■楊亞強(qiáng)蔣蘇穎杜 妮熊 華*
(1.南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西南昌330047;2.江西邁吉生化營(yíng)養(yǎng)有限公司,江西南昌330029)
椰子油是一種源于椰子果肉的植物性飽和油脂,含中短鏈脂肪酸比例達(dá)80%以上,其中C12脂肪酸含量占60%,有超過15%的C6、C8、C10脂肪酸。椰子油不僅含有亞油酸、亞麻酸等必需脂肪酸,而且還能改善飼料的適口性,具有高的消化率。隨著現(xiàn)代養(yǎng)豬業(yè)日益規(guī)?;?、集約化的發(fā)展,需要在有限的配方容量里配制出更高營(yíng)養(yǎng)水平的飼料,有效緩解仔豬斷奶綜合癥,提高仔豬成活率,增加養(yǎng)豬業(yè)生產(chǎn)效益。研究發(fā)現(xiàn),在飼糧中添加椰子油雖然對(duì)豬的生長(zhǎng)性能無影響,但增加了血清中膽固醇的含量,改變了脂肪組織的組成。斷奶仔豬飼糧中添加椰子油可以顯著提高料重比和血清高密度脂蛋白含量,但對(duì)日增重和日采食量均無顯著影響。在早期斷奶仔豬飼糧中用大米糖漿替代乳糖對(duì)生長(zhǎng)性能和胰島素生長(zhǎng)因子軸均沒有影響,有促進(jìn)腸道吸收膽固醇的作用,但對(duì)脂肪和蛋白代謝沒有影響。有文獻(xiàn)報(bào)道大米蛋白肽能顯著提高育成豬的日增重、能量代謝率、蛋白代謝率和飼料效率,也能使豬血液中的總蛋白、血糖和丙氨酸轉(zhuǎn)移酶含量提高,并明顯降低豬的腹瀉率、血液中的尿素氮和乳酸脫氫酶的濃度。大米蛋白肽可以直接從腸道吸收,吸收速度比游離氨基酸更快,而且具有多方面的營(yíng)養(yǎng)與生理功能。本課題組前期以稻米經(jīng)過淀粉高溫酶解之后得到的副產(chǎn)品米渣為原料,通過復(fù)合酶酶解制備高純度大米蛋白肽,隨后制備大米蛋白肽-糖漿為壁材的功能性椰子油微膠囊。目前,有關(guān)大米蛋白肽、糖漿和椰子油對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響研究主要集中在單獨(dú)添加,而有關(guān)三者組合使用對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能影響的研究報(bào)道甚少。鑒于此,本試驗(yàn)通過與以大米糖漿為壁材的椰子油微膠囊和基礎(chǔ)飼料組為對(duì)比,考察大米蛋白肽-糖漿為壁材的功能性椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分表觀消化率、血清生化指標(biāo)及其腸道菌群的影響,以探討飼料中添加大米蛋白肽對(duì)斷奶仔豬的影響,為其在斷奶仔豬上的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
本試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),選取90頭25日齡斷奶的“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交仔豬,按體重、性別完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分為3組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10頭。3組分別飼喂基礎(chǔ)飼糧(對(duì)照組CON組)、基礎(chǔ)飼糧+3%以大米糖漿為壁材的椰子油微膠囊(A組)、基礎(chǔ)飼糧+3%以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊(B組)。試驗(yàn)預(yù)飼期7 d,正試期37 d。
試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧為豬場(chǎng)實(shí)際配制飼糧,基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)使用椰子油微膠囊均由實(shí)驗(yàn)室自制。正試期每天飼喂四次,分別在08:00、12:00、16:00、20:00,每次添加飼糧直至槽內(nèi)有少量余料為止。自由飲水和采食,每日清掃圈一次。每隔3 d對(duì)圈舍周圍用百毒殺噴霧消毒。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
1.3.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定
日增重:在試驗(yàn)期間第1 d、第37 d清晨08:00稱量仔豬空腹體重。并計(jì)算試驗(yàn)全期平均日增重(ADG)。
采食量:試驗(yàn)期間以組為單位準(zhǔn)確測(cè)定和記錄每天飼料喂量,并計(jì)算試驗(yàn)全期的平均日采食量(ADFI)。
料重比:根據(jù)試驗(yàn)全期的平均日采食量與平均日增重之比來計(jì)算各個(gè)階段的料重比(F/G)。
1.3.2 養(yǎng)分表觀消化率的測(cè)定
飼養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行到第3周開展為期4 d的消化試驗(yàn),消化試驗(yàn)期每天用收糞夾收集新鮮未污染糞樣(20 g),糞樣稱重后,按照糞樣重量的5%的比例加入10%濃硫酸或鹽酸,置于-20℃冰箱保存,4 d消化試驗(yàn)結(jié)束后將各組試驗(yàn)豬的糞樣混勻,65℃烘箱中烘至恒重,室溫下回潮24 h,稱重,粉碎過40目篩,裝密封袋保存于-20℃冰箱冷凍待測(cè)。
粗蛋白質(zhì)利用半自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定;粗脂肪參照GB/T6433—94的方法進(jìn)行;營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率計(jì)算公式如下所示:
