徐華英 劉 萍

（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院，上海 200032）

·綜 述·

中醫(yī)藥抗血管內(nèi)皮損傷作用的研究進(jìn)展

徐華英 劉 萍△

（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院，上海 200032）

血管內(nèi)皮損傷是動脈粥樣硬化進(jìn)程中的始動環(huán)節(jié)，在病變的發(fā)生發(fā)展中貫穿全程。因此，改善血管內(nèi)皮功能對于冠心病的研究而言具有非常重要的意義。中醫(yī)藥在血管內(nèi)皮功能的修復(fù)方面效果顯著，本文總結(jié)近幾年從動物模型、體外模型等方面研究中醫(yī)藥對于內(nèi)皮損傷的修復(fù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道進(jìn)展。

血管內(nèi)皮損傷 中醫(yī)藥 研究進(jìn)展

血管內(nèi)皮細(xì)胞（VEC）是機(jī)體的血液流動與血管壁組織的屏障，為血液流動提供光滑表面，同時也是代謝及內(nèi)分泌器官，在調(diào)節(jié)血管內(nèi)物質(zhì)交換，釋放和合成多種血管活性物質(zhì)等方面發(fā)揮重要效應(yīng)。血管內(nèi)皮損傷作為動脈粥樣硬化的起始因素，與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的病情發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。自從1973年ROOS教授提出的“損傷反應(yīng)”學(xué)說開始，對于血管內(nèi)皮方面的研究不斷深入，現(xiàn)已成為研究冠心病動脈粥樣硬化方面的不可分割的一部分。從不同的內(nèi)皮損傷模型中研究內(nèi)皮損傷相關(guān)機(jī)制，藥物的篩選，以成為研究的熱點(diǎn)。傳統(tǒng)的中醫(yī)藥通過多靶點(diǎn)、多途徑，以抗氧化應(yīng)激、調(diào)脂、抗炎等方面干預(yù)血管內(nèi)皮損傷效果顯著。近年的研究中，中醫(yī)藥在研究血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷修復(fù)方面，從動物模型、體外細(xì)胞模型等方面作為切入點(diǎn)的研究頗多，現(xiàn)將近幾年的新進(jìn)展方面做一概述。

1 單味中藥或成分

在體的研究可以較好地反應(yīng)藥物在體內(nèi)整體水平的影響，觀察形態(tài)學(xué)及病理過程，在探索其機(jī)制及有效治療途徑方面等具有關(guān)鍵作用。近年中藥的冠心病相關(guān)動物模型研究中，高脂飲食誘導(dǎo)的ApoE-/-小鼠模型較多見。單味藥及成分在動物模型的近幾年研究表明，三七總皂苷［1］可以降低ox-LDL水平，下調(diào)主動脈CD40、VCAM-1的基因表達(dá)，改善內(nèi)皮結(jié)構(gòu)。紅景天苷［2］具有減少主動脈脂質(zhì)沉積作用，改善主動脈舒張功能紊亂，可以促進(jìn)Akt磷酸化，增加ApoE-/-小鼠肝臟AMPK的磷酸化表達(dá)，調(diào)節(jié)血脂和激活eNOS來改善血管內(nèi)皮的功能。薤白的提取物［3］發(fā)揮了NO升高，ET降低，GRP78蛋白表達(dá)下調(diào)，提示了薤白提取物具有防止血管內(nèi)皮損傷、保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能，機(jī)制上具有抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。大葉冬青葉［4］（苦丁茶）提取物干預(yù)后的治療組TC、TG、LDL-C降低、HDL-C水平升高，ICAM-1表達(dá)下調(diào)，在主動脈內(nèi)膜，在形態(tài)學(xué)方面具有明顯改善，尤以高劑量組具有明顯的減輕內(nèi)皮細(xì)胞損傷作用。葛根異黃酮可以調(diào)節(jié)血清E2、ET、NO水平，研究者認(rèn)為其類雌激素樣作用及對eNOS上調(diào)、ET下調(diào)是發(fā)揮內(nèi)皮保護(hù)效應(yīng)的機(jī)制。與前2組的基因敲除加高脂誘導(dǎo)不同，后3組實(shí)驗(yàn)的內(nèi)皮損傷模型誘導(dǎo)方式為慢性束縛法加3%蛋氨酸飲食誘導(dǎo)型、維生素D加高脂飲食誘導(dǎo)型、去卵巢模型等方法，雖然誘導(dǎo)的評價標(biāo)準(zhǔn)不同，但肯定的說明中藥抗血管內(nèi)皮損傷的作用，可以調(diào)控血脂、形態(tài)學(xué)方面的改善以及抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等不同的效應(yīng)來保護(hù)血管內(nèi)皮。

