景維華
(甘肅省平?jīng)鍪徐`臺縣畜牧獸醫(yī)局,甘肅靈臺 744400)
日糧營養(yǎng)水平對犏牛血液生化指標的影響
景維華
(甘肅省平?jīng)鍪徐`臺縣畜牧獸醫(yī)局,甘肅靈臺 744400)
本實驗對在不同日糧營養(yǎng)水平下血液中總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)含量進行了測定,結果表明:三種酶含量最高為90%Ⅵ期,T-AOC在90%Ⅵ與60%Ⅵ期期間差異極其顯著;SOD在60%Ⅵ期與30%Ⅵ期間差異極其顯著;GSH-PX在100%Ⅵ期與90%Ⅵ期間差異極其顯著。
犏牛 營養(yǎng)水平 抗氧化酶 日糧 代謝試驗
犏牛是牦牛和黃牛的一代雜種,對海拔3000m以上的高寒草地生態(tài)環(huán)境保持較強的適應性,無論是雄性還是雌性,都有顯著的雜種優(yōu)勢,在生長發(fā)育、體重及生產(chǎn)性能上均優(yōu)于親代〔1〕。這些特性與犏牛長期生活在高寒缺氧的惡劣環(huán)境是相適應的。自由基的平衡主要得益于抗氧化酶,它們能將氧自由基〔O2〕歧化為H2O2,再變?yōu)镠2O而被清除。本實驗試圖通過測定在特殊環(huán)境下生存的犏牛血漿中總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平受日糧營養(yǎng)的影響狀況,探索當?shù)仃?寡趸胶膺m宜的飼養(yǎng)水平,使其生產(chǎn)力得以提高;同時也使得該草原生態(tài)系統(tǒng)得以健康發(fā)展。
1.1 實驗動物
于甘肅省武威市天祝縣烏鞘嶺放牧牛群中選取,體況接近、營養(yǎng)狀況良好的3歲閹犏牛3頭。在枯草季節(jié)(11月至第二年4月)舍飼主飼麥秸、燕麥草等,補飼少量精料,牧草返青后以放牧為主。實驗前與當?shù)仫曫B(yǎng)牛群混養(yǎng),試驗期間,按3階拉丁方設計飼喂,每天為3頭牛添加足量飲水。實驗共分為兩個時期:第1階段為自由采食期,所有牛單槽飼喂燕麥青干草,每天9:00、14:00、17:00時3次飼喂,足量添加15d,確定自由采食量(Ⅵ)為3347.4g;第2階段為設定飼喂期,每頭牛分別以自由采食量的90%(3122.723g)、60%(2018.033 g)、30%(997.75 g)分3個時期飼喂,每期17d,每天9:00、14:00、17:00時3次飼喂。
1.2 樣品制備
每期第17d晨9:00飼前,用剪毛剪剪掉犏牛頸部被毛,露出皮膚,以5#針頭靜脈采血。將血液置于400 ul肝素預處理過的15ml離心管內,緩慢轉動離心管,使肝素充分混入血液內。于2000r/ min條件離心10min;取上層血漿并分裝編號,在-20℃冰箱中保存。
1.3 測定方法及儀器
1.3.1 試劑
總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所;冰醋酸為國產(chǎn)分析純,實驗用水均為去離子水。
1.3.2 實驗儀器
U2800分光光度計(日本日立高技術公司)、Finnpipette微量移液器(上海雷勃分析儀器有限公司)、22K型高速離心機(長沙英泰儀器有限公司)、HH-W420數(shù)顯三用恒溫水箱(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)、XW-80A漩渦混合器(上海精科實業(yè)有限公司)。
1.4 數(shù)據(jù)處理
采用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計軟件進行,均值差異顯著性用LSD法進行比較。
不同飼養(yǎng)水平對犏牛血漿SOD 、GSH-PX、T-AOC活性的影響:
通過試驗數(shù)據(jù)可以看出:血漿中SOD的含量從100%Ⅵ到90%Ⅵ間呈顯著上升趨勢,90%Ⅵ時達到最大的123.7233 U/ml;而從90%Ⅵ到30%Ⅵ則均呈下降趨勢,其中60%Ⅵ與30%Ⅵ時含量差異及其顯著(p<0.01)。血漿中GSH-PX的含量從100%Ⅵ到90%Ⅵ間呈顯著上升趨勢,90%Ⅵ時達到最大的185.9367U/ml,且90%Ⅵ與60%Ⅵ相鄰兩個飼喂水平差異顯著(0.01<p<0.05),60%Ⅵ與30%Ⅵ相鄰兩個飼喂水平也差異顯著(0.01<p<0.05)。血漿中T-AOC含量總體變化不大,90%Ⅵ時達到21.33667 U/ml,其中100%Ⅵ到90%Ⅵ含量上升不顯著,60%Ⅵ與30%Ⅵ兩個時期間差異也不顯著,只有90%Ⅵ到60%Ⅵ含量差異極其顯著的下降。
從60%Ⅵ到30%Ⅵ這一時期內,SOD含量從99.1566 U/ml下降到47.5633 U/ml,而GSH-PX含量從33.28333U/ml上升到105.9933U/ ml.這與機體的抗氧化系統(tǒng)內可能存在某種抗氧化能力總量的動態(tài)平衡機制有關,即作為抗氧化體系的SOD和GSH-PX在某種狀態(tài)下,并非同時上升同時下降。而是一種互補的體系,一種機制激活時另一種處于被抑制。
從100%Ⅵ到90%Ⅵ三種酶含量均上升。營養(yǎng)物質是自由基產(chǎn)生的基礎,大多數(shù)自由基來自于營養(yǎng)物質的酶促反應或非酶促反應,這個過程中需要ATP,而ATP的產(chǎn)生必然與營養(yǎng)物質有直接關系。從100%Ⅵ到90%Ⅵ這個階段內隨著營養(yǎng)攝入的減少,如前邊所闡述的那樣,氧自由基的產(chǎn)生也減少;而抗氧化物質的減少速度不及氧自由基的,所以三種酶含量均上升。當犏牛的營養(yǎng)水平處于100%Ⅵ到90%Ⅵ階段時,自由基的產(chǎn)生于消除相平衡。
研究表明不同營養(yǎng)狀況對犏牛體內抗氧化能力有明顯影響,犏牛最佳抗氧化狀態(tài)在其90%Ⅵ時。但仍有以下幾個問題沒有搞清楚:第1,SOD和GSH-PX的含量和小于T-AOC含量;第2,GSH-PX在60%Ⅵ到30%Ⅵ階段時含量上升。
[1] 沙米,田可川,張艷花.高原牧區(qū)犏牛胚胎移植技術的應用研究[J].草食家畜,2003,(3):121.