王 麗， 賈 安， 黃 濤，常麗萍

(黃河科技學(xué)院，河南鄭州 450006)

油菜花粉中揮發(fā)性成分的GC-MS分析

王 麗， 賈 安， 黃 濤，常麗萍

(黃河科技學(xué)院，河南鄭州 450006)

[目的]建立提取、分析油菜花粉中所含揮發(fā)油成分的方法。[方法]通過(guò)4種方法提取油菜花粉揮發(fā)性成分，分別為用蒸餾水作溶劑采用甲法(適合密度<1的揮發(fā)油)、乙法(適合密度>1的揮發(fā)油)對(duì)油菜花粉揮發(fā)油進(jìn)行提取，提取后的殘?jiān)儆脽o(wú)水乙醚進(jìn)行二次提取并濃縮，最后一種方法則用環(huán)已烷直接對(duì)油菜花粉揮發(fā)油進(jìn)行提取并濃縮，最后得到4個(gè)樣品，通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用方法對(duì)以上樣品進(jìn)行分析測(cè)定。[結(jié)果]甲法、無(wú)水乙醚及環(huán)已烷所提成分相對(duì)較多，且均為直鏈烷烴，如C27H56、C28H58。其中無(wú)水乙醚與環(huán)已烷所提取的浸膏得率相對(duì)較高，分別為8.55%、8.63%。[結(jié)論]環(huán)已烷提取揮發(fā)油的效果最好。油菜花粉中所含揮發(fā)油均為直鏈烷烴。

油菜花粉；揮發(fā)油；成分；GC-MS

花粉含有豐富的功能性物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、維生素、微量元素、黃酮類化合物[1]，這些物質(zhì)協(xié)同作用于機(jī)體，調(diào)節(jié)機(jī)體的多種功能，平衡體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)，增強(qiáng)新陳代謝，防止毛細(xì)血管通透性的障礙?；ǚ圻€能促進(jìn)內(nèi)分泌腺的發(fā)育，提高和調(diào)節(jié)內(nèi)分泌腺分泌，因此對(duì)由內(nèi)分泌功能紊亂引起的疾病有治療作用。油菜花粉中所含谷氨酸、脯氨酸等20多種氨基酸[2]，可以改善前列腺組織的血液循環(huán)，減輕水腫，緩解前列腺肥大引起的尿道梗阻[3]。油菜花粉能增強(qiáng)毛細(xì)血管強(qiáng)度、低血脂[4-5]，對(duì)治療糖尿病、貧血、便秘、防癌抗癌等均有療效[6]。為了更好地了解油菜花粉的藥效物質(zhì)，筆者對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行GC-MS分析、鑒定，以期為開發(fā)利用花粉資源提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器。WB-2002型水浴鍋(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；R-1002N型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；SHB-ⅢA型循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；KQ2200E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；DHG9076A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；1810-C型石英自動(dòng)雙重純水蒸餾器(金壇市晶玻實(shí)驗(yàn)儀器廠)；AL204型電子天平[梅特勒—托利多儀器(上海)有限公司]；XFB-500型高效中藥粉碎機(jī)(吉首市中誠(chéng)制藥機(jī)械廠)；Theremo DSQⅠⅠ 型氣質(zhì)聯(lián)用儀，賽默飛世爾科技中國(guó)有限公司)。

1.1.2 試材。油菜花粉，采自于新疆昭蘇縣。無(wú)水乙醚，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司；石油醚，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司；環(huán)己烷，天津市德恩化學(xué)試劑有限公司；試驗(yàn)所用水均為蒸餾水，所用試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 提取分離。該試驗(yàn)采用4種提取方法得到4個(gè)樣品。將采集的油菜花粉用XTB-500型高速中藥粉碎機(jī)打成粉末，過(guò)40目篩，精密稱定2份粉末分別為50.003 2、50.005 1 g，分別移入容量為500 mL的圓底瓶里，用4倍量的蒸餾水，分別用甲法、乙法揮發(fā)油提取器進(jìn)行提取，提取時(shí)間為1 h，過(guò)濾，再用4倍量蒸餾水進(jìn)行二次提取，時(shí)間為1 h。將提取器內(nèi)上下層分離，從而得到揮發(fā)油，在揮發(fā)油中加入少量無(wú)水硫酸鈉以去除夾雜的極少水分，再用無(wú)水乙醚進(jìn)行萃取，使其自然揮干、無(wú)乙醚味為止，甲法、乙法分別得到樣品1、樣品2。

上述2種方法提取后合并濾渣(110.003 2 g)，先用1.8倍量的無(wú)水乙醚回流提取，提取1 h，然后將剩余殘?jiān)偌?.5倍無(wú)水乙醚回流提取，時(shí)間為1 h，最后將剩余殘?jiān)儆?.5倍量無(wú)水乙醇回流提取30 min，過(guò)濾，將3次提取液合并，通過(guò)減壓濃縮成浸膏，即為樣品3。