某營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率(%)=(采食量×料中成分-糞量×糞中成分)/采食量×料中成分×100
1.3.3 血清生化指標(biāo)測(cè)定
在試驗(yàn)第37 d,從每組中隨機(jī)挑選1頭仔豬(體重與窩平均體重相近)空腹稱重,然后再前腔靜脈取血15 ml,將采取的新鮮血液注入試管中,采用3 000 r/min離心10 min,制備血清樣品,吸取血清至2.5 ml的EP管中,置于-20℃保存待測(cè)血清生化指標(biāo)。血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。
1.3.4 腸道菌群測(cè)定
大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌濃度:在試驗(yàn)第37 d,從每組中隨機(jī)挑選1頭仔豬屠宰,分別在空腸、回腸和結(jié)腸中部截扎長(zhǎng)5 cm的腸段,將截扎段剪下,立即放入盛有冰塊的疫苗箱中運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,在無菌操作臺(tái)上取0.5 g內(nèi)容物于無菌小瓶中,加無菌稀釋液4.5 ml,震蕩3~5 min,靜置10 min,吸取上清液0.5 ml于盛有4.5 ml無菌稀釋液的小瓶中進(jìn)行10-2稀釋,振蕩3~5 min靜置10 min,依次進(jìn)行10-3~10-8稀釋。將各腸段內(nèi)容物稀釋液50 μl分別接種于麥康凱培養(yǎng)基、LBS培養(yǎng)基、BLb培養(yǎng)基上,每個(gè)稀釋度3個(gè)重復(fù)。大腸桿菌37℃有氧培養(yǎng)24 h進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。雙歧桿菌和乳酸桿菌37℃厭氧培養(yǎng)48 h進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
數(shù)據(jù)采用EXCEL 2007進(jìn)行初步處理,用SPSS 18.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)并進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn),當(dāng)差異顯著時(shí)用Duncan's法進(jìn)行多重比較,結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
表2 椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響
由表2可知,飼糧中添加椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬的平均日增重、平均日采食量均有顯著性影響(P<0.05),對(duì)料重比無顯著性影響(P>0.05)。但處理組中平均日增重以B組最高,分別高出對(duì)照組和A組24.00%、5.08%;處理組中平均日采食量B組最高,分別高出對(duì)照組和A組14.81%、3.33%,有降低料重比的趨勢(shì)。表明飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能促進(jìn)斷奶仔豬的日增重、日采食量,降低料重比。
表3 添加椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響(%)
由表3可知,飼糧中添加椰子油微膠囊對(duì)干物質(zhì)、粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率均有顯著性影響(P<0.05)。處理組間,干物質(zhì)表觀消化率最高的是B組,對(duì)照組最低;粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率也呈同樣的趨勢(shì)。B組中干物質(zhì)、粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率與對(duì)照組相比分別高出4.51%、17.34%、18.76%。B組干物質(zhì)、粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率均高于A組(P<0.05)。表明飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能提高斷奶仔豬對(duì)粗脂肪和粗蛋白質(zhì)的利用效率。
表4 椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響
由表4可知,斷奶仔豬飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊相對(duì)對(duì)照組升高了血清總蛋白、白蛋白、球蛋白的含量,降低了甘油三酯的含量,B組改善效果顯著(P<0.05);對(duì)血清葡萄糖、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白均無顯著性影響。這說明飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能增加血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白濃度,降低甘油三酯濃度。
表5 椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬糞中微生物數(shù)量的影響(lgCFU/g)
