鐘莉莉，陳 雪，趙銀龍

(1.吉林省重大疾病分子與化學(xué)遺傳學(xué)重點實驗室-吉林大學(xué)第二醫(yī)院 研究中心，吉林 長春130041； 2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院骨科醫(yī)院；3.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科)

MicroRNA與卵巢癌關(guān)系的研究進展

鐘莉莉1，陳 雪2，趙銀龍3*

(1.吉林省重大疾病分子與化學(xué)遺傳學(xué)重點實驗室-吉林大學(xué)第二醫(yī)院 研究中心，吉林 長春130041； 2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院骨科醫(yī)院；3.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科)

MicroRNA(miRNA)是一類非編碼單鏈小分子RNA，由內(nèi)源基因編碼，長度約為20-25個核苷酸，因此又被稱為微小RNA。MicroRNA能夠與特定的mRNA結(jié)合，引起對應(yīng)靶mRNA的降解，從而抑制其正常的翻譯過程，達到基因轉(zhuǎn)錄后水平表達調(diào)控的目的。卵巢癌是常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，該病發(fā)病率和致死率極高，且起病隱匿，當(dāng)患者出現(xiàn)典型癥狀時大多已發(fā)展為晚期，嚴(yán)重威脅著全世界女性的生命健康。近年來，大量的研究表明MicroRNA與卵巢癌之間有著密不可分的關(guān)系，本文就近些年MicroRNA與卵巢癌關(guān)系的研究進展做一綜述。

1 MicroRNA概述

MicroRNA廣泛存在于真核生物中，是一類由內(nèi)源基因編碼的長度約為19-22個核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA[1]。MicroRNA的生物合成需要經(jīng)歷兩個過程：(1)初期miRNA編碼基因轉(zhuǎn)錄生成miRNA初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(pri-miRNA)，pri-miRNA很快被一種核糖核酸酶—Drosha酶剪切加工成為含有60-70個核苷酸的miRNA前體(pre-miRNA)；(2)pre-miRNA由胞核轉(zhuǎn)運至胞質(zhì)中，在另一種核糖核酸酶-Dicer酶以及解旋酶和ATP的共同作用下剪切加工成含有20-25個核苷酸的成熟miRNA[2]。MicroRNA可以與靶基因以互補配對原則相結(jié)合，降解相應(yīng)的目標(biāo)mRNA，抑制其正常翻譯成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，以達到負(fù)性調(diào)控靶基因的目的，目前已證實MicroRNA廣泛參與細(xì)胞的發(fā)育、分化、代謝、衰老、防御等過程，對人類的生命活動起著積極作用[3]。

首個被確認(rèn)的MicroRNA是在研究線蟲的過程中被發(fā)現(xiàn)的。1993年，Lee等在研究線蟲發(fā)育缺陷時發(fā)現(xiàn)了lin-4，它可以通過部分互補結(jié)合到目的mRNA的3’非編碼區(qū)(3’UTRs)，以一種特定方式誘發(fā)蛋白質(zhì)翻譯抑制，從而阻遏蛋白質(zhì)合成，調(diào)控線蟲的發(fā)育進程[4]。隨后，與人類相關(guān)的MicroRNA陸續(xù)被廣大學(xué)者發(fā)現(xiàn)和認(rèn)識。近年來，隨著人們對MicroRNA研究的不斷深入，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)MicroRNA參與調(diào)控人類約30%以上基因的轉(zhuǎn)錄后表達調(diào)控，其不僅與細(xì)胞的發(fā)育、分化、代謝、衰老、防御等生命活動相關(guān)，而且還與腫瘤有著密切的關(guān)系[5]。

2 MicroRNA與腫瘤關(guān)系的研究

腫瘤是人類的重大疾病之一，其發(fā)生機制復(fù)雜，影響因素眾多，且易轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，治療相對困難，一直是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的重點和難點。近些年，MicroRNA的發(fā)現(xiàn)給腫瘤的研究帶來了新的啟示。人們發(fā)現(xiàn)：MicroRNA的異常表達與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，發(fā)揮類似于抑癌基因和癌基因的作用

