西南大學(xué)藥學(xué)院，重慶 400715；2. 太極集團重慶涪陵制藥廠有限公司科研所，重慶 408000；3.重慶市藥效評價工程技術(shù)研究中心，重慶 400715)

梓葛凍干粉針；安全性；藥理學(xué)；中樞神經(jīng)系統(tǒng)；呼吸系統(tǒng)；心血管系統(tǒng)

梓葛凍干粉針的安全性藥理學(xué)實驗

原歡歡1,2,唐 清1,張飛燕1,何 然1,徐曉玉1,3

(1. 西南大學(xué)藥學(xué)院，重慶 400715；2. 太極集團重慶涪陵制藥廠有限公司科研所，重慶 408000；3.重慶市藥效評價工程技術(shù)研究中心，重慶 400715)

梓葛凍干粉針(lyophilized powder of catalpol and puerarin，C-P)為西南大學(xué)中藥研究所自主研發(fā)的用于治療腦缺血卒中的一種新型中藥單體復(fù)方制劑，其主要成分為梓醇和葛根素。研究表明[1-2]，C-P能通過血腦屏障，可明顯減少缺血性腦中風(fēng)模型小鼠大腦梗死體積百分比[3]，還能抑制血小板聚集，促進血凝塊溶解[4]，保護神經(jīng)細(xì)胞，改善神經(jīng)細(xì)胞損傷后的生長形態(tài)[5-6]。該課題組已經(jīng)開展了C-P的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[7]和部分安全性評價研究[8]。為了更全面地掌握C-P用藥后對機體基本生命活動的影響，本文對其安全性藥理學(xué)進行了研究。

1 材料

1.1 試劑與動物 C-P(西南大學(xué)中藥研究所提供，批號20120613)；戊巴比妥鈉(Merck公司，批號：100411)。昆明(KM)小鼠和SD大鼠，SPF級，均由重慶醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。

1.2 儀器 轉(zhuǎn)棒疲勞儀(濟南益延科技發(fā)展有限公司，YLS-4C型)；小鼠自主活動測試儀(成都泰盟科技有限公司，ZZ-6型)；生物機能實驗系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司，BL-420F型)

1.3 劑量 依據(jù)西南大學(xué)分子藥理實驗室對C-P的前期主要藥效學(xué)實驗結(jié)果， 即SD大鼠有效劑量為32.7 mg·kg-1，KM小鼠有效劑量為52.3 mg·kg-1[9]，設(shè)立本研究中的高、中、低劑量。

2 方法

2.1 對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響實驗 取KM小鼠40只，♀♂各半，隨機分為4組，分別為C-P低(52.3 mg·kg-1)、中(104.6 mg·kg-1)、高(209.2 mg·kg-1)劑量組和生理鹽水對照組，每組10只，行尾靜脈注射。參考文獻(xiàn)方法[10]，分別觀察給藥后藥物對小鼠一般行為表現(xiàn)、自主活動、協(xié)調(diào)機能和戊巴比妥鈉閾下催眠劑量誘發(fā)入睡的影響，記錄給藥前后小鼠自主活動次數(shù)、給藥后從轉(zhuǎn)棒上跌落的小鼠數(shù)量、給藥后戊巴比妥鈉閾下催眠劑量下30 min內(nèi)翻正反射消失1 min以上的小鼠數(shù)量，比較各用藥組與對照組間的差異性。

2.2 對呼吸系統(tǒng)功能和心血管系統(tǒng)的影響實驗 取SD大鼠40只，♀♂各半，隨機分為4組，分別為C-P低(32.7 mg·kg-1)、中(65.4 mg·kg-1)、高(130.8 mg·kg-1)劑量組和生理鹽水對照組，每組10只，尾靜脈注射。參考文獻(xiàn)方法[11]，采用BL-420F生物機能信號采集系統(tǒng)，分別觀察戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉狀態(tài)下，大鼠給藥前后其呼吸頻率、呼吸幅度、血壓、心律、心電等的變化，比較各用藥組與對照組間各項指標(biāo)的差異性。

3 結(jié)果

3.1 C-P對中樞神經(jīng)系統(tǒng)無明顯影響 C-P組給藥后，小鼠的一般行為表現(xiàn)、自主活動、協(xié)調(diào)機能和戊巴比妥鈉閾下催眠劑量誘發(fā)入睡率與對照組比較均無差異(P>0.05)。

3.2 C-P對呼吸系統(tǒng)功能和心血管系統(tǒng)無明顯影響 與同時間對照組相比，C-P給藥后對SD大鼠呼吸頻率、呼吸幅度、心電、心率、收縮壓、舒張壓等指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

4 討論

本實驗研究了C-P對KM小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)、SD大鼠呼吸系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)的影響。結(jié)果表明，C-P在治療劑量范圍對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)均無明顯影響。

(致謝：感謝西南大學(xué)藥學(xué)院分子藥理實驗室各位老師和同學(xué)的支持和幫助！)

[1] Qin W, Mao X, Chen W, et al. HPLC-APCI-MS/MS method for the determination of catalpol in rat plasma and cerebrospinal fluid: aplication to aninvivopharmacokinetic study[J].JPharmBiomedAnal, 2012, 70(21): 337-43.

