楊虹，曾福仁，劉劍侖，邱俊

（1.湖南省人民醫(yī)院腫瘤科，湖南長沙410005；2.廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科，廣西南寧530021）

ER、PR、HER-2、Ki-67與乳腺癌新輔助化療療效相關(guān)性分析

楊虹1，曾福仁1，劉劍侖2，邱俊1

（1.湖南省人民醫(yī)院腫瘤科，湖南長沙410005；2.廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科，廣西南寧530021）

目的探討雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、人表皮生長因子受體2（HER-2）、Ki67抗原（Ki-67）與乳腺癌新輔助化療療效相關(guān)性分析。方法采用免疫組織化學(xué)方法檢測81例乳腺癌新輔助化療前后ER、PR、HER-2、Ki-67的表達(dá)情況，并評估其與乳腺癌新輔助化療有效率的關(guān)系。結(jié)果81例患者中臨床RR 79%，術(shù)后pCR（9.9%），tpCR（6.2%）。達(dá)到pCR+tpCR率，（ER陰性）23.0%>（ER陽性）12.7%，（PR陰性）28.6%>（PR陽性）9.4%；ER、PR、HER-2及Ki67等與新輔助化療療效之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。新輔助化療前后ER、PR、HER-2的狀態(tài)改變不明顯，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而Ki67的表達(dá)數(shù)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其降低了Ki67的表達(dá)水平。結(jié)論乳腺癌新輔助化療可有效控制腫瘤，ER或PR陰性者較陽性者可獲得更高的pCR+tpCR率，Ki67可作為化療藥物敏感性和耐藥性的預(yù)測指標(biāo)。

乳腺癌；新輔助化療；ER；PR；HER-2；Ki-67

乳腺癌的新輔助化療（neoadjuvant chemotherapy，NAC）首次開展于20世紀(jì)70年代，由HAAGENSEN與STOUT最先提出這一概念。有研究認(rèn)為，NAC不但可以降低腫瘤分期，而且有助于判斷腫瘤細(xì)胞對化療藥物的敏感程度，進(jìn)而指導(dǎo)術(shù)后輔助化療[1-3]。本研究回顧分析2010年5月-2015年5月廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院81例原發(fā)乳腺癌NAC的療效，探討雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone-receptor，PR）、人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）、Ki67抗原（antigen Ki67）與NAC療效的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本組81例。年齡28～69歲，中位年齡46歲；根據(jù)AJCC第7版原發(fā)腫瘤TNM臨床分期，ⅡA期19例，ⅡB期27例，ⅢA期26例，ⅢB期6例，ⅢC期3例；浸潤性導(dǎo)管癌72例，浸潤性小葉癌5例，其他特殊類型乳腺癌4例。免疫組織化學(xué)法檢測ER、PR、HER-2及Ki67。ER、PR、HER-2：NAC前共檢測81例，前后均檢測74例（同標(biāo)本缺失7例）；Ki67：NAC前共檢測75例，前后均檢測為66例（同標(biāo)本缺失9例）。

所有患者均完成4周期NAC，每21 d為一周期，NAC結(jié)束后第14～20 d行新輔助化療療效評價(jià)，同時(shí)行乳腺癌改良根治術(shù)或保留乳房的乳腺癌根治術(shù)。NAC前后均行乳腺B超檢查。

1.2 療效評價(jià)

根據(jù)實(shí)體瘤的療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（RECIST 1.0）分為：部分緩解（partial response，PR）：腫瘤最大長徑總和縮小30%以上；完全緩解（clinical complete response，CR）：臨床檢查不到腫瘤；進(jìn)展（progressive disease，PD）：與最小值相比腫瘤最大長徑總和增加20%以上；穩(wěn)定（stable disease，SD）：既不能滿足PR又不能滿足PD定義為SD；[（CR+PR）/總例數(shù)]×100%為有效率（response rate，RR）。手術(shù)標(biāo)本中如有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，原發(fā)腫瘤無浸潤性病灶為原發(fā)灶完全緩解（tumor pathologic complete response，tpCR）；原發(fā)腫瘤及淋巴結(jié)無浸潤性病灶殘留為病理完全緩解（pathologic complete response，pCR）。

1.3 標(biāo)記物敏感性評價(jià)

