嚴(yán)嘉耕

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安 271000）

禽傳染性法氏囊病的研究進(jìn)展

嚴(yán)嘉耕

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安 271000）

傳染性法氏囊?。↖nfectious Bursal Disease，IBD）是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）所規(guī)定的需通報(bào)的疾病之一[1]。IBD發(fā)病率高，病程短，危害性大，嚴(yán)重威脅養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，因此，預(yù)防和治療IBD對(duì)禽類養(yǎng)殖有著重要意義，本文從IBD的生物學(xué)特性、培養(yǎng)方式、臨床特征表現(xiàn)以及對(duì)該病的預(yù)防措施等研究進(jìn)展做了綜述，以期為相關(guān)人員在認(rèn)識(shí)和了解IBD上提供一定幫助。

傳染性法氏囊病 生物特性 防控

1962年，IBD發(fā)現(xiàn)于在美國特拉華州甘保羅，故又名甘保羅?。℅umboro disease），現(xiàn)除新西蘭外已全球流行[2]。IBD具有法氏囊高度腫大或者萎縮，腎臟高度腫大及尿酸鹽沉積，法氏囊，腿肌，胸肌，腺胃和肌胃交界處出血等特病理特性。法氏囊是禽類特有的中樞免疫器官，是B細(xì)胞成熟的場所，被誘導(dǎo)分化成熟的B細(xì)胞受到抗原刺激后可轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，參與特異性體液免疫。IBD主要侵害3-12周齡的雛雞和青年雞，會(huì)導(dǎo)致法氏囊壞死和萎縮，進(jìn)而使幼齡雞法氏囊未成熟的B淋巴細(xì)胞大量被破壞，形成嚴(yán)重的免疫抑制，從而易出現(xiàn)繼發(fā)感染和免疫失敗，帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，因此，該病受到了養(yǎng)殖業(yè)的高度重視，同時(shí)也成為學(xué)術(shù)界關(guān)注和研究的熱點(diǎn)，本文從IBD的生物學(xué)特性、培養(yǎng)方式、臨床特征表現(xiàn)以及對(duì)該病的預(yù)防措施等研究進(jìn)展做了綜述。

1 IBD的生物學(xué)特性

1.1 病原學(xué)

傳染性法氏囊病的病原為雙RNA病毒科（Birnaviridae）禽雙RNA病毒屬（Avibirnavirus）的傳染性法氏囊病毒（Infectious Bursal Disease virus，IBDV）。病毒含單層衣殼，無囊膜，病毒粒子直徑為58～60nm，含有32個(gè)殼粒。傳染性法氏囊病毒基因組由A、B兩個(gè)片段的雙股RNA構(gòu)成。其中A片段有兩個(gè)編碼框（ORF），短的編碼非結(jié)構(gòu)蛋白VP5，在病毒出芽中起作用；長的編碼多聚蛋白，能被水解加工為結(jié)構(gòu)蛋白VP2，VP3和VP4。其中，VP2和VP3是傳染性法氏囊病毒的主要蛋白，分別占蛋白總量的51%和40%，能誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體。研究VP2和VP3的特性對(duì)于揭示傳染性法氏囊病毒的致病機(jī)制具有重要的指導(dǎo)意義，如雞源Hsp90a與傳染性法氏囊病毒VP2被證實(shí)存在相互作用和親和力，這為后續(xù)的疫苗研制等工作奠下堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。此外，傳染性法氏囊病毒在其基因表達(dá)上也成了研究熱點(diǎn)，如傳染性法氏囊病毒編碼序列的microRNA靶位點(diǎn)等。