從表5可知,飼糧中添加椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬空腸、回腸、結(jié)腸中大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌的數(shù)量均無顯著性影響(P>0.05)。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,斷奶仔豬飼糧中添加椰子油微膠囊可以提高日增重和日采食量,對(duì)料重比無影響。有大量研究表明,仔豬飼糧中單一地添加椰子油和大米糖漿對(duì)生長(zhǎng)性能無顯著影響,添加大米蛋白肽對(duì)生長(zhǎng)性能有顯著影響。Hou等研究發(fā)現(xiàn),用10%大米蛋白替代早期斷奶仔豬飼糧中添加的乳蛋白能夠顯著提高日增重和日采食量,與本試驗(yàn)結(jié)果相同。但也有文獻(xiàn)報(bào)道添加大米蛋白和米糠蛋白對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能無影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加3%椰子油微膠囊對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能有顯著影響,可能是因?yàn)樵撛囼?yàn)添加椰子油微膠囊壁材為大米蛋白肽-糖漿復(fù)合壁材,與椰子油產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。蛋白質(zhì)和碳水化合物是微膠囊化的主要壁材,但在傳統(tǒng)壁材中,這兩種生物大分子是以物理連接的方式形成壁材的,蛋白質(zhì)作為兩親物質(zhì)吸附在界面形成對(duì)欲包埋功能因子與連續(xù)相的隔離,碳水化合物借助其空間穩(wěn)定能力幫助形成具有一定厚度的、致密的微膠囊壁。
仔豬對(duì)飼料的表觀消化率受多種因素的影響,比如豬的品種、環(huán)境、飼養(yǎng)管理等。何若鋼等在飼糧中添加不同的蛋白水平能夠顯著提高豬的粗蛋白質(zhì)、干物質(zhì)等消化率。Cho等研究發(fā)現(xiàn),在飼糧中添加椰子油對(duì)斷奶仔豬粗脂肪的消化率有顯著提高,對(duì)干物質(zhì)和消化能無顯著性影響。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),飼糧中添加椰子油微膠囊對(duì)斷奶仔豬的粗脂肪、粗蛋白質(zhì)和干物質(zhì)均有顯著性提高,表明添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能夠促進(jìn)仔豬對(duì)各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。
血清總蛋白由血清白蛋白和血清球蛋白組成,血清白蛋白主要在肝臟合成蛋白質(zhì)中起作用,血清球蛋白可以反應(yīng)動(dòng)物的一個(gè)免疫水平和抵抗力。血清總蛋白是動(dòng)物體內(nèi)反應(yīng)蛋白質(zhì)水平及代謝的一個(gè)風(fēng)向標(biāo),總蛋白含量高說明動(dòng)物的蛋白質(zhì)合成代謝速度快。本試驗(yàn)結(jié)果表明,斷奶仔豬飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊后對(duì)血清總蛋白、白蛋白、球蛋白均有顯著提高。這說明該椰子油微膠囊能夠促進(jìn)仔豬體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和增強(qiáng)免疫能力。血清甘油三酯反應(yīng)體內(nèi)脂質(zhì)代謝的情況,本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊后甘油三酯含量顯著降低,對(duì)血清葡萄糖、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白無顯著影響,這與Le等的研究結(jié)果一致,這說明添加椰子油微膠囊能夠促進(jìn)體內(nèi)脂肪的代謝和利用,從而降低了血清TG含量。膽固醇含量有降低趨勢(shì),這與熊尉杰的研究相同,大米蛋白肽能夠有效降低人體血清膽固醇,還有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化等多種生理功能。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)小肽分子比游離氨基酸和蛋白質(zhì)更容易消化吸收。
斷奶對(duì)仔豬是一個(gè)很大的應(yīng)激,影響仔豬生理功能,特別是腸道菌群失調(diào),進(jìn)而影響?zhàn)B分消化率、生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,A、B兩組空腸、回腸中大腸桿菌數(shù)量均低于對(duì)照組,雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量均高于對(duì)照組,但差異不顯著。這個(gè)趨勢(shì)與王留等在飼糧中添加大棗多糖的效果相同。有研究發(fā)現(xiàn),斷奶仔豬飼糧中添加益生菌有降低大腸桿菌的作用,并且可以提升仔豬生長(zhǎng)性能,這與添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊有類似效果,這說明添加該椰子油微膠囊可能會(huì)調(diào)節(jié)斷奶仔豬空腸、回腸的pH值,利于雙歧桿菌、乳酸桿菌繁殖,又能有效抑制大腸桿菌。
本試驗(yàn)在斷奶仔豬飼糧中添加3%以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊后顯著提高了仔豬生長(zhǎng)性能和養(yǎng)分表觀消化率,對(duì)血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯有顯著影響,對(duì)腸道菌群有改善趨勢(shì)。這說明該椰子油微膠囊可能是仔豬飼料的一種新的添加劑,為科學(xué)制定仔豬蛋白、油脂需要模式,為大米蛋白肽在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。