組織標(biāo)本予以免疫組織化學(xué)染色、經(jīng)病理科醫(yī)師讀片，隨機(jī)選取5個(gè)高倍（×400）視野，計(jì)數(shù)500個(gè)以上細(xì)胞，ER、PR、Ki67陽性為胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，HER-2陽性為胞膜或胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒。根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行半定量，細(xì)胞染色強(qiáng)度計(jì)淺棕色：1分，棕黃色：2分，深棕色：3分；無陽性細(xì)胞：0分，陽性細(xì)胞數(shù)1%～30%：1分，31%～70%：2分，71%～100%：3分。將每張切片進(jìn)行兩項(xiàng)分?jǐn)?shù)累計(jì)，0分：陰性，1～2分：+，3～4分：++，5～6分：+++。其中將ER、PR“+”以上均記為陽性，HER-2“++～+++”記為陽性（過表達(dá)）。Ki67陽性細(xì)胞大多為胞核染色，呈棕黃色，少數(shù)為較弱的胞質(zhì)染色。

激素受體陽性：ER和（或）PR陽性，激素受體陰性：ER陰性及PR陰性。HER-2：++～+++為陽性，0～+為陰性。Ki67按≤10%、11%～30%、31%～70%、Ki67>70%劃分。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)和非參數(shù)檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 化療療效

81例接受手術(shù)，其中9例行保乳手術(shù)，69例行改良根治術(shù)，1例行改良根治術(shù)加Ⅰ期假體植入術(shù)，2例行姑息切除術(shù)。臨床療效：CR 11例，PR 53例，SD 15例，PD 2例，臨床RR 79.0%（64/81）。術(shù)后8例pCR（9.9%）；5例tpCR（6.2%）。

2.2 ER、PR、HER-2、Ki67不同狀態(tài)下與NAC療效的關(guān)系

由表1可知，ER、PR、HER-2及Ki67等因素與NAC療效間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的關(guān)聯(lián)性（P>0.05）。

2.3 NAC前后乳腺癌組織ER、PR、HER-2、Ki67的表達(dá)變化比較

74例乳腺癌患者中，NAC后ER、PR發(fā)生變化的分別為34、35例，HER-2則為16例，所占百分比分別為45.9%、47.3%和21.6%。由表2可知，ER、PR的變化只是陽性分級的改變，其陰性或陽性的狀態(tài)改變不明顯，不足5%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；HER-2在NAC后7例陽性轉(zhuǎn)為陰性，9例陰性轉(zhuǎn)為陽性，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。而Ki67的數(shù)量在NAC前后的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.038）。

ER、PR陽性表達(dá)，HER-2過表達(dá)，Ki67高表達(dá)IHC高倍（×400），見圖1~4。

表1 ER、PR、HER-2、Ki67不同狀態(tài)下NAC療效的比較

表2 NAC前后乳腺癌組織ER、PR、HER-2及Ki67的表達(dá)變化

圖1 ER陽性表達(dá)

圖2 PR陽性表達(dá)

圖3 HER-2過表達(dá)

圖4 Ki-67高表達(dá)

3 討論

國內(nèi)外研究報(bào)道乳腺癌NAC效率可達(dá)70%～80%，約10%～20%可獲得pCR[4-5]。本研究組81例病例，臨床RR 79.0%（64/81）。術(shù)后8例pCR（9.9%），5例tpCR（6.2%），與文獻(xiàn)報(bào)道相近。

ER、PR為基因調(diào)節(jié)蛋白，主要參與調(diào)節(jié)生長因子受體通路，其表達(dá)既為內(nèi)分泌治療提供了依據(jù)，也可預(yù)測患者的預(yù)后，但與NAC療效有無相關(guān)性，目前尚無定論。SPANHEIMER等[6]發(fā)現(xiàn)ER陰性的乳腺癌患者pCR率為18%，NAC可減少乳腺切除率及腋窩淋巴結(jié)清掃率。KRISHNAN等[7]的研究提示接受NAC后，ER或PR陰性者較陽性者可獲得更高的pCR率。在本研究中，達(dá)到pCR+tpCR率，（ER陰性）23.0%>（ER陽性）12.7%，（PR陰性）28.6%>（PR陽性）9.4%，與文獻(xiàn)報(bào)道相近，但ER、PR的狀態(tài)與NAC療效間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的關(guān)聯(lián)性。HER-2過表達(dá)提示腫瘤細(xì)胞增生活躍，理論上應(yīng)對化療更敏感，但有文獻(xiàn)提示，HER-2過度表達(dá)組化療有效率較非過度表達(dá)組更低，耐藥的百分率更高，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[8]，本研究中，HER-2的狀態(tài)與NAC療效間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的關(guān)聯(lián)性，但在13例pCR/tpCR中，8例為HER-2陰性，與文獻(xiàn)報(bào)道相近，有待擴(kuò)大病例數(shù)進(jìn)一步觀察。