2.1MicroRNA的抑癌作用

2002年，Calin等[6]在慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)的研究中首次發(fā)現(xiàn)了MicroRNA的異常表達與腫瘤的相關(guān)性，研究發(fā)現(xiàn)：在大多數(shù)的CLL細(xì)胞中同時伴有miRNA15，miRNA16不同程度的表達下調(diào)或缺失，因此推測miRNA15，miRNA16可能起到了一個腫瘤抑制基因的作用，與血液腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，這一發(fā)現(xiàn)為MicroRNA與腫瘤關(guān)系的研究帶來了新的啟示。隨后，Kumar等[7]在非小細(xì)胞肺癌的研究中證實let-7家族miRNA的表達均發(fā)生明顯降低，從而削弱了其對K-RAS基因的阻斷作用，促進了肺癌的發(fā)生，發(fā)展過程，這說明在非小細(xì)胞肺癌中，let-7家族miRNA同樣起到了腫瘤抑制基因的作用。2017年，Yan等[8]在研究miRNA-375與腫瘤關(guān)系的實驗中發(fā)現(xiàn)，在肝細(xì)胞癌、胃癌、食管鱗狀細(xì)胞癌、頭頸部鱗癌、宮頸癌、肺癌、胰腺癌、結(jié)直腸癌、黑色素瘤中，miRNA-375的表達均發(fā)生不同程度的下調(diào)，靶向調(diào)節(jié)AEG-1，YAP1，IGF1R，PDK1等重要的原癌基因，起到抑癌作用。

2.2MicroRNA的促癌作用

人們在研究中發(fā)現(xiàn)：MicroRNA不僅有抑制癌癥發(fā)生發(fā)展的作用，有些MicroRNA還起著促進癌癥發(fā)生發(fā)展的作用。Iyevleva等[9]在研究乳腺癌的過程中發(fā)現(xiàn)miR-21,miR-10b,和miR-31的表達均呈不同程度增高，與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，起到類似于癌基因的作用。Chen HY等[10]研究發(fā)現(xiàn)miR-103與結(jié)直腸癌患者的轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后有直接關(guān)系。Martello等[11]的研究表明：在乳腺癌患者中高miR-107表達水平與患者的低生存率關(guān)系密切。隨后，Chen PS等[12]在研究MicroRNA與癌癥關(guān)系的過程中發(fā)現(xiàn)：miR-107的表達在人類多種腫瘤如胃癌、胰腺癌、結(jié)直腸癌和乳腺癌中均發(fā)生明顯增高，證明其在促進癌癥的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要作用。

3 MicroRNA與卵巢癌關(guān)系的研究

卵巢癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子宮內(nèi)膜癌及宮頸癌，但致死率卻居婦科腫瘤的首位。該病起病隱匿，當(dāng)患者出現(xiàn)典型癥狀時大多已發(fā)展為晚期，且伴有轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重威脅著女性的生命健康。和其他類型腫瘤一樣，卵巢癌MicroRNA表達也有其特殊的異常，研究者們一直在不斷的研究探索，并取得了顯著的成績，同時將其運用到實踐中，指導(dǎo)卵巢癌的診斷，治療及預(yù)后等臨床工作。

3.1MicroRNA與卵巢癌的診斷

卵巢癌的診斷一直是學(xué)術(shù)上的難題,大約70%以上的卵巢癌患者在確診時已屬進展期,而MicroRNA的研究成果為卵巢癌的診斷帶來了新的方法[13]。Resnick[14]等研究證實:血清中MicroRNA可作為卵巢癌的標(biāo)志物。研究者選擇了28個已經(jīng)確診但未經(jīng)過治療的卵巢癌患者的血清樣本，同時選取了15個正常人的血清樣本作為對照,用熒光陣列人MicroRNA面板和實時PCR檢測其中9個卵巢癌患者血清樣本和4個正常人血清樣本中的MicroRNA,結(jié)果發(fā)現(xiàn)21個MicroRNA在卵巢癌患者和正常人的血清之間存在表達差異。研究者在剩下的19個卵巢癌患者血清樣本和11個正常人血清樣本中用實時定量PCR方法檢測這21個MicroRNA,結(jié)果8個MicroRNA在卵巢癌樣本與正常樣本中存在表達差異,其中表達上調(diào)的有miR-21、miR-92、miR-29a、miR-93和miR-126，表達下調(diào)的有miR-99b,miR-127和miR-155。該研究結(jié)果充分證明了血清MicroRNA對卵巢癌的診斷意義。Zhou[15]等研究發(fā)現(xiàn)：尿液中MicroRNA也對卵巢癌的診斷存在著重要的意義。研究者收集并比較了39例卵巢漿液性腺癌患者、26例良性婦科疾病患者和30例健康對照者的尿液標(biāo)本，以研究尿液中MicroRNA在檢測卵巢漿液性腺癌中的臨床價值，MicroRNA微陣列數(shù)據(jù)表明：與良性婦科疾病組和健康對照組比較，卵巢漿液性腺癌患者樣本中miR-30a-5p的表達顯著上調(diào)，此外，研究者還發(fā)現(xiàn)經(jīng)過腫瘤切除手術(shù)后，該部分患者尿液中miR-30a-5p的表達顯著下降，提示尿miR-30a-5p來自卵巢漿液性腺癌組織，因此，尿液中miR-30a-5p的表達水平可以作為診斷卵巢漿液性腺癌的一項重要依據(jù)。

