吳曉青 王漢勇

(1.唐山市豐南區(qū)農(nóng)牧局,河北唐山 063300; 2.唐山市豐南區(qū)胥各莊動(dòng)物防疫站,河北唐山 063300)

綿羊胚胎移植技術(shù)

吳曉青1王漢勇2

(1.唐山市豐南區(qū)農(nóng)牧局,河北唐山 063300; 2.唐山市豐南區(qū)胥各莊動(dòng)物防疫站,河北唐山 063300)

隨著近幾年養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)化、工廠化、標(biāo)準(zhǔn)化的不斷推進(jìn)，羊繁育新技術(shù)的應(yīng)用也越來越普遍，尤其是胚胎移植技術(shù)，是種羊迅速擴(kuò)群最常用的繁育新技術(shù)。唐山市豐南區(qū)早在90年代初期就在利用胚胎移植技術(shù)進(jìn)行黑頭杜泊種羊迅速繁育，已經(jīng)掌握了該技術(shù)并取得了一定的成效，2017年3月份，豐南區(qū)東鑫揚(yáng)農(nóng)民養(yǎng)殖合作社調(diào)理供體杜泊羊306只、受體綿羊 1667只采用供體腹腔內(nèi)窺鏡子宮角一次輸精、受體移植等先進(jìn)技術(shù)進(jìn)行胚胎移植，供體羊超排處理293只，配種291只，手術(shù)沖胚處理285只，沖胚數(shù)量2170枚，因掉栓、懷孕等原因淘汰供體11只，供體利用93.13%，平均沖取可利用胚胎7.61枚；受體手術(shù)移植處理1661只，移植1596只（移植單胚1022只，雙胚574只），受體移植利用率達(dá)到95.74%。此次移植無論是同期發(fā)情率、還是有效胚胎生產(chǎn)數(shù)量均達(dá)到了國內(nèi)先進(jìn)水平，取得了良好的效果，超出預(yù)期。下面就綿羊胚胎移植技術(shù)給大家介紹一下，僅供參考。

1 羊胚胎移植技術(shù)概念及主要意義

也稱受精卵移植，是指從一頭良種母羊的輸卵管或子宮內(nèi)取出早期胚胎，移植到另一頭生理狀態(tài)相同母羊的輸卵管或子宮內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成新的個(gè)體，也稱作“借腹懷胎”。提供胚胎的個(gè)體稱為供體，接受胚胎的個(gè)體稱為受體。通過胚胎移植生產(chǎn)的后代，其遺傳特性取決于供體母畜和與之交配的公畜的遺傳特性，而受體對(duì)移植后代的遺傳性能影響很小。

胚胎移植技術(shù)沖破了母畜繁殖率低的障礙，能大大提高母畜繁殖效率，使優(yōu)秀母畜可以生產(chǎn)出比自然繁育更多的優(yōu)秀后代，使優(yōu)良公、母畜繁殖潛力得以充分發(fā)揮；利用胚胎移植技術(shù)可以代替優(yōu)良種畜的引進(jìn)，用胚胎代替活畜引種，運(yùn)輸更為方便，不僅可以節(jié)約數(shù)額巨大的進(jìn)口種畜的費(fèi)用，還可以把引種過程中疾病傳播的危險(xiǎn)性降到最低。

2 胚胎移植技術(shù)的主要技術(shù)環(huán)節(jié)

胚胎移植的主要技術(shù)環(huán)節(jié)包括：供、受體的同期發(fā)情、供體的超數(shù)排卵、配種、供體胚胎收集、受體胚胎移植等。

2.1 胚胎移植前期準(zhǔn)備工作

選擇的供體母羊應(yīng)具有較高的生產(chǎn)性能和遺傳育種價(jià)值；供、受體羊應(yīng)該繁殖機(jī)能正常，體況良好；年齡 2.5～6歲為宜，青年羊至少應(yīng)在 1.5歲以上，且是空懷母羊。受體與供體羊準(zhǔn)備數(shù)量在 10∶1左右。

在胚胎移植前 2 個(gè)月，要對(duì)選擇好的供、受體羊進(jìn)行集中飼養(yǎng)調(diào)理。

在選擇供體母羊的同時(shí)，也要注意與配公羊的選擇，因?yàn)楹笳咭矠槭芫烟峁﹥?yōu)良的遺傳基因。除認(rèn)真檢查與配公羊精液品質(zhì)外，還要給予全價(jià)飼料，特別是蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)飼料的供給，在配種季節(jié)未曾到來之前，就應(yīng)給予補(bǔ)飼。

2.2 供、受體同期發(fā)情

供、受體在發(fā)情周期的任意一天同時(shí)放置氟黃體酮海綿栓或埋植CIDR，埋植14d撤栓，受體羊撤栓同時(shí)注射200～300單位孕馬血清，第1次發(fā)情時(shí)肌肉注射促排3號(hào)。