Ki67是一種位于10號染色體上的抗原，Ki67染色比例升高，提示細(xì)胞增殖活躍。關(guān)于NAC中Ki67與療效的關(guān)系，很多臨床試驗(yàn)探討過，其陽性節(jié)點(diǎn)的劃分不盡相同（1%～40%）。有研究認(rèn)為Ki67水平升高，則cCR和pCR比例增高[9]。有文獻(xiàn)亦認(rèn)為，Ki67高表達(dá)組的病理有效率高于低表達(dá)組[10]。本研究中，Ki67按10%、30%和70%為陽性節(jié)點(diǎn)，NAC后Ki67表達(dá)呈下降水平，按陽性節(jié)點(diǎn)劃分的達(dá)到pCR+tpCR率分別為6.2%、17.4%、20.0%和18.8%，與文獻(xiàn)報(bào)道相近，但Ki67與NAC療效間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的關(guān)聯(lián)性，這可能與病例較少或陽性節(jié)點(diǎn)定義有關(guān)。

NAC對ER、PR、HER-2、Ki67受體表達(dá)狀態(tài)和水平是否有影響，目前尚存在爭議。國內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道，NAC對乳腺癌ER、PR、HER-2表達(dá)狀態(tài)無顯著影響，但能降低Ki67表達(dá)[11]；亦有研究認(rèn)為NAC能使部分乳腺癌組織中ER、PR和HER-2的表達(dá)發(fā)生改變[12]。本研究中，NAC后ER、PR的變化只是陽性分級的改變，其陰性或陽性的狀態(tài)改變不明顯，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；熀驢ER-2過表達(dá)由陰性轉(zhuǎn)為陽性的為9例，由陽性轉(zhuǎn)為陰性的為7例，其差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而Ki67的數(shù)量在NAC前后的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示Ki67可作為化療藥物敏感性和耐藥性的預(yù)測指標(biāo)。但部分患者激素受體表達(dá)在NAC后發(fā)生改變，其對內(nèi)分泌治療的指導(dǎo)以NAC前為準(zhǔn)還是以NAC后為準(zhǔn)，目前尚無定論，需待進(jìn)一步的研究。

本研究表明，乳腺癌NAC可有效控制腫瘤，ER或PR陰性者較陽性者可獲得更高的pCR+tpCR率，NAC療效與ER、PR、HER-2及Ki67等因素間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的關(guān)聯(lián)性。NAC不改變ER、PR及HER-2的表達(dá)水平，而Ki67的表達(dá)在NAC前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ki67可作為化療藥物敏感性和耐藥性的預(yù)測指標(biāo)?；煹拿舾行允芏喾N因素的影響，擴(kuò)大病例量及結(jié)合其他生物學(xué)標(biāo)記物進(jìn)行綜合分析，可能會(huì)更全面的預(yù)測NAC療效，能更好的指導(dǎo)臨床實(shí)踐。

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（張蕾編輯）

Relationship between expressions of ER,PR,HER-2,K i-67 and effective rate of neoad juvant chemotherapy of breast cancer

Hong Yang1,Fu-ren Zeng1,Jian-lun Liu2,Jun Qiu1
(1.Departmentof oncology,Hunan Provincial People's Hospital,Changsha,Hunan 410005,China; 2.Department of Breast Surgery,Affiliated Tumor Hospital of GuangxiMedical University, Nanning,Guangxi530021,China)

ObjectiveTo investigate the relationship between expressions of ER,PR,HER-2 and Ki-67 and the effective rate of neoadjuvant chemotherapy of breast cancer,and to investigate the predictive index on neoadjuvant chemotherapy for breast cancer.MethodsExpressions of ER,PR,HER-2 and Ki-67 in breast cancer of 81 patients received neoadjuvant chemotherapy were detected by immunohistochemicalmethod before and after chemotherapy. The relationships of expression levels and the effective rate were evaluated.ResultsThe clinical RR in 81 patients was 79%,pCR after surgery was 9.9%,tpCR was 6.2%.Achieved PCR+tPCR rate,(ER-negative)23.0%＞(ER-positive)12.7%,and(PR-negative)28.6%＞(PR-positive)9.4%.There was no statistical difference between ER, PR,HER-2 and Ki67 with neoadjuvant chemotherapy.ER,PR,HER-2 negative or positive changes were not obvious for neoadjuvant chemotherapy,and the difference was not statistically significant(P＞0.05),while the number of Ki67 expression was statistically significant(P＜0.05),which reduced the expression levels of Ki67.ConclusionsNeoadjuvant chemotherapy can effectively control the tumor.ER-or PR-negative receive a high errate of pCR+tPCR comparing with those positive.Ki67may be a predictor for chemotherapy drug sensitivity and resistance.

breast cancer;neoadjuvant chemotherapy;ER;PR;HER-2;Ki-67

R 737.9

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.24.012

1005-8982（2016）24-0054-04

2016-03-11

曾福仁，E-mail：zfrhn@tom.com；Tel：0731-84731705