[2] 王 琴,邢 茂,唐 勤,等.梓葛凍干粉針中葛根素在正常大鼠和腦缺血大鼠的藥代動力學(xué)比較研究[J].中國藥學(xué)雜志,2014,49(7):583-7.

[2] Wang Q, Xing M, Tang Q, et al. Pharmacokinetic study of puerarin of Zige freeze-dried powder in cerebral ischemia rats and normal rats[J].ChinPharmJ, 2014, 49(7): 583-7.

[3] Liu Y, Xue Q, Li X, et al. Amelioration of stroke-induced neurological deficiency by lyophilized powder catapol and puerarin[J].IntJBiolSci, 2014, 10(4) : 448-56.

[4] 楊 盛,張飛燕,何 然,等.梓葛凍干粉針抗血栓作用實驗研究[J].中國藥理學(xué)通報,2016,32(5):737-8.

[4] Yang S, Zhang F Y, He R, et al. Effect of lyophilized powder of catalpol and puerarin on antithrombosis[J].ChinPharmacolBull, 2016, 32(5): 737-8.

[5] 薛 強,肖亞平,陳玉寶,等.梓葛凍干粉針抗腦血管單元炎癥及氧化損傷[J].中國藥理學(xué)通報,2016,32(3):442-3.

[5] Xue Q, Xiao Y P, Chen Y B, et al. Lyophilized powder of catalpol and puerarin reduce stroke inflammation and oxidative stress[J].ChinPharmacolBull, 2016, 32(3): 442-3.

[6] 薛 強,王紅玉,孫文威,等.梓葛凍干粉針抗腦缺血“神經(jīng)血管單元”多細(xì)胞凋亡的機制[J].中華中醫(yī)藥雜志,2016,31(5):1716-22.

[6] Xue Q, Wang H Y, Sun W W, et al. Anti-apoptotic mechanisms of lyophilized powder of catapol and puerarin against brain ischemia damage on neurovascular unit cells[J].ChinJTraditChinMedPharm, 2016, 31(5): 1716-22.

[7] 原歡歡,張繼芬,王 琴,等.RP-HPLC法測定梓葛凍干粉針中的藥物含量及有關(guān)物質(zhì)[J].中國藥學(xué)雜志, 2011,46(16):1276-9.

[7] Yuan H H, Zhang J F, Wang Q, et al. Determination of catalpol and puerarin contents and their related substances in Zige freeze-dried powder for injection by RP-HPLC[J].ChinPharmJ, 2011, 46(16): 1276-9.

[8] 原歡歡,張繼芬,王 琴,等.梓葛凍干粉針的局部刺激性、過敏性、溶血性和急性毒性研究[J].中國藥理學(xué)通報,2013,29(6):880-1.

[8] Yuan H H, Zhang J F, Wang Q, et al. Focal irritant, allergia, haemolyticus and acute toxicity of catalpol and puerarin for injection[J].ChinPharmacolBull, 2013, 29(6): 880-1.

[9] 徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學(xué)(第三版)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2001:203.

[9] Xu S Y, Bian R L, Chen X.ExperimentalMethodologyofPharmacology, 3rdedition[M]. Beijing: People′s Medical Publishing House, 2001: 203.

[10]艾 國,王德文,黃正明,等.金絲桃苷的一般藥理學(xué)研究[J].藥物評價研究, 2016,39(2): 202-6.

[10]Ai G, Wang D W, Huang Z M, et al. General pharmacological study of hyperoside[J].DrugEvalRes, 2016, 39(2): 202-6.

[11]陳俞材,張惠芳,林溢煌,等.新型Rho激酶抑制劑DL0805-2的一般藥理學(xué)研究[J].中國新藥雜志, 2015,24(18): 2065-72.

[11]Chen Y C, Zhang H F, Lin Y H, et al. General pharmacology of the new Rho kinase inhibitor DL0805-2[J].ChinJNewDrugs,2015,24(18): 2065-72.

Safety pharmacological study of lyophilized powder of catalpol and puerarin

YUAN Huan-huan1,2, TANG Qing1, ZHANG Fei-yan1, HE Ran1, XU Xiao-yu1,3

(1.CollegeofPharmaceuticalSciences,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China; 2.ResearchInstituteofChongqingFulingDrugManufactoryLimitedCompanyofTaijiBloc,Chongqing408000,China; 3.ChongqingEngineeringResearchCenterforPharmacologicalEvaluation,Chongqing400715,China)

lyophilized powder of catalpol and puerarin; safety; pharmacology; central nervous system; respiratory system; cardiovascular system

2016-12-12,

2017-01-13

原歡歡(1984-)，男，碩士，研究方向：新藥開發(fā)，E-mail:2009yuanhuan@sina.com; 徐曉玉(1958-)，女，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中藥藥理與新藥研發(fā)，通訊作者，Tel: 023-68251679， E-mail: xuxiaoyu@swu.edu.cn

時間：2017-4-24 11:21

http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20170424.1121.060.html

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.05.030

A

1001-1978(2017)05-0739-02

R-332；R282.71；R；R331.3；R332；R338.63；R965.3