孫 思 王安波 楊 梅 汪 儉 劉文鋒

(黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心,貴州凱里 556000)

超高效液相色譜法在中獸藥檢測中的應(yīng)用

孫 思 王安波 楊 梅 汪 儉 劉文鋒*

(黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心,貴州凱里 556000)

中獸藥有著綠色天然、安全低毒、同時兼有營養(yǎng)及藥用雙重價值的優(yōu)點，廣泛地應(yīng)用于畜禽生產(chǎn)中。但中獸藥成分復(fù)雜、難以分離、基質(zhì)干擾大，而超高效液相色譜法以其超高靈敏度和選擇性的特點在中獸藥分析方法中越來越受到重視。本文綜述了超高效液相色譜法在中獸藥測定方面的應(yīng)用。

中獸藥 超高效液相色譜法 檢測

中獸藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)術(shù)指導(dǎo)畜禽疾病防治以及養(yǎng)殖下產(chǎn)生的應(yīng)用藥物，大部分來源于純天然植物。我國中藥材資源豐富，中獸藥的功效優(yōu)勢不斷被開發(fā)，對于中獸藥的研究越來越受到關(guān)注。目前，中獸藥的研究在我國仍屬于新興學(xué)科，對中獸藥重要理論、成分分析及現(xiàn)代藥理學(xué)應(yīng)用等的研究缺失較大，藥物成分相互干擾嚴(yán)重、分離時間長、分離難度大等問題尚不能完全解決。近年來，超高效液相色譜法（UPLC）因其快速、準(zhǔn)確的特點，被眾多中獸藥藥物分析者青睞，已成為中獸藥藥物分析中檢測藥品內(nèi)在質(zhì)量的關(guān)鍵。

1 中獸藥研究現(xiàn)狀

從20世紀(jì)90年代開始，西方學(xué)者不斷發(fā)掘出中草藥在治療人和畜禽疾病方面的潛力，在中藥開發(fā)上取得了巨大發(fā)展。美國研究者將紅豆杉中提取出的紫杉醇運用于動物腫瘤治療，效果良好，同時還從蘆薈中提取乙酰甘露聚糖作為雞馬立克氏病疫苗佐劑，現(xiàn)已投產(chǎn)；荷蘭學(xué)者從牛至草中提取的揮發(fā)油配置成牛至油預(yù)混劑可治療家禽痢疾并促進(jìn)生長。

我國啟動“無公害食品行動計劃”后，中獸藥的應(yīng)用范圍就在不停地調(diào)整，以適應(yīng)畜牧業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的要求。張素梅等[1]將黃芪散劑添加入斷奶仔豬飼料中，發(fā)現(xiàn)不僅可以預(yù)防仔豬疾病還可以提高生產(chǎn)效率；還有學(xué)者用黃芩、黃芪、石膏等制成二黃散，可抑制雞體內(nèi)法氏囊傳染性病毒；由白術(shù)、黨參等組成的催乳?？瞪⒖梢燥@著降低奶牛隱性乳腺炎的發(fā)病率。

2 UPLC概述

2004年，液相色譜技術(shù)突飛猛進(jìn)，儀器和色譜技術(shù)的創(chuàng)新顯著改進(jìn)了色譜的分離度、速度和靈敏度。在HPLC的基礎(chǔ)上將性能再次提高到一個新的層次，設(shè)計出了填有1.7μm小顆粒的色譜柱和能夠承受15000 psi流動相的壓力裝置，打造出了一個全新的液相色譜系統(tǒng)—UPLC。如今，UPLC應(yīng)用極為廣泛，其中包括化學(xué)化工、醫(yī)藥學(xué)、生物、環(huán)境及食品等領(lǐng)域。近年來，許多國家都在研究開發(fā)新的檢測技術(shù)，進(jìn)一步擴大了UPLC在中藥分析檢測生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。