1.2 血清類型

IBDV的血清型通常分為Ⅰ型（雞源性毒株）和Ⅱ型（火雞源性毒株）兩種類型，Ⅰ型是引起雞群發(fā)病的主要血清。研究發(fā)現(xiàn)，血清Ⅰ型毒株常常會(huì)出現(xiàn)免疫失敗，這可能與其亞型間存在較大差異有關(guān)，研究表明I型毒株的6個(gè)亞型（包括變異株）在抗原性的差異為10%～70%，而且不同毒株之間的毒性也差別很大，有的毒性超強(qiáng)，稱為超強(qiáng)毒（vvIBDV），這種大范圍的差異性急需我們尋找更穩(wěn)定和更安全的疫苗來控制相關(guān)疾病，需要我們對(duì)毒株做更深入的研究，從而為我們制備相關(guān)抗病毒藥物或疫苗提供重要的理論依據(jù)。

1.3 生物毒性

傳染性法氏囊病毒十分頑強(qiáng)，能夠在惡劣的環(huán)境中長期存活，研究發(fā)現(xiàn)IBD病毒從雞舍被清除后2～4個(gè)月內(nèi)仍能夠使易感活體誘發(fā)該病，并且在50℃～60℃的溫度下，仍存在感染活性，在70℃的條件下經(jīng)過30min以上才可被滅活。該病毒的這種頑固特性也給禽舍的后期清理帶來了困難。

1.4 流行病學(xué)

傳染性法氏囊病毒能感染雞，火雞，北京雞，番雞和珍珠雞等，主要感染2～15周的幼齡雞，其中3～6周齡雞最易感，發(fā)病后病死率較高。成年雞一般呈隱性感染。本病能通過糞便和大量排物，污染飼料、飲水、墊料、用具、人員等，以糞-口途徑傳播和感染。本病呈一過性感染，傳播迅速，當(dāng)雞舍內(nèi)發(fā)現(xiàn)有被感染雞時(shí)，可迅速傳播至全群。其潛伏期通常為2～3d，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）制定的《陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典（Terrestrial Animal Health Code）》將其潛伏期定為7d[3-4]。發(fā)病雞通常在感染后第3d開始死亡，隨后病死率急劇上升，5～7d達(dá)到高峰，約8～9d停息。本病常與大腸桿菌病，新城疫，雞馬立克病混合感染，使雞群病死率升高。

2 IBD病毒的培養(yǎng)

2.1 雞胚培養(yǎng)

雞胚培養(yǎng)是IBD病毒的培養(yǎng)方式之一，常用的接種方式有絨毛尿囊膜（CAM）接種、卵黃囊接種和尿囊腔接種，其中CAM接種效果最佳，通過CAM接種IBD病毒后，3～5d即可誘發(fā)雞胚死亡。通過檢測觀察發(fā)現(xiàn)，死亡后的雞胚胎全身水腫，在頭和趾部會(huì)有充血現(xiàn)象出現(xiàn)，并且在肝部會(huì)出現(xiàn)斑駁狀壞死現(xiàn)象，而變異株接種誘發(fā)的感染僅導(dǎo)致了雞肝壞死和脾腫大，還沒有使雞胚死亡。

2.2 細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)也是基礎(chǔ)研究中的一項(xiàng)重要研究手段，IBD病毒也可以在雞胚和法氏囊原代細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)，一些禽源和哺乳動(dòng)物源傳代細(xì)胞系也能作為IBD病毒的生活條件。IBD病毒感染雞源細(xì)胞后，當(dāng)該病毒穩(wěn)定并把感染的雞源細(xì)胞傳代2～3次，鏡下觀察就可以清楚地發(fā)現(xiàn)細(xì)胞發(fā)生病變，有蝕斑形成。

3 臨床癥狀

IBD在初期主要表現(xiàn)為雞啄泄殖腔，并且感染雞會(huì)出現(xiàn)羽毛松亂，少食，怕冷，萎蔫等癥狀，隨后出現(xiàn)腹瀉，泄殖腔周圍被稀糞嚴(yán)重污染等癥狀。嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)垂頭、閉目。后期體溫低，嚴(yán)重脫水，極度虛弱，最后死亡。