精密稱定油菜花粉5.002 4 g，用100 mL環(huán)已烷回流提取，連續(xù)提取2次，每次提取時(shí)間為30 min，合并2次濾液，減壓濃縮得浸膏為0.431 7 g，浸膏用50 mL環(huán)已烷溶解，放兩小勺無(wú)水硫酸鈉，揮干后再用環(huán)已烷萃取，將萃取液移至小瓶中，自然揮干待測(cè)，即為樣品4。

1.2.2 樣品氣質(zhì)聯(lián)用的測(cè)定條件。Rts-Ms(30 mm×0.25 mm 0.25涂層)，高純He氣為載氣，進(jìn)樣溫度280 ℃，分流進(jìn)樣(10∶1)，進(jìn)樣量1.5 μL，載氣流速1.5 μL/min，程序升溫起始溫度40 ℃，保持1 min后以10 ℃/min升至250 ℃，保持20 min，質(zhì)譜接口250 ℃，E2源溫度250 ℃，電子轟擊能量60 ev，掃描范圍50～650 amu，全離子掃描，采集延遲3 min，歸一化法計(jì)算相對(duì)含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 各樣品浸膏率 樣品1、樣品2的浸膏得率分別為1.15%、0.08%。樣品2因?yàn)榈寐侍?，放棄該樣品。樣?的浸膏量為9.406 7 g，所得浸膏率為8.55%，樣品4的浸膏得率為8.63%。可見(jiàn)，水蒸氣蒸餾法提取效果不好，回流提取法效果更加明顯，且用環(huán)已烷試劑所提取的浸膏得率最多，因此環(huán)已烷的提取效果最好。

2.2 氣質(zhì)聯(lián)用分析 經(jīng)測(cè)定，用蒸餾水作溶劑的甲法所提浸膏樣品1、無(wú)水乙醚所提浸膏的樣品3、環(huán)已烷所提浸膏的樣品4的GC-MS分離總流程圖如圖1所示。由表1～3可見(jiàn)，從樣品1中分析鑒定出10個(gè)化學(xué)成分，其中相對(duì)含量最高的是9號(hào)所對(duì)應(yīng)的分子式為C28H58的化合物，其含量為31.57%；樣品3分析鑒定出6個(gè)化學(xué)成分，其中相對(duì)含量較高的是3號(hào)與5號(hào)，分別所對(duì)應(yīng)的分子式為C28H58、C29H60的化合物，含量分別為41.71%、46.00%；樣品4中分析鑒定出9個(gè)化學(xué)成分，其相對(duì)含量較高的分別是分子式為C28H58、C27H56的化合物，含量分別為38.36%、44.78%。由此可見(jiàn)，用蒸餾水作溶劑的甲法、無(wú)水乙醚及環(huán)已烷所提成分種類均較多，且均為直鏈烷烴。

表1 樣品1中各成分的GC-MS所得的相對(duì)含量

表2 樣品3中各成分的GC-MS所得的相對(duì)含量

圖1 樣品1(a)、樣品3(b)和樣品4(c)的GC-MS總離子流程圖Fig. 1 Total ion flow chart of sample 1 (a), sample 3 (b) and sample 4 (c) by GC-MS

3 小結(jié)

(1)從樣品浸膏率來(lái)看，水蒸氣蒸餾法提取效果不好，回流提取法效果更加明顯，且用環(huán)已烷試劑所提取的浸膏得率最多，為8.63%，因此環(huán)已烷的提取效果最好。

(2)用蒸餾水作溶劑的甲法、無(wú)水乙醚及環(huán)已烷所提成分種類均較多，且均為直鏈烷烴，如C27H56、C28H58。

表3 樣品4中各成分的GC-MS所得的相對(duì)含量

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GC-MS Analysis of Volatile Composition of Rape Pollen

WANG Li,JIA An，HUANG Tao et al

(College of Huanghe Science and Technology,Zhengzhou,Henan 450006)

[Objective] The research aimed to establish extraction and analysis method of volatile oil contained in rape pollen.[Method]By four different extraction methods of volatile components of rape pollen, using distilled water as solvent,respectively by A method (for volatile oil density less than 1), B method (for volatile oil density greater than 1) to extract the volatile oil of rape pollen,extraction residue was extracted with anhydrous ether for two times and concentrated,and finally a method was to directly with cyclohexane on the volatile oil of rape pollen extracted and concentrated, got 4 samples at last, through the GC-MS analysis method to determine the above samples.[Result]A method, anhydrous ether and cyclohexane by composition was relatively more, and for the straight-chain alkanes, such as C27H56, C28H58. The anhydrous ether and cyclohexane extract extraction rate of extractum was relatively high, respectively 8.55%, 8.63%.[Conclusion] Cyclohexane extraction of volatile oil have the best effect. Rape pollen contained in the volatile oil are alkanes.

Rape pollen;Volatile oil;Component;GC-MS

鄭州市國(guó)際合作項(xiàng)目(141PGJHZ541)。

王麗(1979- )，女，河南鄧州人，副教授，碩士，從事中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

2016-11-09

S 634.3

A

0517-6611(2016)34-0119-02