3 UPLC在中獸藥檢測中的應(yīng)用

UPLC克服了早期高效液相色譜法速度慢，柱效低的缺陷，更能適應(yīng)中藥、中成藥的多樣性、復(fù)雜性、分離難度大等分析特點，因而UPLC在中藥化學(xué)成分分析方面得到了迅速的推廣，成為一種非常有效和普遍適用的中藥分析方法，對于UPLC在中獸藥檢測方面的應(yīng)用更是迅速發(fā)展。

UPLC更能準(zhǔn)確、高效地測定中獸藥的含量。謝進(jìn)等[2]比較了UPLC與HPLC在測定二黃散中不同小檗堿時的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)UPLC整個測定只要3 min，進(jìn)樣量只需0.5 μl，得到的峰型完整、分離度好，縮短了樣品檢測時間，減少了流動相的消耗，在穩(wěn)定性及重復(fù)性上均優(yōu)于HPLC法。吳立蓉等[3]采用UPLC的方法檢測了復(fù)方丹參片中皂苷類的成分，結(jié)果表明，相較于HPLC法，UPLC極大地縮減了檢測時間，僅在12 min內(nèi)就可以將中4種活性成分完全分離，提高了分析效率，可代替常規(guī)HPLC法進(jìn)行檢測。

UPLC還可用于中獸藥制劑中非法添加化學(xué)物質(zhì)及抗生素的檢測。賈振民等[4]利用UPLC檢測中獸藥制劑中9種氟喹諾酮類藥物，回收率為76.77%～90.31%，RSD為0.45%～4.86%，可實現(xiàn)完全分離，定量測定準(zhǔn)確，重現(xiàn)性較好；還同時建立了中獸藥制劑中檢測四種喹噁啉類藥物的方法，結(jié)果滿意，適合中獸藥制劑中喹噁啉類藥物的測定；吳荔琴等[5]通過UPLC檢測了止痢散、白頭翁散、蒼術(shù)香連散三種中藥中隱形存在的氟苯尼考，回收率＞95%、定量準(zhǔn)確。李應(yīng)超等[5]采用UPLC檢測了銀翹散、健胃散、止痢散、白頭翁散、荊防敗毒散及蒼術(shù)香連散六種中藥違規(guī)添加的替米考星和泰樂菌素，其試驗所建立的UPLC檢測方法操作簡單、快速而準(zhǔn)確，適合大批量檢測可從源頭杜絕由于大環(huán)內(nèi)酯類藥物違規(guī)添加引起的動物源食品安全問題。

4 小結(jié)

自我國2005年頒布第一版藥典，液相色譜法就逐漸成為中藥檢測中最常用的分析手段。中獸藥不僅可以治療疾病、促進(jìn)動物生長，又不會產(chǎn)生危害人體健康的藥物殘留，必將在養(yǎng)殖業(yè)中得到更大范圍的推廣與應(yīng)用。隨著各種先進(jìn)檢測儀器與方法、聯(lián)用檢測技術(shù)及自動化技術(shù)不斷改進(jìn)，UPLC法會以更高效高敏感度和自動化等優(yōu)點在中藥成分分離與測定中發(fā)揮其他分析方法無與倫比的優(yōu)勢。

[1] 張素梅，崔保安，楊明凡，等.黃芪散劑與顆粒劑對仔豬生長性能及免疫力影響的比較[J].畜牧與獸醫(yī)，2006，38（8）：46-47.

[2] 謝進(jìn)，韓晉，張詩龍，等.黃連不同部位5種生物堿的含量比較[J].解放軍醫(yī)藥學(xué)報，2011，27（2）：124-127.

[3] 吳立蓉，王秀鳳，高衛(wèi)東，等.超高效液相色譜法快速測定復(fù)方丹參片中皂苷成分的含量[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報，2016，32（1）：32-35.

[4] 賈振民，陳薔，宋志超，等.中獸藥制劑中氟喹諾酮類藥物檢測方法的研究[J].2010，37（10）：190-193.

[5] 劉丹，齊雙輝，馬海英.UPLC在中藥組分分析及代謝組學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中國藥房，2016，（7）：973-975.

孫思（1989-），女，技術(shù)員，從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。

劉文鋒（1969-），男，農(nóng)業(yè)推廣研究員，從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。