法氏囊作為傳染性法氏囊病毒侵害的靶器官，其病變具有證病意義。法氏囊出現(xiàn)水腫，出血，體積增大，感染4d后通常比正常重兩倍，漿膜表面覆蓋有膠凍樣淡黃色滲出物，嚴(yán)重者呈紫葡萄狀。感染5d后法氏囊內(nèi)膜會(huì)出血，并且嚴(yán)重者的法氏囊內(nèi)會(huì)有渾濁黏稠的滲出物出現(xiàn)。不僅如此，感染者在腿部、胸部、肌胃和腺胃均會(huì)出現(xiàn)不同程度的出血，由于代謝系統(tǒng)障礙，血液中的尿酸會(huì)和鈣、鎂等離子結(jié)合形成尿酸鹽，尿酸鹽沉積會(huì)嚴(yán)重?fù)p害心、肝、腸、腎等器官，最終導(dǎo)致雞的死亡。

對(duì)于雞是否感染IBD，可以根據(jù)其臨床特性做出相應(yīng)判斷，表觀上可以根據(jù)雞的日常生活狀況判斷，病理學(xué)方面可以通過組織病理檢測和病毒分離鑒定以及血清檢測判定，其中，病毒分離鑒定也是最準(zhǔn)確的方式[5]。

4 防控措施

由于傳染性法氏囊病毒危害性極大，故此項(xiàng)工作非常重要，也是近年來研究的重點(diǎn)之一。

4.1 計(jì)劃免疫

IBD主要依靠體液免疫提供保護(hù)，活疫苗和油乳滅活苗都是可以使用的?；钜呙缃?jīng)常試用，但一些類型，尤其是中等偏強(qiáng)毒力型，有造成嚴(yán)重?fù)p害和免疫抑制的可能。滅活疫苗成本較高，故常用于種雞群。這兩種疫苗都經(jīng)常與新城疫等疾病的疫苗結(jié)合。

除此之外，近年研究中還有通過基因克隆技術(shù)構(gòu)建形成的新疫苗，如將具有保護(hù)特性的目的抗原基因片段克隆到表達(dá)載體上，然后將重組質(zhì)粒導(dǎo)入宿主細(xì)胞，通過表達(dá)相應(yīng)抗原，誘發(fā)宿主產(chǎn)生免疫應(yīng)答形成相應(yīng)抗體，進(jìn)而誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性重組疫苗。此外還有重組活病毒載體疫苗，重組亞單位疫苗等方式防控。

4.2 中藥或天然提取物

近年來已有研究轉(zhuǎn)向由復(fù)方連翹、蜂膠提取物等中藥或天然提取物提高雞的免疫功能以進(jìn)行防治的思路。研究報(bào)道對(duì)于已感染傳染性法氏囊病毒的雞或者未感染雞都具有有效的免疫增強(qiáng)作用，這對(duì)于今后的預(yù)防方向具有指導(dǎo)意義。

5 結(jié)語

近年來，雞肉作為我國肉類消費(fèi)的主要產(chǎn)品，人們對(duì)其安全性和質(zhì)量的重視越來越高，隨著人們動(dòng)物食品安全意識(shí)的提高，人們也越發(fā)傾向于購買來自養(yǎng)殖條件較好的雞只。傳染性法氏囊病毒作為損害雞免疫能力的主要病原體之一，對(duì)雞肉質(zhì)量和培養(yǎng)有著重要的影響，預(yù)防與治療IBD是禽類養(yǎng)殖的注意條件之一。充分了解和研究IBD才能做到更好地治療和預(yù)防疾病，隨著技術(shù)的發(fā)展和對(duì)IBD研究的深入，相信對(duì)IBD的防控將會(huì)取得更大的進(jìn)步。

[1]陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2016：384-385.

[2]Lasher H N，Shane S M. Infectious bursal diseaes[J].World Poultry Science Journal，1994，50（2）：133-166.

[3]王秀云.雞傳染性法氏囊病病毒山東株的分離鑒定及免疫預(yù)防研究[D].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.