3.2MicroRNA與卵巢癌的治療

卵巢癌治療采用的是以手術(shù)為主的綜合治療方法，化療是其中一個重要的方法，而化療耐藥直接影響治療效果及患者預(yù)后。MicroRNA的深入研究有望對化療耐藥提供新的依據(jù)和解決方法。Yang等[16]在研究MicroRNA與卵巢癌治療的關(guān)系中發(fā)現(xiàn)：卵巢癌中miRNA-214的表達經(jīng)常異常上調(diào)，并能通過抵制靶基因PTEN，下調(diào)PTEN蛋白，激活A(yù)KT通路，抑制卵巢癌細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)癌細(xì)胞增殖和順鉑耐受，可見，miRNA-214在卵巢癌中發(fā)揮著重要作用，并可以成為卵巢癌治療的潛在靶點，下調(diào)miRNA-214的表達可以抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖和順鉑耐受，起到輔助卵巢癌治療的目的。Lan等[17]研究發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者miR-140-5P的表達顯著下降，負(fù)性調(diào)控其靶基因PDGFRA，使其表達增加，從而促進了卵巢癌細(xì)胞的增殖、遷移，研究還表明miR-140-5P表達下調(diào)可以降低卵巢癌細(xì)胞對順鉑的敏感性，由此可見，miR-140-5P可以成為卵巢癌治療的另一重要的潛在靶點，我們可以通過上調(diào)miR-140-5P的表達來抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖、遷移和增強其對順鉑的敏感性，從而達到抑制卵巢癌進展的治療目的。

3.3MicroRNA與卵巢癌的預(yù)后

大量研究表明：MicroRNA能夠預(yù)測卵巢癌患者的預(yù)后[18]。Gao等[19]分別收集了74例上皮性卵巢癌患者、19例交界性卵巢癌患者和50例健康對照組的血清樣本，通過實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)測定miR-200c和miR-141的表達情況，并通過Kaplan Meier曲線和log-rank檢驗來評估m(xù)iR-200c和miR-141對卵巢癌的預(yù)后價值。結(jié)果表明：miR-200c和miR-141在卵巢癌患者血清中的表達要明顯高于健康對照組，研究還發(fā)現(xiàn)早期卵巢癌患者與晚期卵巢癌患者相比，其血清的miR-200c相對表達水平呈下降趨勢，而miR-141水平則呈上升趨勢。miR-200c相對高表達的患者2年生存率高于相對低表達的患者，而miR-141則相反。這充分證明了miR-200c，miR-141是卵巢癌預(yù)后的重要預(yù)測指標(biāo)。Flavin等[20]發(fā)現(xiàn)在漿液性卵巢癌中，miRNA-29b表達改變，miRNA-29b在漿液性卵巢癌的下調(diào)，提示患者預(yù)后不良。Cong等[21]在卵巢癌的研究中發(fā)現(xiàn)MiRNA-498表達水平降低與卵巢癌患者的整體生存率和預(yù)后差有關(guān)。Wang等[22]研究表明miRNA-532-5p的表達是卵巢癌的又一預(yù)后預(yù)測標(biāo)志，miRNA-532-5p高表達提示患者預(yù)后和生存率比較理想。

4 展望

MicroRNA性質(zhì)穩(wěn)定，功能強大，與腫瘤關(guān)系密切，目前已成為醫(yī)學(xué)腫瘤研究領(lǐng)域中的熱點,但由于人們對MicroRNA的認(rèn)識歷史還比較短，對其自身的調(diào)控機制和靶基因的研究還處于初級階段，而其與腫瘤的關(guān)系，尤其與卵巢癌關(guān)系的研究更有待深入和拓展,我們相信，不斷更新的研究成果必然對卵巢癌的發(fā)生發(fā)展機制有更深入的剖析,從而更有效的指導(dǎo)臨床醫(yī)生對卵巢癌患者進行早期診斷,專業(yè)個體化治療和科學(xué)判斷預(yù)后,為卵巢癌患者帶來新的福音。

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*通訊作者

1007-4287(2017)11-2041-03

2017-01-15)