體外的血管內(nèi)皮損傷模型可在排除干預(yù)因素前提下的闡明內(nèi)皮損傷機(jī)制，其在研發(fā)及篩選藥物方面具有重大意義。如最常用的損傷誘導(dǎo)模型因素ox-LDL以及H2O2、末端晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）、同型半胱氨酸（Hcy）、血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、細(xì)菌脂多糖（LPS）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等［5］。其中ox-LDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮損傷模型是最常用的方法之一。多種中藥的活性成分在各種誘導(dǎo)因子作用后的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷方面，具有明確的抑制作用。近幾年在細(xì)胞模型方面的研究中，單味中藥相關(guān)的研究繁多，有很多單體或改良劑型均具有保護(hù)血管內(nèi)皮的功能，如瓜蔞皮注射液［6］、苦碟子注射液［7］（缺血缺氧誘導(dǎo)模型），皂莢中提取的刺囊酸［8］、澤瀉提取物［9］（ox-LDL誘導(dǎo)的模型）等。此外，丹參中的丹參酮ⅡA［10-12］在ox-LDL、高糖、Hcy等因素誘導(dǎo)下均表現(xiàn)有血管內(nèi)皮的保護(hù)作用。其可能參與的機(jī)制有：1）類雌激素樣保護(hù)效應(yīng)；2）開放ATP敏感鉀通道、增加NO、抑制氧化應(yīng)激；3）下調(diào)GRP78基因表達(dá)水平、減緩內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激來抗血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡等相關(guān)。可以推測，單味中藥單體或許也存在多靶點(diǎn)效應(yīng)機(jī)制。

2 中藥復(fù)方

2.1 益氣活血類復(fù)方 動物實(shí)驗(yàn)表明，加減活絡(luò)效靈丹［13］（丹參、三七、乳香、沒藥）在ApoE-/-小鼠模型中，可以在形態(tài)學(xué)方面小鼠主動脈中斑塊面積減少、脂質(zhì)沉積減輕、管壁受損減少，同時血清TGF-β表達(dá)下調(diào)、SR-BI降低，TG、LDL-C、CHO等血脂指標(biāo)下降，以此減輕炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)血脂等效應(yīng)來保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞。腦泰方［14］（黃芪、川芎、地龍）可以升高SOD表達(dá)，下降MDA及ox-LDL、LOX-1、VCAM-1等表達(dá)水平，故推斷其可能的機(jī)制是增強(qiáng)抗氧化能力。加味丹參飲［15］（丹參、檀香、當(dāng)歸、生地黃、川芎、赤芍、紅花）能降低血清C反應(yīng)蛋白水平、下調(diào)VEGF、MMP-9、bFGF表達(dá)，降低ET，升高NO，同時在形態(tài)學(xué)上能穩(wěn)定斑塊及改善內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及功能。細(xì)胞研究方面，當(dāng)歸補(bǔ)血湯［16］（當(dāng)歸、黃芪）可能通過調(diào)節(jié) VEGF與 VEGFR和sVEGFR兩種受體結(jié)合的途徑，促進(jìn)缺氧血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。補(bǔ)陽還五湯［17］（黃芪、赤芍、川芎、桃仁、紅花、當(dāng)歸尾、地龍）可以增加SOD活性、減少ROS生成、改善線粒體結(jié)構(gòu)、逆轉(zhuǎn)線粒體膜電位下降，從而調(diào)節(jié)氧自由基引起的線粒體途徑介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。

2.2 補(bǔ)益肝腎類復(fù)方 實(shí)驗(yàn)及臨床實(shí)踐明確表明，某些補(bǔ)肝腎類藥物具有降血脂、抗氧化、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖、修復(fù)和保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞等方面來抗動脈粥樣硬化的功能。喻麗珍等［18］通過高脂血癥大鼠模型，來探討六味地黃丸（熟地黃、山萸肉、山藥、茯苓、澤瀉、牡丹皮）對血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)的可能機(jī)制，認(rèn)為其作用是降低血清ET、血漿TXA2，升高PGI2有關(guān)。另外，殷秋憶等發(fā)現(xiàn)，六味地黃丸藥物血清可以促進(jìn)損傷后的內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，起到Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表達(dá)下調(diào)和Bcl-2的mRNA和蛋白表達(dá)上調(diào)的作用［19］。錢星等發(fā)現(xiàn)，六味地黃湯抑制細(xì)胞凋亡途徑可能與降低細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度有關(guān)［20］。此外，潛陽育陰顆粒［21］（鬼針草、山萸肉、川牛膝、玄參、澤瀉、制首烏）可降低炎癥因子TNF-α、IL-6、VCAM-1等表達(dá)，其拮抗AngⅡ誘導(dǎo)所致的血管損傷效應(yīng)可能與fas、fasL、Caspase-3蛋白表達(dá)的下調(diào)及抑制NF-κB的激活有關(guān)。由此可見，補(bǔ)益肝腎類復(fù)方在抗血管內(nèi)皮損傷方面確實(shí)有積極效應(yīng)。