2.3 供體羊超排

供體羊在撤栓前48h開始減量肌肉注射垂體促卵泡素，間隔12h注射1次，連續(xù)6次遞減注射，注射總劑量為200～300單位。在第4次注射垂體促卵泡素時(shí)同時(shí)注射氯前列烯醇0.1mg/只。發(fā)情后肌肉或靜脈注射促排3號(hào)75～100單位，或促性腺激素類似物50～75μg。應(yīng)用超排技術(shù)可使羊每次排卵由1～4個(gè)增加到6～20個(gè)或者更多。

2.4 供體羊發(fā)情鑒定及配種

所有供體羊撤栓后24h開始用性欲旺盛的公羊進(jìn)行早、晚試情，每次試情時(shí)間不少以60mn，連續(xù)3d試情。內(nèi)窺鏡子宮角輸精，可在發(fā)情后48～56h進(jìn)行一次性輸精，內(nèi)窺鏡觀察卵巢黃體情況，對(duì)卵巢有反應(yīng)一側(cè)子宮角進(jìn)行輸精處理，輸入精液量為原精0.2ml。

2.5 供體胚胎收集

以發(fā)情開始的第1d記為0d，所有供體在發(fā)情的第7d用手術(shù)法經(jīng)子宮角回收胚胎。為防止手術(shù)時(shí)供體腹壓過大而造成手術(shù)困難和生殖器官的損傷術(shù)前24h將供體、受體單圈飼養(yǎng)，斷食，以達(dá)到空腹的目的。手術(shù)器械用0.15%新吉爾滅溶液浸泡消毒30min進(jìn)行常規(guī)消毒。

術(shù)前將供體保定在移植車上，全身麻醉，術(shù)部剪毛、消毒，術(shù)前將羊頭低仰臥體位45°～60°角左右斜倒立保定，手術(shù)部位選在乳房下3～4cm腹中線處，常規(guī)消毒、切開腹腔、將子宮角牽引出腹腔，觀察卵巢反應(yīng)及黃體數(shù)量，對(duì)卵巢有反應(yīng)側(cè)的子宮角進(jìn)行沖胚處理。在子宮角基部用鈍鉗刺透子宮壁，插入沖卵導(dǎo)管，向沖卵導(dǎo)管內(nèi)打入適量氣體，直到?jīng)_卵管的氣囊膨脹到適宜的程度保證沖卵液回流通暢，在子宮體與輸卵管結(jié)合部插入套管針，抽出針芯，由此向子宮體內(nèi)注入沖卵液20～25ml，在補(bǔ)注入空氣5～10ml，可保證胚胎的正常回收。用培養(yǎng)皿接受回流的沖卵液，最后用手指輕輕擠壓子宮體，使沖卵液盡量回收完全，然后將沖卵導(dǎo)管氣囊放氣，子宮體基部縫合。用同樣的方法沖另一側(cè)子宮角，之后將子宮角送回腹腔，用生理鹽水沖洗子宮。采用常規(guī)手術(shù)法縫合、消毒創(chuàng)口，術(shù)后注射青鏈霉素等消炎藥物，防止創(chuàng)口感染。

回收的沖卵液立即送入室溫在21℃～26℃的無菌室進(jìn)行胚胎鏡檢，吸取合格胚胎，根據(jù)其形態(tài)對(duì)質(zhì)量進(jìn)行評(píng)判，將A、B級(jí)胚胎1h后移植到卵巢上黃體發(fā)育好的受體羊的子宮角內(nèi)。

2.6 胚胎移植

受體羊的移植過程同樣采用手術(shù)法，受體羊除了不用麻醉外，術(shù)前準(zhǔn)備和手術(shù)過程同供體相同。受體羊在乳房下3～5cm左右腹中線兩側(cè)各做一切口，借助腹腔內(nèi)窺鏡和腸鉗的翻動(dòng)，觀察卵巢上的黃體情況，將判定合格受體羊黃體側(cè)的子宮角牽出腹腔外，用鈍針在子宮角前端無血管處扎孔，以裝有合格胚胎的移植針穿過扎孔處進(jìn)入子宮角內(nèi)腔中，推入胚胎，完成移植。將子宮角放入腹腔，兩側(cè)切口各做一針常規(guī)縫合、消毒。

隨著胚胎移植技術(shù)的日臻完善，綿羊胚胎移植技術(shù)的研究已經(jīng)逐步由試驗(yàn)研究向商業(yè)化生產(chǎn)階段轉(zhuǎn)變。這一技術(shù)在生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用，充分發(fā)揮了優(yōu)良綿羊品種的遺傳優(yōu)勢(shì)，較快地實(shí)現(xiàn)了在短時(shí)間內(nèi)提高綿羊的良種化程度，不僅促進(jìn)養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展，也為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)繁榮帶來廣闊前景。對(duì)綿羊胚胎移植產(chǎn)業(yè)化進(jìn)行研究，必將對(duì)肉羊新品種的引進(jìn)和肉羊生產(chǎn)開發(fā)產(chǎn)生積極的推動(dòng)作用。