2.3 活血解毒類復(fù)方 活血解毒法基于活血化瘀藥物的抗血小板黏附與聚集等作用和清熱解毒類中藥的抗炎、耐缺氧、調(diào)控血脂等，可協(xié)同作用于動脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)的改善、清除毒素、降低炎性介質(zhì)、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，從而改善血管內(nèi)皮［22］。動物實(shí)驗(yàn)表明，解毒活血［23］（虎杖提取物+山楂提取物）配伍可以減少粥樣斑塊面積，改善血脂水平，其抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制與Bax、Caspase-9表達(dá)的下調(diào)和Bcl-2的上調(diào)相關(guān)。李娜等以四妙勇安湯（當(dāng)歸、玄參、金銀花、甘草）在H2O2誘導(dǎo)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞方面進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)四妙勇安湯50%醇提物可以加快細(xì)胞周期進(jìn)程以及降低ACE和ET含量，增加eNOS活性，可以降低血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率，也表明了活血解毒類復(fù)方的抗血管內(nèi)皮損傷作用［24］。

2.4 益氣祛濁類復(fù)方 臨床實(shí)踐已表明，聯(lián)合應(yīng)用祛濁類中藥對于改善冠心病預(yù)后方面具有獨(dú)到優(yōu)勢?；趧用}粥樣硬化過程中的血管內(nèi)脂質(zhì)沉積、管壁變厚、斑塊等病理損傷產(chǎn)物的堆積和全身系統(tǒng)的代謝內(nèi)環(huán)境改變而言，祛濁化痰類中藥的聯(lián)合應(yīng)用亦起到“攻補(bǔ)兼施”增加整體治療效應(yīng)。在動物實(shí)驗(yàn)中，丹蔞片［25］（黃芪、丹參、薤白、葛根、川芎、赤芍、瓜蔞皮、澤瀉等）可以改善血管內(nèi)皮功能，認(rèn)為其可能的機(jī)制是降低血脂水平、TXB2（血栓素B2），升高NO、6-Keto-PGFlα。補(bǔ)氣化痰方［26］（黃芪、瓜蔞、薤白、半夏）可以減輕ox-LDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，認(rèn)為其可能的機(jī)制是通過下調(diào)促凋亡蛋白Bax、上調(diào)抑凋亡蛋白Bcl-2的途徑而達(dá)到的。以上動物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，益氣祛濁化痰類中藥復(fù)方確實(shí)能改善血管內(nèi)皮功能，雖然其內(nèi)在的復(fù)雜機(jī)制仍需進(jìn)一步闡明，但對于冠心病的治療及內(nèi)皮損傷修復(fù)方面是十分有利的。

3 中醫(yī)藥之針刺及導(dǎo)引（非藥物療法）

周敏等在通過結(jié)扎法制作的心肌缺血大鼠模型做了針刺方面的研究，發(fā)現(xiàn)電針刺激手厥陰心包經(jīng)穴組在心肌的VEGF、HIF-1α表達(dá)升高，高于肺經(jīng)穴組，認(rèn)為對血管新生因子的促進(jìn)作用是抗心肌缺血損傷的可能機(jī)制，在一定程度上亦表明經(jīng)穴的效應(yīng)特異性，也對細(xì)胞的損傷修復(fù)提供了一定思路［27］。八段錦作為中醫(yī)藥的導(dǎo)引范疇，與氣功、太極拳等方術(shù)一樣具有養(yǎng)生保健效果，而且可操作性較強(qiáng)。鄭麗維等以八段錦運(yùn)動來干預(yù)老年原發(fā)性1級高血壓病患者人群的降壓效果，實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)藥物治療及護(hù)理的同時進(jìn)行八段錦運(yùn)動，研究發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組在收縮壓方面的下降程度優(yōu)于對照組，血清NO水平的升高也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并有血漿ET-1的升高，因此推斷降壓機(jī)制與血管內(nèi)皮細(xì)胞的改善呈正相關(guān)［28］。

4 討論與展望

綜上所述，中醫(yī)藥在血管內(nèi)皮損傷的調(diào)節(jié)方面效果顯著，在改善內(nèi)皮細(xì)胞的抗氧化、抑制凋亡、改善內(nèi)皮結(jié)構(gòu)、調(diào)整相關(guān)因子等多途徑來最終達(dá)到了明確的治療效應(yīng)。上述研究也表明，血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷修復(fù)受多途徑、多靶點(diǎn)的調(diào)控；中醫(yī)藥在體內(nèi)、體外模型研究方面探討其內(nèi)在機(jī)制也取得了豐富的研究成果。但中藥的研究多集中于單味藥、模型的誘導(dǎo)、檢測，而對于中藥復(fù)方更深層次、多系列的研究較少。加強(qiáng)關(guān)于損傷模型建立的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，中藥復(fù)方在研究中的規(guī)范化，在基因、分子水平上深層次探討，可以更好地詮釋中醫(yī)藥的有效性及科學(xué)性，為中醫(yī)藥治療抗動脈粥樣硬化提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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10.3969/j.issn.1004-745X.2017.02.024

2016-06-23）

上海市中醫(yī)藥三年行動計(jì)劃項(xiàng)目（ZY3-CCCX-3-3039）

△通信作者（電子郵箱：liuping23@sina.com）